23-Replicação

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Replicação
Novembro
2014
Universidade Federal do Ceará
Centro de Ciências
Introdução a Bioquímica
Daniele de Oliveira Bezerra Sousa
Replicação do DNA
Replicação do DNA
Como os organismos conseguem criar cópias de si mesmos?
As fitas de DNA são complementares entre si
Cada fita serve de molde para uma uma nova fita com sequencia previsível e complementar. 
Mecanismos enzimáticos idênticos em todas as espécies.
Supertorção do DNA
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Supertorção do DNA
Propriedades do DNA
Replicação do DNA
Regras fundamentais:
Semiconservativa – cada fita serve de molde para a síntese de uma nova fita, produzindo duas moléculas novas de DNA cada uma formadas por uma fita nova e uma fita antiga.
Meselson e Stahl (1957)
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Replicação do DNA
Trítio
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Replicação do DNA
Regras fundamentais:
Tem início na origem e geralmente ocorre bidirecionalmente
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Replicação do DNA
Regras fundamentais:
A síntese de DNA procede na direção 5´ 3´ e é semidescontínua.
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DNA-polimerases
DNA polimerase 1 de E. coli – Foi a primeira descoberta (1955)
E. coli – Pelo menos 5 DNA-polimerases
Requisitos das polimerases: MOLDE e um INICIADOR
Todas possuem atividade de revisão
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Como ocorre o alongamento da nova fita
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Como ocorre o alongamento da nova fita
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Atividade exonucleásica 3´ 5´
2 Sítios ativos – Um de polimerização e outro de edição
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Atividade exonucleásica 3´ 5´
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Atividade exonucleásica 3´ 5´
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Atividade exonucleásica 3´ 5´
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Atividade exonucleásica 3´ 5´
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Atividade exonucleásica 5´ 3´
Pode substituir um segmento de DNA ou RNA – Deslocamento de corte
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DNA-polimerase III
Principal polimerase de E. coli
10 subunidades
Atividade de polimerização - 
Atividade de edição - 
  
  
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Comparação das polimerases de E. coli
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Outras enzimas envolvidas na replicação
A replicação envolve mais de 20 enzimas ou proteínas
Complexo inteiro – Sistema da DNA-replicase ou replissomo.
Além de polimerases: helicases, topoisomerases, proteínas de ligação ao DNA (SSB – single stranded DNA binding proteins), primases e DNA ligases. 
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Etapas da Replicação
Iniciação
Alongamento
Terminação
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Iniciação
Origem de replicação de E. coli (oriC)
DUE (DNA unwinding elemento)– Elemento de desenrolamento do DNA
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Iniciação
Origem de replicação de E. coli (oriC)
DUE (DNA unwinding elemento)– Elemento de desenrolamento do DNA
(Helicase)
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Iniciação – Enzimas envolvidas
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Síntese dos fragmentos de Okazaki
(RNA polimerase)
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Síntese dos fragmentos de Okazaki
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Síntese dos fragmentos de Okazaki
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Terminação
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