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Ciclo de Krebs - Objetivo para estudo 1) Na oxidação de uma molécula de acetil-CoA no ciclo de Krebs, indicar a enzima que catalisa a reação onde há produção ou consumo de: a) CO2 = isocitrato desigrogenase e α-cetoglutamato desidrogenase b) GTP = succinil-Coa sintase c) NADH = isocitrato desidrogenase, α-cetoglutamato, malato desidrogenase d) FADH2 = succinato desidrogenase e)H2O = citrato sintase consome H2O e gera CoA 2) Indicar o composo rico em energia do ciclo de Krebs e a reaçõ que o produz. Succinil -CoA e GTP. 3) Citar os compostos que devem ser fornecidos ao ciclo de Krebs para: a) iniciá-lo (repor o oxaloacetato usado na primeira reação. É necessária a presença de piruvato/aspartato e acetilCoA. b) Mantê-lo em funcionamento. NAD+ e AcetilCoA 4) Citar as vitaminas que participam do ciclo de Krebs. Nicotinamida (percursora deNAD+), Riboflavina (percursora de FAD) e acido pantoneico (percursor de CoA). 5) indicar a localização celular do ciclo de Krebs. O ciclo de Krebs ocorre na matriz da mitocôndria. 6) Na reação catalisada pela aconitase, indicar o composto predominante no equilíbrio. Pela reação (citrato → isocitrato) tem-se que o citrato é o composto predominante. 7) Descrever a regulação da citrato sintase, da isocitrato desidrogenase e do complexo - cetoglutarato desidrogenase. 8) Esquematizar a reação catalisada pela piruvato carboxilase e indicar seu efetuador alostérico. Os produtos da via ( NADH, acetil-CoA e ATP) são os efetuadores alostéricos negativos do complexo, pois ativam a quinase. A reação catalisada pelo piruvato carboxilase é: piruvato + CO2 → oxaloacetato 9) Listar as funções do ciclo de Krebs. Oxidação de compostos (ex. acetilCoA), queima de lipídios, síntese de percursores em vias biossinteticas (aspartato, glutamato, lipídio, heme). 10) Analisar as reações do ciclo de glioxalato, verificando a conversão que é por ele viabilizada. Reações do ciclo do glioxilato: Isocitrato → succinato + glioxalato Glioxalato → aceGlCoA Glioxalato + acetilCoA → malato O Succinato regenera o oxalloacetato. Tanto o malato como a oxaloacetato são necessários para o ciclo de Krebs. 11) Citar os organismos que dispõem do ciclo do glioxalato. Vegetais e algumas bactérias. 12) Que composto é oxidado no ciclo de Krebs? Isocitrato → α-cetoglutamato, succinato → fumarato e malato → oxaloacetato. 13) Simultaneamente que tipo de composto sofre redução?FAD → FADH2 e NAD+ →NADH + H+ 14) Os seguintes compostos foram adicionados, separadamente, a um sistema in vitro que contém mitocôndrias: acetil-CoA, piruvato, glutamato, citrato, ou ácidos graxos. Supondo que as enzimas necessárias estejam presentes no sistema, a adição de que compostos fará aumentar a concentração de oxaloacetato? A adição de pituvato, acetilCoA e citrato poderá aumentar a concentração de oxaloacetato. 15) Uma suspensão de mitocôndrias, suplementada com acetil-CoA marcada com C14, produz CO2 marcado apenas quando suprida de oxigênio. Em condições anaeróbicas, a adição de azul de metileno restaura a produção de CO2 marcado, observando-se também a descoloração do corante (azul de metileno reduzido é incolor). Justifique estes resultados. Pelo ciclo de Krebs temos: Acetil CoA → CO2 Tal reação ocorre em presença de oxigênio que tem a função de reoxidar NADH e FADH. Nessas condições, o oxigênio, através de reação de redução, se liga ao H de NADH ou FADH transformando-se em uma molécula de água. Em condições anaeróbicas e, em presença de azul de metileno, a reação continua acontecendo, entretanto o oxigênio utilizado vem do próprio azul de metileno, o qual em condições oxidativa apresenta cor azul e, após redução fica incolor.
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