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Aula de Coleta de Material e Isolamento Primário Cássia C. da Motta – Discentes de Mestrado (CPGCV) Anna Carolina C. M. Rojas – Discentes de Mestrado(CPGCV) * * *Sinais Indicativos *Cuidados * Evitar contaminação da amostra e de quem coleta - EPIs *Conservação e Transporte *Identificação das Amostras: *nome, sexo, idade, raça, procedência, data/hora da coleta, informes clínicos e antibioticoterapia. * *Assepsia: conjunto de medidas para impedir a introdução de agentes patogênicos em um ambiente estéril. *Antissepsia: conjunto de medidas que consiste na utilização de produtos degermantes/antissépticos em superfícies vivas com o objetivo de reduzir a carga microbiana. *Desinfecção: redução muito significativa da carga microbiana em superfícies inanimadas, exceto esporos. *Esterilização: eliminação de todas as formas, inclusive esporos, através de processos físico, químico ou físico- químico. * *Antissepsia do local *Secreção recente *Coleta * * *Antissepsia do local *Punção * *California Mastitis Test (CMT) *Antissepsia do teto *Desprezar 3 primeiros jatos * *Difícil de evitar a contaminação ambiental *Carga microbiana elevada * *Difícil de evitar a contaminação ambiental *Diferentes formas de coleta * * * *Líquido estéril *Bacteremia *Sepse * *Prevenção de DTAs e verificar utilização de BPF *Coleta de amostras varia de acordo com tipo e procedência *Aleatória e peso mínimo *Microrganismos em menor quantidade e metabolismo pode estar alterado por processamentos na indústria * * * *Exigências mínimas Condições atmosféricas *Aeróbio estrito *Anaeróbio estrito *Aeróbio facultativo *Microaerófilo *Anaeróbio aerotolerante * *Ambiente semelhante ao que o microrganismo encontra na natureza *Fatores que influenciam seu desenvolvimento: * Temperatura * Exigência atmosférica * Atividade hídrica *Nutrientes * pH * *Altos teores: composição de estruturas próprias e produção de compostos orgânicos. Ex: água, carbono, hidrogênio e nitrogênio. *Teores médios: fazem parte do papel biológico. Ex: Fósforo, enxofre, sódio, potássio, cálcio e magnésio. *Elementos Traço: elementos exigidos em pequenas quantidades. Ex: Mangânes, zinco, cobre Os microrganismos se nutrem por absorção, selecionando- os através de suas membranas ou paredes. * *Caldos: *Pré-enriquecimento de amostras *Manutenção e refrigeração *Base nutritiva para algumas provas bioquímicas *Sólidos: *Características de colônia *Classificação quanto à composição química: Sintético: composição química de todos os seus nutrientes conhecida. Complexo: composição química de alguns de seus nutrientes é desconhecida * Classificação quanto ao uso: *Básico: cultivo de vários microrganismos *Enriquecimento: contém nutrientes que favorecem o desenvolvimento de qualquer microrganismo *Seletivo: contém substâncias que inibem os microrganismos indesejáveis e/ou favorecem o de interesse. *Diferencial: permite que o microrganismo produza estruturas ou reações que podem ser utilizados na diferenciação de gêneros ou espécies * Amostras Clínicas * * Sulfito XLD Entérico Bismuto Hektoen *Repique em meios seletivos para favorecer o crescimento de determinado microrganismo obtido no isolamento primário; *Podem ser diferenciais, além de seletivos. * *Ágar Manitol Vermelho de Fenol (AMVF): peptona, manitol, vermelho de fenol, cloreto de sódio e agar agar. * Avermelhado; pH 7,4 ± 0,1 * Princípio seletivo: halofílicos * Princípio diferencial: fermentação de manitol * *Ágar Baird-Parker: * Princípio seletivo: cloreto de lítio e telurito; piruvato de sódio e glicina * Princípio diferencial: halos de lipólise e proteólise; colônias negras Esgotamento da alça de platina
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