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Introdução ao metabolismo (RESPOSTAS) 1. Responder as seguintes questões relativas ao mapa metabólico simplificado seguinte sobre a degradação (oxidação) de alimentos: a. Qual a finalidade biológica dos processos descrito no mapa? � A finalidade biológica do processo apresentado na figura é obtenção de energia necessária para o funcionamento do organismo. b. Quais os compostos aceptores de hidrogênio? � Os compostos aceptores de hidrogênio são: as coenzimas (NAD+ e FAD) e ATP (fosforilação oxidativa). c. Quais os compostos necessários para a conversão da forma reduzida das coenzimas na forma oxidada? � Para transformar as coenzimas em sua forma reduzida para oxidada é necessário oxigênio, fosfato inorgânico e ADP. d. Citar a função das coenzimas e do oxigênio na oxidação dos alimentos. � As coenzimas NAD+ e FAD recebem H+ e elétrons produzidos na oxidação da glicose. O oxigênio é usado para oxidar NADH. 2. Analisar as seguintes afirmações: a. A energia dos alimentos é obtida por oxidação. � Correto, pois a oxidação de açucares, proteínas e ácidos graxos, encontrada em alimentos, esta relacionada com a obtenção de energia. b. A oxidação biológica consiste na retirada de hidrogênio (2H) do substrato. � Correto, para ocorrer a oxidação biológica no processo de glicose são retiradas moléculas de H do substrato. c. Os processos celulares que requerem energia utilizam a energia térmica proveniente da oxidação dos alimentos. � Incorreto. Os processos celulares utilizam energia química proveniente da oxidação de alimentos. d. Uma parte da energia da oxidação de alimentos é usada para sintetizar um composto rico em energia. � Correto, parte da energia da oxidação dos alimentos é usada para sintetizar um composto rico em energia (ATP). e. A única função dos alimentos é fornecer energia. � Incorreto. Além de energia, os alimentos fornecem micronutrientes e matéria prima necessária para síntese de tecidos. f. Os compostos característicos de um dado organismo devem ser supridos pela dieta. � Falso pois tudo que é ingerido necessita ser processado antes de tornar-se característico de um organismo. Glicólise, gliconeogênese e formação de acetil –CoA Objetivos para estudo Os objetivos de números 1 a 12 devem ser respondidos utilizando apenas o mapa da glicólise. 1. Quais são os passos irreversíveis? � Os passos irreversíveis da reação de glicólise envolvem gasto de energia. Neste caso, são irreversíveis as seguintes reações: - glicose Glicose 6-P - frutose 6-P Frutose 1,6-P - Fosfoenol piruvato piruvato 2. Quantas moléculas de piruvato se formam a partir de uma molécula de glicose? � Uma molécula de glicose forma 2 moléculas de piruvato. 3. Que hexose dá origem a trioses? � A glicose e a frutosec1,6 Bifostafato são moléculas hexoses que, após oxidadas dão origem a trioses: gliceraldeido 3-fosfato (aldose) e dihidroxi acetona. 4. Indicar as reações de oxido-redução. � As reações de oxi-redução são apresentadas abaixo: - SH2 + NAD+ → NADH + H+ + S - SH2 + FAD → FADH2 + S - NADH + H+ + ADP + Pi NAD+ + H2O+ATP 5. Sabendo que a concentração celular de NAD+ é da ordem de 10-5M, é possível estimar a quantidade de glicose que pode ser convertida a lactato? Não é possível pois o NAD+ é regenerado no processo. 6. Verificar os compostos que apresentam ligações do tipo: a. fosfoenol: fosfoenolpiruvato (gerado pela reação de desidratação do 2- fosfoglicerato); b. anidrido fosfórico: glicerato fosforilado, 2-3 fosfo glicerato. c. éster fosfórico: glicose 1-fosfato. 7. Indicar os compostos ricos em energia. � Na via glicolítica, os compostos fosforilados ricos em energia são: glicose/frutose, glicose 6 fosfato, ADP e ATP. 8. Identificar as reações catalisadas pelos seguintes tipos de enzimas: a. quinase: catalisam a transferência do frupo fosfato de um composto de alta energia para um receptor; (glicose + ATP glicose 6-P +ATP) b. mutase: isomerases que catalisam a transferência de grupos fosfatos de baixa energia, de uma posição para outra, em uma mesma molécula. c. isomerase: catalisam reações de isomeração. d. aldolase: cindem açucares fosforilados originando diidroxiacetona-fosfato e outro açúcar com 3 atomos de carbono a menos que o original. (frutose 1,6-difosfato dihidroxiacetona fosfato + 2 glicerideo – 3- fosfato) e. desidrogenase: catalisam reações de oxi-redução (transferem H do substrato para a coenzima, NAD ou FAD) - substrato + NAD+ NADH + H+ + substrato. 9. Considerando o número de moléculas de ATP consumidas e formadas, estabelecer o saldo final de ATP na degradação de uma molécula de glicose pela via glicolítica. � Nesta via são investidas 2 moléculas de ATP para formação de outras 4 mol.de ATP. Sendo assim, estabelece-se um saldo final de 2 ATP. 10. Sabendo que: Glicose ⇒ 2 lactato ΔGo’ = -196 kJ/mol ATPè ⇒ ADP + Pi ΔG o’ = -31 kJ/mol a. Qual a quantidade de energia que a célula armazena, a partir de um mol de glicose, pela sua degradação através da via glicolítica? Pela relação dada, 2ATP → -62Kj b. Qual a porcentagem de energia armazenada pela célula ao degradar glicose pela via glicolítica? = ΔG de 2ATP/ ΔG (glicose → 2 lactato) = -62/-196 = 32%. 11. Citar os compostos que devem ser fornecidos à via glicolítica para: a. inicia-la (haver formação de lactato): substrato (glicose/frutose), coenzima (NAD+), ATP, fosfato inorgânico, ADP e enzimas.. b. mantê-la em funcionamento. Para manter a via em funcionamento deve haver regeneração do NADH+ formando o NAD+. Além disso, deve haver glicose, ADP e fosfato inorgânico. 12. Indicar a função da via glicolítica � As principais funções da via glicolítica são: gerar ATP (rapidamente), gerar intermediário para reações de síntese e regenerar NADH. 13. Citar a enzima que catalisa a fosforilação da glicose nos tecidos extra hepáticos e seu efetuador alostérico. Citar a enzima que catalisa a mesma reação no fígado. � A fosforilação da glicose nos tecidos extra-hepáticos é realizada com auxílio da enzima hexoquinase, sendo a glicose-6-fosfato seu efetuador alostérico. No fígado, a reação é catalisada pela glicoquinase, sendo que este não sofre inibição alosterica da glicose-6-fosfato. 14. Esquematizar as reações de fermentação alcoólica que possibilitam a obtenção de NAD+ na forma oxidada. Citar exemplos de tecidos ou organismos onde ocorrem fermentação lática e alcoólica. Em que condições o músculo converte glicose e lactato? � Esquema da fermentação alcoólica: - piruvato + H+ acetaldeido - acetaldeido + NADH + H+ etanol + NAD+ A fermentação láctica ocorre nos eritrócitos e em músculos, sendo que os músculos convertem glicose e lactato em condições de baixa disponibilidade de oxigênio. A fermentação alcoólica é realizada principalmente por leveduras. 15. Definir gliconeogênese e citar exemplos de compostos gliconeogênicos. Citar o tecido responsável pela gliconeogênese. � Gliconeogênese é a rota pela qual é produzida glicose a partir de compostos glicanos (lactato, glicerol e aminoácidos). A maior parte dos processos é realizada pelo fígado, entretanto o córtex dos rins, eventualmente, pode realizar o processo. 16. Indicar a localização celular das enzimas da via glicolítica e da gliconeogênese. � As enzimas da via glicolitica encontram-se no citosol, enquanto que na gliconeogenêse as enzimas estão no citosol e na mitocôndria. 17. Comparar as três reações irreversíveis da glicólise com as reações da gliconeogênese que as substituem quanto a regentes, produtos, enzimas e coenzimas. Segue esquema comparativo: Além disso na gliconeogenêse,o piruvato deve ser transformado em oxalato antes de ser transformado em fosfoenol piruvato, para isso utiliza a enzima piruvato carboxilase, a qual tem a biotina como cofator. A transformação da frutose 6-fosfato em frutose-1,6-Bifosfato utiliza, na glicose, a enzima fosfofrutoquinase, enquanto que na gliconeogenese a enzima que faz o procedimento inverso é a fosfato bifosfato fosfatase. Da mesma maneira, na transformação de glicose 6 fosfato em glicose, a gliconeogenese utiliza a enzima glicose 6 fosfatase, enquanto que a via inversa da glicólise utiliza a hexoquinase. 18. Citar as vitaminas necessárias para as seguintes conversões: a. glicose à lactato: nicotinamida b. lactato à glicose: nicotinamida e biotina. 19. Esquematizar as reações catalisadas por fosfofrutoquinase 2 e frutose 2,6- bisfosfatase. 20. Descrever o controle da atividade das seguintes enzimas: hexoquinase, fosfofrutoquinase 1 e 2, frutose 1,6-bisfofatase e piruvato quinase. - Fosfofrutoquinase 1: possui ATP e citrato como inibidores alostericos. Neste caso, o aumento de glucagon diminui a frutose 2,6 bisfofato e favorece a gliconeogenese. - Fosfofrutoquinase 2, possui citrato como inibidor alosterico. -Piruvato quinase é regulado pela presença de acetil-CoA e ATP. A piruvato quinase é inibida alostericamente por ATP diminuindo a afinidade da enzima por PEP. Na gliconeogenese, possui um inibidor alosterico (alanina). Quando a ATP aumenta, a atividade enzimática diminui a taxa de glicólise. O mesmo efeito é verificado quando as taxas de ácidos graxos e acetil CoA aumentam. - Hexoquinase: inibida por glicose 6-fosfato. A hexoquinase muscular normalmente atua em velocidade máxima, contudo quando a concentração de glicose está acima de seu nível normal a enzima é temporariamente inibida levando a taxa de formação de G6P a se igualar a taxa de consumo de G6P. - Frutose 1,6-bisfofatase: controlado por substrato alosterico e/ou fatores hormonais. 21. Citar as enzimas da glicólise e gliconeogênese que têm sua concentração alterada por ação hormonal, indicando o hormônio que atua em cada caso. Na gliconeogenêse a enzima fosfoenolpiruvato carboxiquinase tem sua concentração aumentada em função da presença de glucagon e diminuída pela insulina. Além disso, a insulina ativa a fosfatase 22. Escrever a reação de formação de acetil-CoA a partir de piruvato e indicar: Segue esquema da reação: a. as 5 coenzimas necessárias: tiamina pirofosfato (TPP), coenzima A (CoA), nicotinamida adenina dinucleotideo (NAD+), flavina adenina dinucleotideo (FAD) e acido lipóico. b. as vitaminas envolvidas: Vitaminas hidrossolúveis (tiamina, ácido pantotenico, nicotinamida, riboflavina e ácido lipóico. c. a localização celular: O piruvato do citosol entra na mitocôndria através de translocase especifica, sendo transformado em acetil-CoA e, conectando a glicólise ao ciclo de Krebs. 23. Descrever a regulação alostérica e por modificação covalente do complexo piruvato desidrogenase. Os moduladores alostéricos, inibem as atividades catalíticas. Tais inibidores são os produtos da via: NADH, acetil-CoA e ATP (ativam a quinase e inibem o complexo). Em relação à modificação covalente reversível, este complexo enzimático é inibido por fosforilação (mediado pela piruvato desidrogenase) e ativado por desfosforilação (mediada pela presença de piruvato desidrogenase fosfatase).
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