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Introdução à Genética Estrutura e Replicação do DNA Prof. Marcos Euzébio Maciel marcos.maciel@ifpr.edu.br Funções do Material Genético •Genotípica – REPLICAÇÃO • Estocar e transmitir a informação genética. “Passagem da Informação” • Fenotípica – EXPRESSÃO GÊNICA • Controle do desenvolvimento do fenótipo. “Estabilidade da Informação” • Evolutiva – MUTAÇÃO • Passível de mudanças para adaptação. “Mudança Relativa da Informação” A Estrutura do DNA 1953 – James Watson e Francis Crick descreveram a estrutura do DNA A Estrutura do DNA • DNA – Ácido desoxirribonucléico. Uma molécula formada por duas fitas polinucleotídicas complementares em dupla-hélice, responsável por armazenar e transmitir as informações genéticas A Estrutura do DNA A Estrutura do DNA A Estrutura do DNA •Os nucleotídeos ligam-se pelo Fosfato e pela Desoxirribose para formar uma cadeia ou fita A Estrutura do DNA • Ligações Químicas do DNA • Ligação Fosfodiéster – Ligação covalente entre o Fosfato e a Pentose • Ligação Glicosídica – Ligação covalente entre a Pentose e a Base Nitrogenada • Pontes de Hidrogênio – Ligação fraca oiu interação entre as Bases Nitrogenadas. • A destruição das ligações Fosfodiéster e Glicosídica é chamada de Degradação e a destruição das Pontes de Hidrogênio de Desnaturação A Estrutura do DNA A Estrutura do DNA –Dupla Hélice Estrutura Cromossômica em Eucariotos • Maioria é Diplóide • Possuem quantidade de DNA várias vezes maior do que os procariotos e vírus • Possuem DNA não codificante • Vários cromossomos, cada um com uma molécula de DNA • Níveis de compactação do DNA Estrutura Cromossômica em Eucariotos • Três níveis de compactação: • Colar de Contas • Solenóide • Arcabouço de Proteínas Estrutura Cromossômica em Eucariotos A Replicação Semi-Conservativa Origens Únicas de Replicação • Cromossomos bacterianos (procariotos) e virais apresentam uma origem única de replicação • Em E. Coli, uma sequência de 245 nucleotídeos é chamada de ori-C • Ori-C – uma sequência de 13 pb repetida em tandem e rica em A:T – separação das fitas. E uma sequência de 9 pb que se repete 4 vezes intercalada com outras sequências Origens Únicas de Replicação Replicação Bidirecional • A partir da origem, a replicação ocorre nos dois sentidos, sendo portanto bidirecional • Em eucariotos existem várias origens de replicação. Em S. cerevisiae (levedura) existe sequências ricas em A:T de cerca de 50 pb que coincidem em número com as origens de replicação Replicação Bidirecional DNA Polimerases • Enzima que cataliza a síntese de uma nova fita de DNA usando os deoxinucleotídeos como substrato e a uma das fitas como molde • DNA primer (iniciador) – sequência de RNA já ligada a fita molde • Molde de DNA - molde para orientar a síntese DNA Polimerases DNA Polimerases Atividades Funções DNA Pol I () Polimerase 5’3’ Exonuclease 5’3’ Exonuclease 3’5’ - Replicação em Eucariotos junto com Pol III - Retira Primers - Reparo em Procariotos DNA Pol II () Polimerase 5’3’ Polimerase 3’5’ - Reparo em Procariotos - Reparo em Eucariotos DNA Pol III () Polimerase 5’3’ Exonuclease 3’5’ - Replicação em Procariotos - Replicação em Eucariotos junto com Pol I DNA Pol Polimerase 5’3’ - Replicação Mitocondrial (somente em eucarioto) DNA Pol desconhecido - Reparo em Eucariotos (somente em eucariotos) Replicação em Eucariotos • Os cromossomos eucarióticos são duplicados em uma fase pequena do ciclo celular (FASE S) • Existem várias origens de replicação • O primers de eucariotos são menores ( 10 pb) • Usam duas DNA polimerases diferentes – DNA Pol e Replicação em Eucariotos O Processo de Replicação Exercícios –Aula 01 • 1.1) Os genes dos eucariotos e procariotos são segmentos de DNA. Qual a composição de um nucleotídeo desse ácido nucléico? • 1.2) Se um filamento de DNA dupla hélice de Watson e Crick tem um sequência de bases 5’- GTCATGACTGGCAAG – 3’, qual é a sequência de bases do filamento complementar? • 1.3) A temperatura na qual metade de uma dupla hélice de DNA foi desnaturada é chamada de temperatura de dissociação (melting), Tm. Por que a Tm depende diretamente do conteúdo GC do DNA? • 1.4) O que é replicação semiconservativa? • 1.5) O que são origens de replicação? Qual a diferença dessa estrutura em procariotos e eucariotos? • 1.6) Defina DNA polimerase. Quais os elementos necessários para que a DNA polimerase execute sua função? • 1.7) Em que fase do ciclo celular ocorre a replicação do DNA? Por que é necessário que o DNA seja replicado? Introdução à Genética REFERÊNCIAS GRIFFITHS, A. J. F.; MILLER, J. H.; SUZUKI, D. T.; LEWONTIN, R. C.; GELBART, W. M. Introdução à Genética. 7a ed., Rio de Janeiro:Guanabara Koogan, 2002. PIERCE, B. A. Genética: Um Enfoque Conceitual. Rio de Janeiro:Guanabara Koogan, 2004. SNUSTAD, D. P.; SIMMONS, M. J. Fundamentos de Genética. 2a ed., Rio de Janeiro:Guanabara Koogan, 2001.
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