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INSTRUMENTAÇÃO BIOMÉDICA Hematologia Laboratorial – Técnicas & Aplicações Prof. Jannison Ribeiro • Tópicos da aula: • Definição dos conceitos básicos em Hematologia; • Compreensão das principais técnicas empregadas no laboratório clínico; • Técnicas manuais x Automação dos exames hematológicos. • O sangue é um tecido de aspecto líquido do meio interna que circula rapidamente dentro de um sistema fechado de vasos denominado sistema circulatório; • Constituído por um fluido com características físico e químicas constantes; • Presença de células em suspensão, moléculas e íons dissolvidos. Hematopoiese Fisiologia dos eritrócitos • São células pequenas, circulares, com forma aproximada de discos bicôncavos, com 7,5 µm de diâmetro e sem núcleo. Sobrevida de aproximadamente 120 dias; • Cerca de 4,5 – 6,1 milhões/mm3 (Homem); • Cerca de 4,1 – 5,3 milhões/mm3 (Mulher); • Ricas em hemoglobina. Fisiologia dos leucócitos • São elementos figurados do sangue que estão diretamente envolvidos na resposta contra doenças e infecções, renovação tecidual, resposta alérgica e inflamatória; • São formados por precursores na medula óssea atingindo em seguida o sangue periférico. • Menor número que os eritrócitos (4000 – 10000/ mm3). Leucócitos • Neutrófilos; • Eosinófilos; • Basófilos; Granulares • Monócitos; • Linfócitos. Agranulares Leucócitos – Os neutrófilos e Bastões • São conhecidos também como polimorfonucleares e correspondem cerca de 50 a 70% dos leucócitos circulantes; • Possuem grânulos citoplasmáticos pequenos corados fracamente em púrpura-avermelhado. • Fagocitose bactérias e corpos estranhos; • Infecções agudas Presença de bastões (Desvio a esquerda). • VR: 1400 – 6500/ mm3. Leucócitos – Eosinófilos • Possuem grânulos corados em laranja-avermelhado e fagocitam complexos antígeno –anticorpo; • Seus núcleos geralmente têm dois lobos conectados por um filamento; • Aumenta de forma muito acentuada no sangue circulante durante as reações alérgicas e as infestações parasitárias. • VR: 0 - 700/mm3 Leucócitos – Basófilos • Possuem grânulos relativamente grandes corados em azul-púrpura; • liberam histamina (contribui para as respostas alérgicas dilatando e permeabilizando os vasos sanguíneos) e heparina (previne a coagulação do sangue); • VR: 0 – 400/ mm3. Leucócitos – Monócitos • Células relativamente grandes e que possuem um único núcleo; • São capazes de entrarem no tecido conjuntivo frouxo, onde se desenvolvem em grandes células fagocíticas denominadas macrófagos; • Ingestão de bactérias, substâncias estranhos e células mortas. • VR: 0 – 1000/ mm3. Leucócitos – Linfócitos • São o segundo tipo mais abundante de leucócitos( após os neutrófilos), compreendendo cerca de 30% dos glóbulos brancos em circulação; • São pequenos (pouco maiores que os eritrócitos), tem um núcleo que é circular; • Imunidade adquirida. • VR: 1200 – 4000/ mm3. Plaquetas • As plaquetas, ou trombócitos, são fragmentos celulares que se formam na medula óssea vermelha, a partir da fragmentação do citoplasma de glóbulos brancos gigantes, denominados megacariócitos; • As plaquetas são minúsculas e possuem forma elipsóide e vários grânulos internos; • VR: 150.000 a 450.000/ mm3. Hemograma • Hemograma é um exame que avalia as células sanguíneas de um paciente, ou seja, as da série branca e vermelha, contagem de plaquetas, reticulócitos e índices hematológicos; • Outros parâmetros hematimétricos são avaliados: Hemoglobina, hematócrito, contagem diferencial de leucócitos (completo). Hemograma Completo • Eritrograma; Valores Hb; Hematócrito. Índices hematimétricos (VCM. HCM. CHCM, RDW) • Leucograma; Diferencial de leucócitos; • Plaquetas. É importante saber extrair ao máximo as informações e saber interpretá-las de modo correto! Hemograma Hemograma LEUCÓCITOS,HEMÁCIAS,PLAQUETAS ALERTA“ ͞FLAG“͟ PARÂMETROS,INDICES HEMATIMÉTRICOS HISTOGRAMAS ALT. MORFÓLOGICAS ALT. NA MATURAÇÃO ALT. NUMÉRICAS Número de glóbulos vermelhos • Os valores normais variam de acordo com o sexo e com a idade. • Valores normais: Homem de 5.000.000 - 5.500.000, Mulher de 4.500.000 - 5.000.000. • Seu resultado é dado em número por mililitro (ml). Dosagem de hemoglobina (Hb): • Quantidades baixas de hemoglobina indicam anemia. • É feita em espectrofotômetro e contadores. VR: 13.5 a 18.0 g/dL (Homem) 11.5 a 16.4 g/dL (Mulher) Hematócrito • É um índice (%) definido pelo volume de todas as hemácias de uma amostra sobre o volume total desta amostra. Hematócrito • Pode ser realizado por técnica de Wintrobe (Macrohematócrito – EM DESUSO!!!) ou pela técnica de MICROHEMATÓCRITO. Wintrobe - Macrohematócrito 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 20 40 80 100 Microhematócrito VGM = Ht (fl) Hm HGM = Hb (g/dl) Hm CHGM = Hb (%) Ht VCM - Volume médio das hemácias. HCM - Quantidade média de Hb, em peso, nas hemácias. CHCM- Concentração média de Hb nas hemácias. RDW - Distribuição gráfica das hemácias de acordo com o volume globular. Índices hematimétricos. 0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 15 30 45 60 75 90 10 5 12 0 13 5 15 0 16 5 Hemograma – Alterações das Hemácias Hemácias elípticas (hereditária) Hemácias em alvo (Talassemias) Esferócitos (Heridit./Medicamentoso) Hemácias crenadas (Queimaduras ext.) Hemograma – Alterações das Hemácias Hemácias em Roleaux (Miel. Múltiplo) Estomatócitos (Alcoolismo) Hemácias em foice (Drepanocitose) Hemácias em lágrima (Lesão Macro. SER/ Expulsão de restos nucleares) Leucograma • É o estudo da série branca (ou leucócitos), faz-se uma contagem total dos leucócitos e uma contagem diferencial contando-se 100 células. • O adulto normalmente apresenta de 5.000-10.000 leucócitos por 1 mm³ de sangue. Leucograma – Neutrófilos Leucograma – Eosinófilos EOSINOFILIA • Alergias, Asma, Urticária. • Drogas: Alopurinol • Miscelânias: Granuloma eosinofílico • Poliarterite nodosa • Sarcoidose • Pós-irradiação Solar • Parasitas Ancilóstomos, áscaris • Doenças de pele Eczema, • Psoríase • Doença Neoplásica • Leucemia eosinofílica Leucograma – Basófilos MONOCITOSE Leucograma – Monócitos Doença de Crohn Malária Leucograma – Linfócitos LINFOCITOSE Mononucleose/Linfócitos ativados L.L.A. • LMC, policitemia vera, Síndrome Mielodisplásica. Contagem plaquetas • A contagem de plaquetas é um exame que avalia as plaquetas quantitativamente; • A contagem de plaquetas é feita por estimativa na lâmina, a contagem em câmara de Neubauer ; • Realizada nas situações em que a quantidade de plaquetas observadas no esfregaço corado se encontra fora dos parâmetros normais da espécie ou quando há solicitação para tal contagem. Agregado Plaquetário Macroplaqueta Observações: A avaliação da morfologia das plaquetas também faz parte do hemograma, a presença de macroplaquetas ou agregados plaquetários exerce influência sobre a contagem e função plaquetária e por isso devem ser descritos no laudo. Contagem plaquetas Contagem direta de plaquetas em câmara de Neubauer. Hemograma Manual Contagensmanuais do número de hemácias, plaquetas e leucócitos podem serem feitas em câmara de Neubauer, após uma diluição prévia do sangue. Hemograma Lâminas homogêneas SPS- Evolution Lâminas irregulares Método manual SPS Evolution esfregaço homogêneo coloração ideal melhores resultados Automação em Hematologia Clínica!!! Automatizado • É feito em aparelhos que usam uma pequena quantidade de sangue e possuem dois sensores principais: um detector de luz e um de impedância elétrica (efeito Coulter). • Mais modernos Citometria de fluxo. Hemograma INSTRUMENTAÇÃO BIOMÉDICA Hematologia laboratorial – Técnicas & Aplicações Prof. Jannison Ribeiro
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