Manual de Bancada BIOQUÍMICA Labtest

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ÁCIDO ÚRICO Liquiform – Ref. 73 
 
Princípio 
 
O ácido úrico é oxidado pela uricase à alantoína e peróxido de hidrogênio. O peróxido de hidrogênio 
na presença da peroxidase reage com o DHBS e a 4-aminoantipirina, formando o cromogênio 
antipirilquinonimina. A intensidade da cor vermelha formada é diretamente proporcional à 
concentração do ácido úrico na amostra. 
 
Reagentes 
 
Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Padrão – 6,0 mg/dL - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Os reagentes 1 e 2 contém azida sódica. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro, urina e líquidos (amniótico e sinovial). O analito é estável 3 dias entre 2 - 8 °C e 6 meses 
a 10 °C negativos. 
 
Preparo do Reagente de Trabalho 
 
Transferir o conteúdo de um frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente 1 e homogeneizar 
suavemente. Anotar a data de expiração. 
Estável 5 dias entre 15 – 25 °C e 90 dias entre 2 – 8 °C. Identificar o frasco do Reagente de Trabalho. 
Opcionalmente pode-se preparar menor volume do Reagente de Trabalho utilizando a proporção de 
4,0 mL do Reagente 1 para 1,0 mL do Reagente 2. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Enzimático Trinder 
 
Reação de Ponto Final 
 
Procedimento 
 
Urina: homogeneizar a urina, separar 10 mL, acertar o pH entre 7,0 e 9,0 com NaOH 5% e aquecer 
10 minutos a 56 °C para dissolver os cristais de urato e ácido úrico. Diluir a urina 1:10 (0,1 mL de 
urina + 0,9 mL de água destilada). Multiplicar o resultado obtido por 10 (dez). 
 
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: 
 Branco Teste Padrão 
Amostra --- 0,02 mL --- 
Padrão (nº3) --- --- 0,02 ml 
Reagente de Trabalho 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL 
Misturar e colocar em banho-maria a 37 °C durante 10 minutos. O nível da água no banho deve ser 
superior ao nível do reagente nos tubos de ensaio. Determinar as absorbâncias do teste e padrão em 
520 nm ou filtro verde (490-540) acertando o zero com o branco. A cor é estável por 15 minutos. 
 
Cálculos 
 
Absorbância do teste 
Ácido Úrico (mg/dL) = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 6 
 Absorbância do padrão 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear até 20 mg/dL. Para valores maiores diluir a amostra com NaCI 150 
mmol/L (0,85%) e repetir a medição. Multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. 
ÁCIDO ÚRICO Liquiform – Ref. 73 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Soro (mg/dL) 
Homem 1,5 a 6,0 
Crianças Mulher 0,5 a 5,0 
Homem 2,5 a 7,0 
Adultos Mulher 1,5 a 6,0 
 
Urina: 250 a 750 mg/24 horas 
 
Conversão: Unidades Convencionais (mg/dL) x 59,5 = Unidades SI (µmol/L). 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Ácido Úrico Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
 
ALBUMINA – Ref. 19 
 
Princípio 
A albumina tem a propriedade de se ligar à uma grande variedade de ânions orgânicos e 
moléculas complexas de corantes. 
O sistema de medição se baseia no desvio do pico de absortividade máxima de um corante 
complexo (verde de bromocresol) quando este se liga à albumina. A cor formada é medida 
colorimetricamente entre 620 e 640 nm, sendo proporcional à quantidade de albumina na 
amostra até a concentração de 6,0 g/dL. 
 
Reagentes 
1. Reagente de Cor - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
2. Padrão 3,8 g/dL - Armazenar entre 2 - 8 °C. Contém azida sódica. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
Usar soro. Não usar plasma. A albumina é estável no soro 3 dias entre 2 - 8 °C e 7 dias a 10 °C 
negativos. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Verde de Bromocresol (VBC) com tampão citrato 
 
Reação d Ponto Final 
 
Procedimento 
 
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: 
 Branco Teste Padrão 
Reagente de Cor (no 1) 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL 
Amostra 
Padrão (no 2) 
— 
— 
0,01 mL 
— 
— 
0,01 mL 
Misturar e após 2 minutos, no máximo 10 minutos, determinar as absorbâncias do teste e 
padrão em 630 nm ou filtro vermelho (600 a 640) acertando o zero com o branco. 
 
Cálculos 
 
 Absorbância do teste 
Albumina (g/dL) = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 3,8 
 Absorbância do padrão 
 
Linearidade 
O resultado da medição é linear até 6,0 g/dL. Para valores maiores diluir a amostra com NaCI 
150 mmol/L (0,85%) e repetir a medição. Multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. 
 
Intervalo de Referência 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Crianças e Adolescentes (g/dL) 
1 a 30 dias 2,6 a 4,3 
31 a 182 dias 2,8 a 4,6 
183 a 365 dias 2,8 a 4,8 
1 a 18 anos 2,9 a 4,7 
 
Adultos: 3,5 a 5,5 g/dL 
 
Conversão: Unidades Convencionais (g/dL) x 144,9 = Unidades SI (µmol/L) 
 
Referência 
Instruções de Uso: Albumina – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
ALT/GPT Liquiform – Ref. 108 
 
Princípio 
 
A ALT catalisa especificamente a transferência do grupo amina da alanina para o cetoglutarato, com 
formação de glutamato e piruvato. O piruvato é reduzido à lactato por ação da lactato desidrogenase 
(LDH) enquanto que a coenzima NADH é oxidada a NAD. 
A redução da absorbância em 340 ou 365 nm, conseqüente à oxidação da NADH, é monitorada 
fotometricamente sendo diretamente proporcional à atividade da ALT na amostra. 
 
Reagentes 
 
Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Reagente 3 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Os reagentes 1, 2 e 3 contêm azida sódica. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (EDTA, Heparina). A atividade enzimática permanece estável durante 4 dias entre 2 
- 8 °C e 2 semanas a 10 °C negativos. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Cinética UV - IFCC 
 
Reação Cinética Contínua decrescente 
 
Determinação da Atividade Enzimática Utilizando o Piridoxal Fosfato 
 
Para obtenção de resultados rastreáveis ao método de referência IFCC, é necessário utilizar o 
procedimento bireagente, para que a enzima seja totalmente ativada pelo piridoxal fosfato. 
 
Preparo do Reagente 
 
Transferir 0,300 mL do Reagente 3 para um frasco do Reagente 1 (24 mL) e homogeneizar suavemente. 
Estabilidade: 21 dias entre 2 - 8 °C e 24 horas entre 15 - 25 °C quando não houver contaminação 
química ou microbiana. Anotar a data de expiração. 
Opcionalmente pode-se preparar um volume menor da mistura (Reagente 1 + Reagente 3) adicionando-
se 1 parte do Reagente 3 a 80 partes do Reagente 1 (exemplo: adicionar 0,010 mL do Reagente 3 a 
0,800 mL do Reagente 1). 
 
Procedimento do Teste 
 
1. Em um tubo rotulado Teste ou Calibrador, pipetar 0,800 mL da mistura Reagente 1 + Reagente 3. 
2. Adicionar 0,100 mL de amostra ou calibrador de enzimas, homogeneizar e incubar em banho- maria 
a 37 ± 0,2 °C por 5 minutos. Após essa incubação, pode-se esperar até 30 minutos para iniciar a 
medição cinética com a adição do reagente 2. 
3. Ajustar o zero do fotômetro em 340 nm com água destilada ou deionizada. 
4. Adicionar 0,200 mL do Reagente 2, homogeneizar e transferir imediatamente para a cubeta 
termostatizada a 37 ± 0,2 °C. Esperar 1 minuto. 
5. Registrar a absorbância inicial (A1) e disparar simultaneamente o cronômetro. Após 2 minutos 
registrar a absorbância (A2). 
 
Determinação da Atividade Enzimática sem a Utilização do Piridoxal Fosfato 
 
Preparo do Reagente de Trabalho 
Transferir o conteúdo de um frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente1 e homogeneizar 
suavemente. O Reagente de Trabalho é estável 14 dias entre 2 - 8 °C e 24 horas entre 15 - 25 °C 
quando não houver contaminação química ou microbiana. Anotar a data de expiração. 
Opcionalmente pode-se preparar um volume menor do reagente de trabalho misturando-se 1 parte do 
Reagente 2 a 4 partes do Reagente 1 (exemplo: misturar 0,200 mL do Reagente 2 e 0,800 mL do 
Reagente 1). 
ALT/GPT Liquiform – Ref. 108 
 
Procedimento do Teste 
 
1. Em um tubo rotulado Teste ou Calibrador, pipetar 1,0 mL do reagente de trabalho. 
2. Ajustar o zero do fotômetro em 340 nm com água destilada ou deionizada. 
3. Adicionar 0,100 mL de amostra ou calibrador de enzimas, homogeneizar e transferir imediatamente 
para a cubeta termostatizada a 37 ± 0,2 °C. Esperar 1 minuto. 
4. Registrar a absorbância inicial (A1) e disparar simultaneamente o cronômetro. Após 2 minutos 
registrar a absorbância (A2). 
 
Absorbância inicial (A1) igual ou menor que 0,8 é um indicativo de que a amostra tem atividade elevada 
de ALT. Neste caso, diluir a amostra e repetir a medição (ver linearidade). 
 
Cálculos 
 
ΔA/minuto (Teste ou Calibrador) = (A1 – A2) / 2 
 
 Atividade do Calibrador 
Fator = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ 
 ΔA/minuto Calibrador 
 
ALT (U/L) = ΔA/minuto Teste x Fator 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear entre 3,5 a 400 U/L. Para valores maiores, diluir a amostra com NaCl 
150 mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Idade Masculino (U/L) Feminino (U/L) 
1 - 30 dias 
1 - 6 meses 
7 - 12 meses 
1 - 3 anos 
4 - 11 anos 
12 - 15 anos 
Adultos 
20 - 54 
26 - 55 
26 - 59 
19 - 59 
24 - 49 
24 - 59 
11 - 45 
21 - 54 
26 - 61 
26 - 55 
24 - 59 
24 - 49 
19 - 44 
10 - 37 
 
Conversão: Unidades Convencionais (U/L) x 16,7 = Unidades SI (nkat/L). 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: ALT/GPT Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
AMILASE CNPG Liquiform – Ref. 25 
 
Princípio 
 
A α-Amilase hidrolisa o substrato α-(2-cloro-4-nitrofenil)-β-1,4-galactopiranosilmaltoside (Gal-G2-α-CNP), 
liberando 2-cloro-4-nitrofenol (CNP) e 1,4 galactopiranosilmaltoside (Gal-G2). A velocidade de formação de 
2-cloro-4-nitrofenol pode ser medida fotometricamente e proporciona uma medida direta da atividade da α-
Amilase na amostra. 
 
Reagentes 
 
1. Substrato - Armazenar entre 2 - 8 °C. Contém azida sódica. Contém tiocianato de potássio que é 
venenoso. Não pipetar com a boca. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (heparina) e líquidos (ascítico, duodenal ou pleural). A atividade enzimática é estável 
por 7 dias entre 15-25 °C e por vários meses entre 2-8 °C. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Cinética UV - IFCC 
 
Reação Cinética Contínua decrescente 
 
Procedimento 
 
Condições de reação: comprimento de onda 405 ± 2 nm, cubeta termostatizada a 37°C com 10 mm de 
espessura da solução, banda de passagem de 8 nm ou menos e luz espúria menor que 0,1%. 
 
1. Em um tubo 12x75 pipetar 1,0 mL do Substrato. 
2. Adicionar 0,02 mL de amostra, homogeneizar e transferir imediatamente para a cubeta termostatizada a 
37 ± 0,2 °C. Esperar 1 minuto. 
3. Fazer a leitura da absorbância inicial (A1), disparando simultaneamente o cronômetro. Repetir a leitura 
após 2 minutos (A2). 
 Para verificar a linearidade da reação, fazer também uma leitura com intervalo de 1 minuto e verificar se a 
diferença de absorbância em cada minuto é constante. 
 
Cálculos 
 
ΔA/minuto (Teste) = (A1 – A2) / 2 
 
Atividade da Amilase (U/L) = ΔA Teste x 3953 
 
Linearidade 
A reação é linear até 2000 U/L. Para valores maiores, diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L (0,85%), 
realizar nova determinação e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório estabeleça, 
na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Todas as Idades 
Soro/Plasma: 25 a 125 U/L 
 
Urina: até 30 U/h 
Relação Amilase urinária/Creatinina urinária: até 400 U/g 
Depuração da Amilase/Depuração da Creatinina: 1,0 a 4,0% 
 
Conversão de U/L para Unidades SI: μKat = U/L x 0,0167 
 
Referência 
Instruções de Uso: Amilase CNPG Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
AMILASE – Ref. 11 
 
Princípio 
 
A amostra é incubada com um substrato de amido e a diminuição da cor azul, após a adição de iodo, é 
comparada com um controle, sendo proporcional à atividade da amilase na amostra. 
 
Reagentes 
 
1. Substrato - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
2. Reagente de Cor - Estoque - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (heparina) e líquidos (duodenal, pleural e ascítico). A atividade enzimática é estável 7 
dias entre 15 - 25 °C e vários meses entre 2 - 8 °C. 
 
Preparo do Reagente de Cor de Uso 
 
Transferir o conteúdo da ampola para o frasco vazio fornecido no kit, adicionar 45 mL de água destilada ou 
deionizada e misturar. Estável 6 meses entre 2 - 8 °C. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Caraway modificado.(amido-iodo) 
 
Reação Cinética Tempo Fixo com leitura em Ponto Final 
 
Procedimento 
 
Para a dosagem na urina, coletá-la por determinado número de horas (2 horas por exemplo). Ajustar para 
pH entre 7,0 e 7,4 usando carbonato de sódio sólido quando o pH for menor que 7,0 e fosfato 
monopotássico sólido quando for maior que 7,4. 
 
Tomar 2 tubos de ensaio e proceder como a seguir: 
 Teste Controle 
Substrato (nº 1) 0,5 mL 0,5 mL 
Incubar em banho-maria a 37 °C durante 2 minutos. O nível da água no banho deve ser superior ao nível 
dos reagentes nos tubos de ensaio. 
 
Amostra 0,01 mL — 
Misturar e incubar em banho-maria a 37 °C exatamente 7 minutos e 30 segundos (cronometrados). 
 
Reagente de Cor de Uso 0,5 mL 0,5 mL 
Água destilada ou deionizada 4,0 mL 4,0 mL 
Misturar, esperar 5 minutos e determinar as absorbâncias do teste e controle em 660 nm ou filtro vermelho 
(620 a 700), acertando o zero com água destilada. A cor é estável 30 minutos. 
 
Cálculos 
 
 Ac - At 
Amilase (Unidades/dL) = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 800 
 Ac 
 
Ac: Absorbância do controle 
At: Absorbância do teste 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é proporcional à atividade enzimática até 400 Unidades/dL. Para valores maiores, 
diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo 
fator de diluição. 
AMILASE – Ref. 11 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório estabeleça, 
na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Todas as Idades 
Soro: 60 a 160 Unidades/dL 
 
Urina: 50 a 140 Unidades/hora 
Relação Amilase urinária/Creatinina urinária: até 400 U/g 
Depuração da Amilase/Depuração da Creatinina: 1,0 a 4,0% 
 
Definição de Unidade: uma unidade é igual a quantidade de enzima que hidrolisa totalmente 10 mg de 
amido em 30 minutos a 37 °C. 
 
Observações 
 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar 
reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter resistividade ≥1 
megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos <0,1 mg/L. 
 
ReferênciaInstruções de Uso: Amilase – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
AST/GOT Liquiform – Ref. 109 
 
Princípio 
 
A AST catalisa especificamente a transferência do grupo amina do ácido aspártico para o cetoglutarato 
com formação de glutamato e oxalacetato. O oxalacetato é reduzido à malato por ação da malato 
desidrogenase (MDH), enquanto que a coenzima NADH é oxidada à NAD. 
A redução da absorbância em 340 ou 365 nm, conseqüente à oxidação da NADH, é monitorada 
fotometricamente, sendo diretamente proporcional à atividade da AST na amostra. 
 
Reagentes 
 
Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Reagente 2 - Armazenar entre 2 – 8 °C. 
Reagente 3 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Os reagentes 1, 2 e 3 contêm azida sódica. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (EDTA). A atividade enzimática permanece estável durante 4 dias entre 2 - 8 °C e 2 
semanas a 10 °C negativos. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Cinética UV - IFCC 
 
Reação Cinética Contínua decrescente 
 
Determinação da Atividade Enzimática Utilizando o Piridoxal Fosfato 
 
Para obtenção de resultados rastreáveis ao método de referência IFCC, é necessário utilizar o 
procedimento bireagente, para que a enzima seja totalmente ativada pelo piridoxal fosfato. 
 
Preparo do Reagente 
 
Transferir 0,300 mL do Reagente 3 para um frasco do Reagente 1 (24 mL) e homogeneizar suavemente. 
Estabilidade: 21 dias entre 2 - 8 °C e 24 horas entre 15 - 25 °C quando não houver contaminação 
química ou microbiana. Anotar a data de expiração. 
Opcionalmente pode-se preparar um volume menor da mistura (Reagente 1 + Reagente 3) adicionando-
se 1 parte do Reagente 3 a 80 partes do Reagente 1 (exemplo: adicionar 0,010 mL do Reagente 3 a 
0,800 mL do Reagente 1). 
 
Procedimento do Teste 
 
1. Em um tubo rotulado Teste ou Calibrador, pipetar 0,800 mL da mistura Reagente 1 + Reagente 3. 
2. Adicionar 0,100 mL de amostra ou calibrador de enzimas, homogeneizar e incubar em banho- maria 
a 37 ± 0,2 °C por 5 minutos. Após essa incubação, pode-se esperar até 30 minutos para iniciar a 
medição cinética com a adição do reagente 2. 
3. Ajustar o zero do fotômetro em 340 nm com água destilada ou deionizada. 
4. Adicionar 0,200 mL do Reagente 2, homogeneizar e transferir imediatamente para a cubeta 
termostatizada a 37 ± 0,2 °C. Esperar 1 minuto. 
5. Registrar a absorbância inicial (A1) e disparar simultaneamente o cronômetro. Após 2 minutos 
registrar a absorbância (A2). 
 
Determinação da Atividade Enzimática sem a Utilização do Piridoxal Fosfato 
 
Preparo do Reagente de Trabalho 
Transferir o conteúdo de um frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente 1 e homogeneizar 
suavemente. O reagente de trabalho é estável 10 dias entre 2 - 8 °C e 24 horas entre 15 - 25 °C quando 
não houver contaminação química ou microbiana. Anotar a data de expiração. Opcionalmente pode-se 
preparar um volume menor do Reagente de Trabalho misturando-se 1 parte do Reagente 2 a 4 partes do 
Reagente 1 (exemplo: misturar 0,200 mL do Reagente 2 e 0,800 mL do Reagente 1). 
 
AST/GOT Liquiform – Ref. 109 
 
Procedimento do Teste 
 
1. Em um tubo rotulado Teste ou Calibrador, pipetar 1,0 mL do reagente de trabalho. 
2. Ajustar o zero do fotômetro em 340 nm com água destilada ou deionizada. 
3. Adicionar 0,100 mL de amostra ou calibrador de enzimas, homogeneizar e transferir imediatamente 
para a cubeta termostatizada a 37 ± 0,2 °C. Esperar 1 minuto. 
4. Registrar a absorbância inicial (A1) e disparar simultaneamente o cronômetro. Após 2 minutos 
registrar a absorbância (A2). 
 
Absorbância inicial (A1) igual ou menor que 0,8 é um indicativo de que a amostra tem atividade elevada 
de AST. Neste caso, diluir a amostra e repetir a medição (ver Linearidade). 
 
Cálculos 
 
ΔA/minuto (Teste ou Calibrador) = (A1 – A2) / 2 
 
 Atividade do Calibrador 
Fator = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ 
 ΔA/minuto Calibrador 
 
AST (U/L) = ΔA/minuto Teste x Fator 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear entre 3,5 a 400 U/L. Para valores maiores, diluir a amostra com NaCl 
150 mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Idade Masculino (U/L) Feminino (U/L) 
1 - 7 dias 
8 - 30 dias 
1 - 6 meses 
7 - 12 meses 
1 - 3 anos 
4 - 6 anos 
7 - 15 anos 
Adultos 
26 - 98 
16 - 67 
16 - 62 
16 - 52 
16 - 57 
10 - 47 
10 - 41 
11 - 39 
20 - 93 
20 - 69 
16 - 61 
16 - 60 
16 - 57 
10 - 47 
5 - 36 
10 - 37 
Conversão: Unidades Convencionais (U/L) x 16,7 = Unidades SI (nkat/L). 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: AST/GOT Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
BETATEST PLUS - Cassete – Ref. 14K7 
 
Princípio 
 
O Betatest Plus é um imunoensaio cromatográfico para a determinação qualitativa rápida da 
Gonadotrofina Coriônica Humana. 
O sistema consiste de uma membrana com dois anticorpos imobilizados: um anticorpo de captura anti 
hCG e um anticorpo de controle. Na execução do teste, a amostra de soro ou urina é colocada para 
reagir com um conjugado de ouro coloidal-anticorpo monoclonal anti hCG e a mistura se move 
cromatograficamente na membrana por ação capilar. Na existência de hCG na amostra, uma linha 
colorida se forma na região onde está imobilizado o anti hCG, significando um resultado positivo. Como a 
mistura continua a migrar na membrana, ocorre a formação de uma segunda linha colorida onde está 
aplicado o anticorpo de controle, confirmando que o teste se processou adequadamente. 
A formação de duas linhas horizontais coloridas indica um teste positivo, e a formação de uma só linha 
na posição de controle indica um teste negativo. 
A ausência da linha colorida na posição de controle indica que o teste não se processou adequadamente 
e que deve ser repetido. 
 
Reagentes 
 
Placas de Reação - Armazenar entre 2 - 30 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver instruções de uso. 
 
Amostra 
 
Soro. O hCG, em amostras de soro, permanece estável 48 horas entre 2 - 8 oC e 3 meses a 10 oC 
negativos. Utilizar amostras claras não hemolisadas. Amostras contendo material particulado devem ser 
centrifugadas antes do ensaio. 
Urina. Pode-se utilizar amostra colhida a qualquer hora do dia. Entretanto, é preferível usar a primeira 
amostra da manhã por conter uma concentração mais elevada de hCG.Usar recipiente limpo e seco. 
Centrifugar ou filtrar toda urina turva ou contendo hemácias. Em amostras de urina, o hCG permanece 
estável 2 dias entre 2 - 8 °C e até 6 meses a 10 °C negativos. Não utilizar amostras com sinais de 
contaminação bacteriana ou que tenham pH maior que 8,0. 
 
Metodologia 
 
Metodologia: Imunoensaio cromatográfico 
 
Procedimento 
 
Ver limitações da metodologia. 
 
Soro ou Urina 
 
As placas e as amostras devem estar entre 15 - 25 °C no momento da realização do teste. 
 
1. Remover a placa de reação do envelope protetor, identificá-la adequadamente e colocá-la em uma 
superfície horizontal. 
 
2. Adicionar 5 gotas (0,2 mL) da amostra no orifício de amostra, disparar o cronômetro, aguardar 5 
(cinco) minutos e realizar a leitura do teste. 
Um resultado positivo (aparecimento da linha na posição teste) só deve ser interpretado no máximo até 
cinco minutos após o início do teste. Entretanto, a linha controle pode tornar-se visível posteriormente, 
entre 5 e 10 minutos. 
 
3. Esperar que as linhas coloridas apareçam. Dependendo da concentração de hCG na amostra, pode-
se encontrar resultadospositivos em 1 minuto. Entretanto, resultados negativos devem ser confirmados 
somente quando se completar o tempo exato de cinco minutos. Após este tempo não deve haver 
interpretação de resultado. 
BETATEST PLUS - Cassete – Ref. 14K7 
 
Resultados 
 
Negativo: Ocorre a formação de uma linha colorida na posição controle e ausência de linha colorida na 
posição teste. 
 
Positivo: ocorre a formação de uma linha colorida na posição teste e outra linha colorida na posição 
controle. A linha na posição de teste, claramente identificável até 5 minutos do início do teste, mesmo 
quando sua intensidade for menor que a linha na posição controle, mostra que o teste deve ser 
considerado positivo, indicando uma concentração de hCG igual ou maior que 25 mUI/mL. 
Não considerar resultados positivos quando a linha na posição teste se mostrar visível 
decorridos 5 minutos do início do teste. 
 
A intensidade da cor da linha de teste é decorrente da concentração de hCG na amostra, mas o teste 
não deve ser usado para uma avaliação quantitativa ou para determinar a taxa de elevação dos níveis de 
hCG. 
Nos casos em que a linha teste se mostrar muito tênue no momento da leitura, recomenda-se que o 
teste seja repetido dentro de 1-2 dias, inclusive com amostra de urina. Recomenda-se manter as 
amostras identificadas e congeladas por um período de tempo suficiente, para que possam ser utilizadas 
como contra-prova. 
A intensidade da cor da linha de controle pode ser menor que a intensidade da cor da linha de teste, sem 
que isto signifique problema no desempenho do teste. 
 
Inválido: a ausência de formação da linha controle após 10 minutos indica um erro de procedimento ou 
deterioração do sistema. Nesse caso, adicionar 3 gotas da amostra no orifício de amostra; se não 
ocorrer a formação da linha de controle o teste deve ser considerado como inadequado. Repetir o teste 
utilizando nova placa de reação. 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Betatest Plus Cassete– Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
BETATEST PLUS - Tiras – Ref. 14T 
 
 
Princípio 
 
O Betatest Plus é um imunoensaio cromatográfico para a determinação qualitativa rápida da 
Gonadotrofina Coriônica Humana. 
O sistema consiste de uma membrana com dois anticorpos imobilizados: um anticorpo de captura anti 
hCG e um anticorpo de controle. Na execução do teste, a amostra de soro ou urina é colocada para 
reagir com um conjugado de ouro coloidal-anticorpo monoclonal anti hCG e a mistura se move 
cromatograficamente na membrana por ação capilar. Na existência de hCG na amostra, uma linha 
colorida se forma na região onde está imobilizado o anti hCG, significando um resultado positivo. Como a 
mistura continua a migrar na membrana, ocorre a formação de uma segunda linha colorida onde está 
aplicado o anticorpo de controle, confirmando que o teste se processou adequadamente. 
A formação de duas linhas horizontais coloridas indica um teste positivo, e a formação de uma só linha 
na posição de controle indica um teste negativo. 
A ausência da linha colorida na posição de controle indica que o teste não se processou adequadamente 
e que deve ser repetido. 
 
Reagentes 
 
Tiras de Reação - Armazenar entre 2 - 30 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver instruções de uso. 
 
Amostra 
 
Soro. O hCG, em amostras de soro, permanece estável 48 horas entre 2 - 8 °C e 3 meses a 10 °C 
negativos. Utilizar amostras claras não hemolisadas. Amostras contendo material particulado devem ser 
centrifugadas antes do ensaio. 
Urina. Pode-se utilizar amostra colhida a qualquer hora do dia. Entretanto, é preferível usar a primeira 
amostra da manhã por conter uma concentração mais elevada de hCG. Centrifugar ou filtrar toda urina 
turva ou contendo hemácias. Em amostras de urina, o hCG permanece estável 2 dias entre 2 - 8 °C e até 
6 meses a 10 °C negativos. Não utilizar amostras com sinais de contaminação bacteriana ou que tenham 
pH maior que 8,0. 
 
Metodologia 
 
Metodologia: Imunoensaio cromatográfico 
 
Procedimento 
 
Ver limitações da metodologia. 
 
Soro ou Urina 
As tiras e as amostras devem estar entre 15 - 25 °C no momento da realização do teste. 
 
1. Retirar somente a quantidade tiras necessária para uso imediato e tampar o frasco imediatamente. 
Identificar as tiras adequadamente. 
 
2. Adicionar 12 gotas (0,5 mL) da amostra em um tubo 12x75 e imergir a tira de reação na amostra por 
10 a 15 segundos. O nível superior da amostra não deve ultrapassar a linha de limite máximo 
marcada na tira. 
 
3. Retirar a tira do tubo, colocar em uma superfície plana, não absorvente, disparar o cronômetro, 
aguardar 5 (cinco) minutos e realizar a leitura do teste. 
Um resultado positivo (aparecimento da linha na posição teste) só deve ser interpretado no máximo até 
cinco minutos após o início do teste. Entretanto a linha controle pode tornar-se visível posteriormente, 
entre 5 e 10 minutos. 
BETATEST PLUS - Tiras – Ref. 14T 
 
Resultados 
 
Negativo: Ocorre a formação de uma linha colorida na posição controle e ausência de linha colorida na 
posição teste. 
 
Positivo: ocorre a formação de uma linha colorida na posição de teste e outra linha colorida na posição 
de controle. A linha na posição teste, claramente identificável, até 5 minutos do início do teste , mesmo 
quando sua intensidade for menor que a linha na posição controle, mostra que o teste deve ser 
considerado positivo, indicando uma concentração de hCG igual ou maior que 25 mUI/mL. 
Não considerar resultados positivos quando a linha na posição teste se mostrar visível 
decorridos 5 minutos do início do teste.. 
A intensidade da cor da linha de teste é decorrente da concentração de hCG na amostra, mas o teste 
não deve ser usado para uma avaliação quantitativa ou para determinar a taxa de elevação dos níveis de 
hCG. 
Nos casos em que a linha teste se mostrar muito tênue no momento da leitura, recomenda-se que o 
teste seja repetido dentro de 1-2 dias, inclusive com amostra de urina. Recomenda-se manter as 
amostras identificadas e congeladas por um período de tempo suficiente, para que possam ser utilizadas 
como contra-prova. 
A intensidade da cor da linha de controle pode ser menor que a intensidade da cor da linha de teste, sem 
que isto signifique problema no desempenho do teste. 
 
Inválido: a ausência de formação da linha controle após 10 minutos indica um erro de procedimento ou 
deterioração do sistema e o teste deve ser considerado como inadequado. Verificar o volume de amostra 
no tubo de ensaio. Repetir o teste usando nova tira de reação. 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Betatest Plus Tiras de Reação – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
BILI-D Liquiform – Ref. 93 
 
Princípio 
 
A amostra é solubilizada em meio ácido e a bilirrubina direta medida por formação de azobilirrubina com 
dicloroanilina diazotada. A cor formada é proporcional à concentração de bilirrubina direta na amostra. 
 
Reagentes 
 
Reagente 1 - Armazenar entre 2-8 °C. 
Reagente 2 - Armazenar entre 2-8 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver instruções de uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (Heparina, EDTA). Quando a amostra é protegida da luz, o analito é estável 4 dias 
entre 2 - 8 °C e 3 meses a 20 °C negativos. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Labtest DCA (DCA-dicloroanilina diazotada) 
 
Reação Ponto Final com Branco de amostra 
 
Procedimento 
 
Tomar 3 cubetas do fotômetro e proceder como a seguir: 
 Branco Teste Calibrador 
Reagente 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL 
Amostra 0,1 mL 
Calibrador 0,1 mL 
Água deionizada 0,1 mL 
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 °C durante 5 minutos. O nível da água no banho deve ser 
superiorao nível dos reagentes nos tubos de ensaio. Determinar somente as absorbâncias do teste e 
calibrador em 546 nm (530 a 550 nm), acertando o zero com água deionizada. 
Obtém-se a absorbância A1 
 
Reagente 2 0,25 mL 0,25 mL 0,25 mL 
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 °C durante 5 minutos. Determinar as absorbâncias do 
teste e calibrador em 546 nm (530 a 550 nm), acertando o zero com o branco. 
Obtém-se a absorbância A2 . A cor é estável por 30 minutos. 
 
Cálculos 
 
A leitura A1 do Teste e do Calibrador deve ser corrigida para o volume final da reação obtendo-se A1cor. 
Teste A1cor = Teste A1 x 0,81 
Calibrador A1cor = Calibrador A1 x 0,81 
 
Absorbância do Teste=A2-A1cor 
Absorbância do Calibrador=A2-A1cor 
 
 Absorbância do Teste 
Bilirrubina direta (mg/dL) = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x CCal 
Absorbância do Calibrador 
CCal: concentração do calibrador 
BILI-D Liquiform – Ref. 93 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear até 12 mg/dL. Para valores maiores que 12 mg/dL, diluir a amostra com 
NaCl 150 mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. 
 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Recém-nascidos 
Bilirrubina Direta até 0,4 mg/dL 
1 dia: até 5,1 mg/dL 
1 a 2 dias: até 7,2 mg/dL Bilirrubina Total 
3 a 5 dias: até 10,3 mg/dL 
 
Crianças, Adolescentes e Adultos 
Bilirrubina Direta até 0,4 mg/dL 
Bilirrubina Total até 1,2 mg/dL 
 
 
Conversão: Unidades Convencionais (mg/dL) x 17,1 = Unidades SI (µmol/L) 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Bili-D Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
BILIRRUBINA – Ref. 31 
 
Princípio 
 
A Bilirrubina é dosada por diazotização e formação de azobilirrubina vermelha com absorção máxima em 
525 nm. A Bilirrubina Direta (diglicurônide) é dosada em meio aquoso, enquanto a Total (Direta e 
Indireta) é dosada por ação de potente solubilizador de ação catalisadora. 
 
Reagentes 
 
Acelerador - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
Ácido Sulfanílico - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
Nitrito de Sódio - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (Heparina, EDTA). Quando protegido da luz, o analito é estável 4 dias entre 2 – 8 
°C e 3 meses a 20°C negativos 
Soros hemolisados podem fornecer valores falsamente diminuídos na determinação da Bilirrubina Direta. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Sims Horn; (Malloy Evelyn) 
 
Reação Ponto Final com branco de amostra 
 
Procedimento 
 
Preparo do Diazo Reagente: Adicionar 0,01 mL de Nitrito de Sódio (nº 3) a 0,3 mL do Ácido Sulfanílico 
(nº 2). Misturar e usar no dia da preparação. 
 
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: 
 Branco Direta Total 
Água destilada ou deionizada 1,0 mL 1,0 mL ---- 
Acelerador (nº 1) ---- ---- 1,0 mL 
Ácido Sulfanílico (nº 2) 0,1 mL ---- ---- 
Diazo Reagente ---- 0,1 mL 0,1 mL 
Amostra 0,05 mL 0,05 mL 0,05 mL 
Misturar e esperar 5 minutos. Determinar as absorbâncias das Bilirrubinas Direta e Total em 525 nm ou 
filtro verde (500 a 540), acertando o zero com o branco. A cor é estável por 30 minutos. 
 
Obter os valores em mg/dL para as Bilirrubinas Direta e Total utilizando o fator de calibração obtido com 
o Padrão de Bilirrubina Labtest (Cat. 32). 
 
Cálculos 
 
Absorbância do Teste 
Bilirrubina (mg/dL) = ——————————— x 10 
Absorbância do Padrão 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear até 25 mg/dL. Para valores maiores diluir a amostra com NaCl 150 
mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Recém-nascidos 
Bilirrubina Direta até 0,4 mg/dL 
1 dia: até 5,1 mg/dL 
1 a 2 dias: até 7,2 mg/dL Bilirrubina Total 
3 a 5 dias: até 10,3 mg/dL 
 
Crianças, Adolescentes e Adultos 
Bilirrubina Direta até 0,4 mg/dL 
Bilirrubina Total até 1,2 mg/dL 
BILIRRUBINA – Ref. 31 
 
 
Conversão: Unidades Convencionais (mg/dL) x 17,1 = Unidades SI (µmol/L) 
 
Observações 
 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar 
reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter resistividade ≥1 
megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos <0,1 mg/L. 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Bilirrubina – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
BILI-T Liquiform – Ref. 94 
 
Princípio 
 
A bilirrubina indireta da amostra é desligada da albumina e solubilizada por ação de um acelerador e as 
bilirrubinas direta e indireta são medidas por formação de azobilirrubina com dicloroanilina diazotada. A 
cor formada é proporcional à concentração de bilirrubina total na amostra. 
 
Reagentes 
 
Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver instruções de uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (Heparina, EDTA). Quando a amostra é protegida da luz, o analito é estável 4 dias 
entre 2 - 8 °C e 3 meses a 20 °C negativos. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Labtest DCA (DCA-dicloroanilina diazotada) 
 
Reação Ponto Final com Branco de amostra 
 
Procedimento 
 
Tomar 3 cubetas do fotômetro e proceder como a seguir: 
 Branco Teste Calibrador 
Reagente 1 0,8 mL 0,8 mL 0,8 mL 
Amostra --- 0,05 mL --- 
Calibrador --- --- 0,05 mL 
Água deionizada 0,05 mL --- --- 
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 °C durante 5 minutos. O nível da água no banho deve ser 
superior ao nível dos reagentes nos tubos de ensaio. Determinar somente as absorbâncias do teste e 
calibrador em 546 nm (530 a 550 nm), acertando o zero com água deionizada. Obtém-se a absorbância 
A1 
 
Reagente 2 0,2 mL 0,2 mL 0,2 mL 
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 °C durante 5 minutos. Determinar as absorbâncias do 
teste e calibrador em 546 nm (530 a 550 nm), acertando o zero com o branco. Obtém-se a absorbância 
A2 . A cor é estável por 30 minutos. 
 
Cálculos 
 
A leitura A1 do Teste e do Calibrador deve ser corrigida para o volume final da reação obtendo-se A1cor. 
Teste A1cor = Teste A1 x 0,81 
Calibrador A1cor = Calibrador A1 x 0,81 
 
Absorbância do Teste=A2-A1cor 
Absorbância do Calibrador=A2-A1cor 
 
 Absorbância do Teste 
Bilirrubina total (mg/dL) = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯x CCal 
 Absorbância do Calibrador 
CCal: concentração do calibrador 
BILI-T Liquiform – Ref. 94 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear até 30 mg/dL. Para valores maiores que 30 mg/dL, diluir a amostra com 
NaCl 150 mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Recém-nascidos 
Bilirrubina Direta até 0,4 mg/dL 
1 dia: até 5,1 mg/dL 
1 a 2 dias: até 7,2 mg/dL Bilirrubina Total 
3 a 5 dias: até 10,3 mg/dL 
 
Crianças, Adolescentes e Adultos 
Bilirrubina Direta até 0,4 mg/dL 
Bilirrubina Total até 1,2 mg/dL 
 
 
Conversão: Unidades Convencionais (mg/dL) x 17,1 = Unidades SI (µmol/L) 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Bili-T Liquiform – LabtestDiagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
Ca ARSENAZO Liquiform – Ref. 95 
 
Princípio 
 
O cálcio reage com o arsenazo III em meio discretamente ácido formando o complexo cálcio-arsenazo III 
de cor azul, cuja intensidade é diretamente proporcional à concentração cálcio na amostra. A 
absorbância do produto da reação deve ser medida nos comprimentos de onda 600 ou 660 nm. 
 
Reagentes 
 
Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Padrão - Cálcio 10 mg/dL - Armazenar entre 2 - 30 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (heparina) e urina. Devido ao aumento da permeabilidade das hemácias ao cálcio, 
deve-se separar o soro ou plasma até uma hora após a colheita. O analito é estável até 2 semanas entre 
2 - 8 °C e 4 semanas a 10 °C negativos. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Arsenazo III 
 
Reação Ponto Final 
 
Procedimento 
 
Este procedimento elimina a interferência causada por traços de cálcio presentes na vidraria. 
 
Dosagem na urina: Ver orientações de coleta e preservação do analito nas Instruções de Uso. 
 
Tomar 2 cubetas do fotômetro, rotular "Teste" e "Padrão" e proceder como a seguir: 
 Teste Padrão 
Reagente 1 1,0 mL 1,0 mL 
Selecionar o comprimento de onda de 600 (600 - 610) nm ou 660 (650 - 660)nm (ver Interferências). 
Tomar a cubeta "Teste" e acertar o zero do fotômetro. Em seguida, sem movimentar os controles do 
fotômetro, adicionar 0,01 mL da amostra nesta cubeta. Misturar bem e determinar a absorbância (ATeste ). 
Tomar a cubeta "Padrão" e acertar o zero do fotômetro. Em seguida, sem movimentar os controles do 
fotômetro, adicionar 0,01 mL de padrão nesta cubeta. Misturar bem e determinar a absorbância (APadrão). 
 
Cálculos 
 
 A Teste 
Cálcio (mg/dL) = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 10 
 A Padrão 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear até 17 mg/dL. Quando for obtido um valor igual ou maior que 17 mg/dL, 
diluir a amostra 1:2 ou 1:4 com NaCl 150 mmol/l (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado 
pelo fator de diluição. 
 
Cálcio ionizado (CaI): Ver Instruções de Uso. 
Ca ARSENAZO Liquiform – Ref. 95 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Soro 
C rianças e Adolescentes Cálcio (mg/dL) 
Cordão Umbilical 8,2 a 11,2 
Prematuros 6,2 a 11,0 
0 a 10 dias 7,6 a 10,4 
Lactentes 9,0 a 11,0 
2 a 12 anos 8,8 a 10,8 
Adultos: 8,8 a 11,0 mg/dL 
 
Cálcio Iônico (mg/dL) 
 
1 a 18 anos 4,80 a 5,52 
Adultos 4,60 a 5,40 
 
U rina 
 
Pediátricos 
5 a 40 mg/24 horas 
(dieta isenta de cálcio) 
 
 
Adultos 
Até 200 mg/24 horas 
(dieta isenta de cálcio) 
 
 Amostra de Urina: 
< 0,16 mg/100mL FG 
 
Conversão: Unidades Convencionais (mg/dL) x 0,25 = Unidades SI (mmol/L) 
 
Observações 
 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar 
reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter resistividade ≥1 
megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos <0,1 mg/L. 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Ca Arsenazo Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
CÁLCIO Liquiform – Ref. 90 
 
Princípio 
 
O cálcio reage com a púrpura de ftaleína em meio alcalino formando um complexo de cor violeta que é 
medido em 570 nm. 
 
Reagentes 
 
Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Padrão - Cálcio 10 mg/dL - Armazenar entre 2 - 30 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (heparina) e urina. Devido ao aumento da permeabilidade das hemácias ao cálcio, 
deve-se separar o soro ou plasma até uma hora após a colheita. O analito é estável até 2 semanas entre 
2 - 8 °C e 4 semanas a 10 °C negativos. 
 
Preparo do Reagente de Trabalho 
 
Misturar 3 volumes do Reagente 1 com 1 (um) volume do Reagente 2 de acordo com o número de 
testes. Estável 8 horas entre 15 - 25 °C. O Reagente de Trabalho apresenta coloração violeta com 
absorbância em torno de 0,500. 
Este fato não compromete o desempenho do reagente. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: CPC; (o-cresolftaleína) 
 
Reação Ponto Final 
 
Procedimento 
 
Este procedimento elimina a interferência causada por traços de cálcio presentes na vidraria. 
 
Dosagem na urina: Ver orientações de coleta e preservação do analito nas Instruções de Uso. 
 
Tomar 2 cubetas do fotômetro, rotular "Teste" e "Padrão" e proceder como a seguir. 
 Teste Padrão 
Reagente de Trabalho 1,0 mL 1,0 mL 
Colocar o fotômetro em 570 nm ou filtro verde laranja (550 a 590). 
 
Tomar a cubeta "Teste" e acertar o zero do instrumento. Em seguida, sem movimentar os controles do 
instrumento, adicionar 0,02 mL da amostra nesta cubeta. Misturar bem e determinar a absorbância 
(ATeste). 
 
Tomar a cubeta "Padrão" e acertar o zero do instrumento. Em seguida, sem movimentar os controles do 
instrumento, adicionar 0,02 mL de padrão nesta cubeta. Misturar bem e determinar a absorbância 
(Apadrão). 
 
Cálculos 
 
 A Teste 
Cálcio (mg/dL) = ⎯⎯⎯⎯⎯ x 10 
 A Padrão 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear até 16 mg/dL. Quando for obtido um valor igual ou maior que 16 mg/dL, 
diluir a amostra 1:2 ou 1:4 com NaCl 150 mmol/l (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado 
pelo fator de diluição. 
CÁLCIO Liquiform – Ref. 90 
 
 
Cálcio ionizado (CaI): Ver Instruções de Uso. 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Soro 
C rianças e Adolescentes Cálcio (mg/dL) 
Cordão Umbilical 8,2 a 11,2 
Prematuros 6,2 a 11,0 
0 a 10 dias 7,6 a 10,4 
Lactentes 9,0 a 11,0 
2 a 12 anos 8,8 a 10,8 
Adultos: 8,8 a 11,0 mg/dL 
 
Cálcio Iônico (mg/dL) 
 
1 a 18 anos 4,80 a 5,52 
Adultos 4,60 a 5,40 
 
Urina 
 
 
Pediátricos 
5 a 40 mg/24 horas 
(dieta isenta de cálcio) 
 
 
Adultos 
Até 200 mg/24 horas 
(dieta isenta de cálcio) 
 
 Amostra de Urina: 
< 0,16 mg/100mL FG 
 
Conversão: Unidades Convencionais (mg/dL) x 0,25 = Unidades SI (mmol/L) 
 
Observações 
 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar 
reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter resistividade ≥1 
megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos <0,1 mg/L. 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Cálcio Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
CÁLCIO TITULOMÉTRICO – Ref. 33 
Princípio 
 
O cálcio é determinado por titulação com EDTA usando como indicador o ácido calcon carboxílico. 
 
Reagentes 
 
Tampão - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
Indicador - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
EDTA - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
Padrão - Cálcio 10 mg/dL - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro ou plasma (heparina) e urina. 
Devido ao aumento da permeabilização das hemácias ao cálcio, separar o soro ou plasma até 1 hora 
após a colheita. O analito é estável 2 semanas entre 2 – 8 °C e 4 semanas a 10 °C negativos. 
Plasmas citratados, oxalatados, fluoretados ou com EDTA fornecem resultados falsamente diminuídos. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Ferro e Ham modificado 
 
Reação TitulaçãoProcedimento 
 
O material usado no procedimento deve estar livre da contaminação com cálcio para evitar a obtenção 
de resultados incorretos. 
 
Soro ou plasma 
Em um tubo 15 x 125 adicionar 2,0 mL de Tampão (nº 1) e 2 gotas do Indicador (nº 2). Misturar e 
observar com atenção a cor formada (azul) que será o ponto de viragem. A presença de tonalidade 
arroxeada ou avermelhada indica contaminação do material ou dos reagentes com cálcio. 
 
Adicionar 0,5 mL de soro. 
 
Titular imediatamente usando pipeta ou bureta graduada ao centésimo, adicionando a solução de EDTA 
(nº 3), gota a gota, agitando o tubo de ensaio fortemente, até o aparecimento da cor azul (ponto de 
viragem). 
 
A adição de excesso de EDTA não modifica a tonalidade da cor azul. 
 
Urina 
Homogeneizar bem todo o volume de 24 horas e acertar, se necessário, o pH em 1,0 com HCl 50%. 
Separar 5,0 mL e aquecer a 56°C durante 15 minutos. Misturar bem. 
 
Em um tubo 15 x 125 adicionar 2,0 mL do Tampão (nº 1), 0,5 mL de urina e 0,2 mL de citrato de sódio 
1,52 % (p/v). Misturar. Adicionar 1 gota do Indicador (nº 2) e imediatamente titular com EDTA (nº 3), 
usando pipeta ou bureta graduada ao centésimo. 
 
Desempenho do Sistema 
 
Para a familiarização com o ponto de viragem recomenda-se titular 0,5 mL do padrão utilizando o 
procedimento proposto para o soro. 
 
Cálculos 
 
mg/dL = mL gastos de EDTA x 10 
CÁLCIO TITULOMÉTRICO – Ref. 33 
 
Intervalo de Referência 
 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Soro 
Crianças e Adolescentes Cálcio (mg/dL) 
 
Cordão Umbilical 8,2 a 11,2 
Prematuros 6,2 a 11,0 
0 a 10 dias 7,6 a 10,4 
Lactentes 9,0 a 11,0 
2 a 12 anos 8,8 a 10,8 
Adultos: 8,8 a 11,0 mg/dL 
 
Urina 
 
 
Pediátricos 
5 a 40 mg/24 horas 
(dieta isenta de cálcio) 
 
 
Adultos 
Até 200 mg/24 horas 
(dieta isenta de cálcio) 
 
 Amostra de Urina: 
< 0,16 mg/100mL FG 
 
Conversão: Unidades Convencionais (mg/dL) x 0,25 = Unidades SI (mmol/L) 
 
Observações 
 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar 
reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter resistividade ≥1 
megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos <0,1 mg/L. 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Cálcio Titulométrico – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
CALIBRA H – Ref. 80 
 
Finalidade 
 
Calibra H é um multicalibrador liofilizado, em matriz protéica humana, para calibração de ensaios de 
química clínica em analisadores automáticos e métodos manuais. 
Somente para uso diagnóstico in vitro. 
 
Precauções e cuidados especiais: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Preparação 
 
Golpear o frasco levemente com os dedos para desprender o material liofilizado. Remover as tampas 
de plástico e borracha. 
Utilizando uma pipeta volumétrica calibrada, adicionar ao frasco exatamente 3,0 mL de água tipo II, à 
temperatura de 22 - 28 °C. 
Recolocar a tampa de borracha, golpear o frasco suavemente com os dedos, deixar em repouso 
durante 10 minutos e homogeneizar suavemente por rotação para misturar o conteúdo. 
Intermitentemente, durante os próximos 10 minutos, inverter o frasco suavemente até a dissolução 
completa do material. 
Antes de utilizar, homogeneizar suavemente, abrir o frasco e retirar a quantidade necessária para 
uso. Tampar imediatamente e armazenar protegido da luz entre 2 - 8 °C. 
 
Estabilidade 
 
O produto não aberto, quando armazenado nas condições indicadas, é estável até a data de 
expiração impressa no rótulo. Durante o manuseio, o produto está sujeito a contaminações de 
natureza química e microbiana que podem provocar redução da estabilidade. 
Após reconstituição, os constituintes do Calibra H, com exceção da bilirrubina e da fosfatase alcalina, 
são estáveis durante 7 dias entre 2 – 8 °C em frasco bem vedado protegido da luz. A bilirrubina e a 
fosfatase alcalina são estáveis por 2 dias entre 2 – 8 °C em frasco bem vedado. 
Alguns constituintes do Calibra H (bilirrubina e creatina quinase) são fotossensíveis, portanto sua 
exposição à luz deve ser evitada. 
Todos os constituintes, com exceção da bilirrubina e da fosfatase alcalina são estáveis por 15 dias 
quando armazenados a 20° C negativos, em recipiente hermeticamente fechado e protegido da luz. 
Para evitar congelamentos e descongelamentos repetidos, sugerimos separar o calibrador em 
alíquotas de 0,5 a 1,0 mL antes de congelar. Para evitar evaporação do material durante o período de 
armazenamento sugerimos utilizar frascos adequados para congelamento (“criotubos”). A 
temperatura do congelador de geladeira comum (duplex) é de aproximadamente 8 ºC negativos. 
 
Instruções Gerais de Uso 
 
O Calibra H reconstituído está pronto para uso e deve ser processado exatamente como proposto nas 
instruções das aplicações manuais e automáticas. 
O calibrador quando armazenado refrigerado e principalmente congelado, deve ser devidamente 
homogeneizado antes de usar. Não agitar fortemente ou usar vórtex. 
Manter o calibrador o mínimo de tempo possível aberto, fora da temperatura de armazenamento ou 
exposto a luz. 
 
Valores Assinalados 
 
As concentrações são determinadas após tratamento estatístico dos resultados, encontrados em 
procedimentos aplicando reagentes da Labtest, e se referem somente ao lote específico do Calibra H. 
Estes valores constam na tabela contida nas instruções de uso do produto Calibra H. 
 
Observações 
 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar 
reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter resistividade ≥1 
megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos <0,1 mg/L. 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Calibra H – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
CAPACIDADE DE LIGAÇÃO DE FERRO – Ref. 41 
 
Finalidade 
 
Um padrão de ferro com concentração conhecida (500 μg/dL) é incubado com a amostra de soro em um 
tampão de pH 8,3. Ocorre, então, a saturação dos sítios disponíveis para ferro na proteína 
transportadora (transferrina). 
O excesso de ferro não ligado é então medido através da formação de um complexo magenta brilhante 
após adição de Ferrozine® , permitindo a determinação da capacidade de ligação de ferro. 
 
Reagentes 
 
Tampão - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
Padrão 500 μg/dL - Armazenar entre 15 - 25 °C. 
Ferrozine® – Armazenar entre 15 - 25 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
 
Usar soro (sem hemólise) obtido em jejum. O analito é estável 4 dias entre 15 - 25 °C e 6 dias entre 2 - 8 
°C. 
 
Metodologia e Reação 
 
Metodologia: Goodwin modificado (Ferrozine) 
 
Reação Ponto Final com Branco de amostra 
 
Procedimento 
 
O material usado no procedimento deve estar livre da contaminação com ferro para evitar a obtenção de 
resultados incorretos de CLLF. 
 
A água deionizada deve ter uma resistividade ≥1 megaohm ou uma condutividade ≤1 microsiemens e 
concentração de silicatos < 0,1 mg/L (água tipoII) 
 
Tomar 3 cubetas do fotômetro, lavadas como acima e proceder como a seguir: 
 Branco Teste Padrão 
Tampão (nº 1) 1,5 mL 1,5 mL ---- 
Padrão (nº 2) ---- 0,5 mL 0,5 mL 
Água destilada ou deionizada 1,0 mL ---- 2,0 mL 
Soro (sem hemólise) ---- 0,5 mL ---- 
Misturar e incubar em banho-maria a 37 °C durante 10 minutos. O nível da água no banho deve ser 
superior ao nível dos reagentes nos tubos de ensaio. Determinar a absorbância do teste em 560 nm ou 
filtro verde (540 a 580), acertando o zerocom o branco. A absorbância do teste será A1. 
 
Ferrozine® (nº 3) 1 gota 1 gota 1 gota 
Misturar e incubar em banho-maria a 37 °C durante 10 minutos. Determinar as absorbâncias do teste e 
padrão em 560 nm ou filtro verde (540 a 580), acertando o zero com o branco. A absorbância do teste 
será A2. 
 
Cálculos 
 ( A2 - A1) 
CLLF (μg/dL) = 500 - ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯x 500 
Absorbância do Padrão 
 
CTLF (μg/dL) = Ferro sérico + CLLF 
 
IST (%) = (Ferro sérico/ CTLF) x 100 
 
Transferrina (μg/dL) = CTLF x 0,70 
CAPACIDADE DE LIGAÇÃO DE FERRO – Ref. 41 
 
Linearidade 
 
O resultado da medição é linear até 450 μg/dL. Para valores de capacidade latente maiores que 450 
μg/dL, diluir o soro 1:3 com água destilada ou deionizada e repetir a determinação. Multiplicar o resultado 
obtido por 3. 
 
Intervalo de Referência 
 
Estes valores devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça sua própria faixa de valores de referência na população atendida. 
 
Capacidade de Ligação de Ferro (µg/dL) 
CTLF: Crianças: 150 a 400 μg/dL 
Adultos: 250 a 450 μg/dL 
 
IST: 20 a 50% 
 
Transferrina: 200 a 300 mg/dL 
 
Conversão : Unidades Convencionais (µg/dL) x 0,179= Unidades SI (µmol/L) 
 
Observações 
 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar 
reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter resistividade ≥1 
megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos <0,1 mg/L. 
 
Referência 
 
Instruções de Uso: Capacidade de Ligação de Ferro – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
CK-NAC Liquiform – Ref. 117 
 
Princípio 
A CK catalisa a desfosforilação da creatina fosfato para produzir adenosina trifosfato (ATP), a 
qual reage com a glicose na presença da hexoquinase (HK) formando glicose-6-fosfato. A 
glicose-6-fosfato, na presença de glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PDH), é oxidada a 6-
fosfogluconato (6-PG) e reduz o NAD a NADH. A velocidade de incremento na absorbância em 
340 nm é proporcional à atividade da CK na amostra. 
 
Reagentes 
1. Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
2. Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
3. Calibrador - Armazenar entre 2 - 8 °C. Ver, no rótulo do frasco, o valor assinalado da 
atividade enzimática. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
Usar soro ou plasma colhido com EDTA ou heparina. A atividade enzimática é estável 24 horas 
entre 15 - 25 °C e 7 dias entre 2 - 8 °C. A amostra deve ser protegida da ação da luz. Não usar 
amostras fortemente hemolisadas. 
 
Preparo do Reagente de Trabalho 
O conjunto de um frasco de Reagente 1 e um frasco de Reagente 2 permite preparar o Reagente 
de Trabalho. Transferir o conteúdo de um frasco de Reagente 2 para um frasco de Reagente 1 e 
homogeneizar suavemente. Anotar a data de expiração. Estável 1 dia entre 15 - 25 °C e 14 dias 
entre 2 - 8 °C. Identificar o frasco do Reagente de Trabalho. 
Opcionalmente pode-se preparar menor volume do Reagente de Trabalho utilizando a proporção 
4 volumes do Reagente 1 para 1 (um) volume do Reagente 2. 
 
Reconstituição do Calibrador 
Remover o selo de alumínio e retirar cuidadosamente a tampa de borracha. Utilizando uma 
pipeta volumétrica calibrada, adicionar ao frasco do calibrador 1,0 mL de água tipo II. 
Recolocar a tampa de borracha, deixar em repouso durante 10 minutos e homogeneizar 
suavemente por inversão. 
Após a reconstituição, o calibrador é estável 30 dias se armazenado entre 2 – 8 ºC, bem vedado e 
protegido da luz. 
 
Procedimento 
Condições de reação: comprimento de onda 340 ou 365 nm; cubeta termostatizada a 37±0,2 °C. 
1. Em tubos rotulados “Teste” e “Calibrador”, pipetar 1,0 mL do Reagente de Trabalho. 
2. Adicionar 0,02 mL de Amostra ou Calibrador, homogeneizar e transferir imediatamente para 
a cubeta termostatizada a 37 °C. Esperar 2 minutos. 
3. Fazer a leitura da absorbância inicial (A1) disparando simultaneamente o cronômetro. Repetir 
a leitura após 2 minutos (A2). 
 
Cálculos 
 
ΔA/minuto Teste = (A2 - A1) / 2 
ΔA/minuto Calibrador = (A2 - A1) / 2 
 
 ΔA/min Teste 
Atividade da CK (U/L) = —————————⎯ x CCal 
 ΔA/min Calibrador 
 
CCal: concentração do calibrador 
 
Linearidade 
O resultado da medição é linear até 2000 U/L. Para valores maiores diluir a amostra com NaCl 
150 mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de 
diluição. 
 
Controle Interno da Qualidade 
O laboratório deve manter um programa de controle interno da qualidade que defina claramente 
os regulamentos aplicáveis, objetivos, procedimentos, critérios para especificações da qualidade 
e limites de tolerância, ações corretivas e registro das atividades. Materiais de controle devem ser 
utilizados para avaliar a imprecisão e desvios da calibração. Sugere-se que as especificações para 
o coeficiente de variação e o erro total sejam baseadas nos componentes da variação biológica 
(VB). 
 
Intervalo de Referência 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Mulheres: 26 - 155 U/L 
Homens: 26 - 189 U/L 
 
Observações 
O laboratório clínico tem como objetivo fornecer resultados exatos e precisos. A utilização de 
água de qualidade inadequada é uma causa potencial de erros analíticos. 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para 
preparar reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter 
resistividade ≥1 megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos 
<0,1 mg/L. 
 
Referência 
Instruções de Uso: CK-NAC Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
CKMB Liquiform – Ref. 118 
 
Princípio 
A amostra é incubada com o Reagente de Trabalho da CK-MB que contém um anticorpo 
específico para a subunidade CK-M e que inibe completamente a atividade enzimática do 
monômero CK-M. A CK-B catalisa a desfosforilação da creatina fosfato para produzir adenosina 
trifosfato (ATP) que reage com a glicose na presença da hexoquinase (HK) formando glicose-6-
fosfato. A glicose-6-fosfato na presença da glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PDH) é 
oxidada a 6-fosfogluconato (6-PG) e reduz o NAD a NADH. A velocidade de incremento na 
absorbância em 340 nm é proporcional à atividade da CK-B na amostra. 
 
Reagentes 
1. Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
2. Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
3. Calibrador - Armazenar entre 2 - 8 °C. Ver, no rótulo do frasco, o valor assinalado da 
atividade enzimática. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
Usar soro ou plasma obtido com EDTA ou heparina. A atividade enzimática é estável 8 horas 
entre 15 - 25 °C e 5 dias entre 2 - 8 °C. A amostra deve ser protegida da ação da luz. Não usar 
amostras fortemente hemolisadas. 
 
Preparo do Reagente de Trabalho 
O conjunto de um frasco de Reagente 1 e um frasco de Reagente 2 permite preparar o Reagente 
de Trabalho. Transferir o conteúdo de um frasco de Reagente 2 para um frasco de Reagente 1 e 
homogeneizar suavemente. Anotar a data de expiração. Estável 24 horas entre 15 - 25 °C e 14 
dias entre 2 - 8 °C. Identificar o frasco do Reagente de Trabalho. 
Opcionalmente, pode-se preparar menor volume do Reagente de Trabalho utilizando a proporção 
4 volumes do Reagente 1 e 1 (um) volume do Reagente 2. 
 
Reconstituição do Calibrador 
Remover o selo de alumínio e retirar cuidadosamente a tampa de borracha. Utilizando uma 
pipeta volumétrica calibrada, adicionar ao frascodo calibrador 1,0 mL de água tipo II. 
Recolocar a tampa de borracha, deixar em repouso durante 10 minutos e homogeneizar 
suavemente por inversão. 
Antes de utilizar, homogeneizar suavemente e retirar a quantidade necessária para uso. Tampar 
imediatamente e armazenar entre 2 - 8 °C. Após a reconstituição, o calibrador é estável 30 dias 
se armazenado entre 2 – 8 ºC, bem vedado e protegido da luz. 
 
Procedimento 
Condições de reação: comprimento de onda: 340 nm; cubeta termostatizada a 37±0,2 °C 
 
Deve-se medir previamente a CK total. Quando a atividade da CK total for maior que 1000 U/L, 
diluir a amostra 1:2 ou 1:3 com NaCl 150 mmol/L antes de iniciar a medição da CK-MB. 
Multiplicar o resultado obtido para a CK-MB por 2 ou 3. 
 
1. Em um tubo rotulado “Teste” ou “Calibrador”, pipetar 1,0 mL do Reagente de Trabalho. 
2. Adicionar 0,05 mL de Amostra ou Calibrador, homogeneizar e incubar a 37 °C durante 5 
minutos. Transferir para a cubeta termostatizada a 37 °C e esperar 30 segundos. 
3. Fazer a leitura da absorbância inicial (A1), disparando simultaneamente o cronômetro. Repetir 
a leitura após 5 minutos (A2). 
 
 
Cálculos 
 
ΔA Teste = A2 - A1 
ΔA Calibrador = A2 - A1 
 ΔA Teste 
Atividade da CK-MB (U/L) = ————————— x CCal 
 ΔA Calibrador 
 
CCal: concentração do calibrador 
 
Linearidade 
O resultado da medição é linear até 600 U/L. Para valores maiores diluir a amostra com NaCl 
150 mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de 
diluição. 
 
Controle Interno da Qualidade 
O laboratório deve manter um programa de controle interno da qualidade que defina claramente 
os regulamentos aplicáveis, objetivos, procedimentos, critérios para especificações da qualidade 
e limites de tolerância, ações corretivas e registro das atividades. Materiais de controle devem ser 
utilizados para avaliar a imprecisão e desvios da calibração. Sugere-se que as especificações para 
o coeficiente de variação e o erro total sejam baseadas nos componentes da variação biológica 
(VB). 
 
Intervalo de Referência 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Mulheres e Homens: 0 - 24 U/L ou até 6,0% da atividade da CK total. 
 
Observações 
O laboratório clínico tem como objetivo fornecer resultados exatos e precisos. A utilização de 
água de qualidade inadequada é uma causa potencial de erros analíticos. 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para 
preparar reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter 
resistividade ≥1 megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos 
<0,1 mg/L. 
 
Referência 
Instruções de Uso: CKMB Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
CLORETOS LIQUIFORM – Ref. 115 
 
Princípio 
Os íons cloreto presente na amostra reagem com tiocianato de mercúrio formando cloreto 
mercúrico e íons tiocianato. Os íons tiocianato quando combinados com os íons férrico formam 
tiocianato férrico, de coloração amarela com intensidade proporcional à concentração de 
cloretos. 
 
Reagentes 
1. Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 30 °C. Manusear com cautela, reagente tóxico. Não pipetar 
com a boca. 
2. Padrão - 100 mEq/L - Armazenar entre 2 - 30 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
Usar soro ou plasma (heparina), urina e líquor. 
Para evitar a passagem do cloreto para as hemácias, o plasma ou soro devem ser separados até 1 
hora após a colheita. O analito é estável durante 7 dias entre 15 – 25 °C, 4 semanas entre 2 – 8 
°C e vários meses a 10 °C negativos. 
Para dosagem no líquor ou na urina, utilizar amostras centrifugadas. 
 
Procedimento 
Soro, plasma e líquor. 
Urina: diluir a amostra 1:2 com água deionizada. Multiplicar o resultado obtido por 2. 
 
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: 
 
 Branco Teste Padrão 
Reagente 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL 
Amostra ⎯ 0,01 mL ⎯ 
Padrão ⎯ ⎯ 0,01 mL 
 
Misturar e esperar 2 minutos. Determinar as absorbâncias do teste e do padrão em 450 nm ou 
filtro verde-azul (450 a 505), acertando o zero com o branco. A cor é estável por 2 horas. 
 
Cálculos 
 
Absorbância do teste 
Cloretos (mEq/L) =  x 100 
Absorbância do padrão 
 
Intervalo Operacional 
O resultado da medição é linear até 130 mEq/L. Para valores maiores, diluir a amostra com água 
destilada ou deionizada, realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de 
diluição. 
 
Controle Interno da Qualidade 
O laboratório deve manter um programa de controle interno da qualidade que defina claramente 
os regulamentos aplicáveis, objetivos, procedimentos, critérios para especificações da qualidade 
e limites de tolerância, ações corretivas e registro das atividades. Materiais de controle devem ser 
utilizados para avaliar a imprecisão e desvios da calibração. Sugere-se que as especificações para 
o coeficiente de variação e o erro total sejam baseadas nos componentes da variação biológica 
(VB). 
 
 
Intervalo de Referência 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Soro ou plasma (todas as idades): 98 a 110 mEq/L 
Urina: 110 a 250 mEq/24 horas 
Líquor: 113 a 127 mEq/L 
 
Observações 
O laboratório clínico tem como objetivo fornecer resultados exatos e precisos. A utilização de 
água de qualidade inadequada é uma causa potencial de erros analíticos. 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para 
preparar reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter 
resistividade ≥1 megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos 
<0,1 mg/L. 
 
Referência 
Instruções de Uso: Cloretos Liquiform – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
CLORETOS – Ref. 49 
 
Princípio 
Os íons cloreto presente na amostra reagem com tiocianato de mercúrio formando cloreto 
mercúrico e íons tiocianato. Os íons tiocianato quando combinados com os íons férrico formam 
tiocianato férrico, de coloração amarela com intensidade proporcional à concentração de 
cloretos. 
 
Reagentes 
1. Reagente de Cor - Armazenar entre 15 - 30 °C. Manusear com cautela, reagente tóxico. Não 
pipetar com a boca. 
2. Ativador - Armazenar entre 15 - 30 °C. 
3. Padrão - 100 mEq/L - Armazenar entre 15- 30 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
Usar soro ou plasma (EDTA, oxalato, citrato, heparina), urina e líquor. 
Para evitar a passagem do cloreto para as hemácias, o plasma ou soro devem ser separados até 1 
hora após a colheita. O analito é estável durante 7 dias entre 15 – 25 °C e vários meses a 10 °C 
negativos. 
Para dosagem no líquor ou na urina, utilizar amostras centrifugadas. 
 
Procedimento 
Soro, plasma e líquor. 
Urina: diluir a amostra 1:2 com água deionizada. Multiplicar o resultado obtido por 2. 
 
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: 
 
 Branco Teste Padrão 
Reagente de Cor (nº 1) 3,5 mL 3,5 mL 3,5 mL 
Ativador (nº 2) 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 
Amostra ⎯ 0,01 mL ⎯ 
Padrão (nº 3) ⎯ ⎯ 0,01 mL 
 
Misturar e esperar 2 minutos. Determinar as absorbâncias do teste e do padrão em 470 nm ou 
filtro verde-azul (450 a 500), acertando o zero com o branco. A cor é estável por 2 horas. 
 
Cálculos 
 
Absorbância do teste 
Cloretos (mEq/L) =  x 100 
Absorbância do padrão 
 
Linearidade 
O resultado da medição é linear entre 70 e 130mEq/L. Para valores maiores, diluir a amostra 
com água destilada ou deionizada, realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo 
fator de diluição. 
 
Controle Interno da Qualidade 
O laboratório deve manter um programa de controle interno da qualidade que defina claramente 
os regulamentos aplicáveis, objetivos, procedimentos, critérios para especificações da qualidade 
e limites de tolerância, ações corretivas e registro das atividades. Materiais de controle devem ser 
utilizados para avaliar a imprecisão e desvios da calibração. Sugere-se que as especificações para 
o coeficiente de variação e o erro total sejam baseadas nos componentes da variação biológica 
(VB). 
 
 
Intervalo de Referência 
Os intervalos devem ser usados apenas como orientação. Recomenda-se que cada laboratório 
estabeleça, na população atendida, seus próprios intervalos de referência. 
 
Soro ou plasma (todas as idades): 97 a 106 mEq/L 
 
Observações 
O laboratório clínico tem como objetivo fornecer resultados exatos e precisos. A utilização de 
água de qualidade inadequada é uma causa potencial de erros analíticos. 
A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para 
preparar reagentes, usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, deve ter 
resistividade ≥1 megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e concentração de silicatos 
<0,1 mg/L. 
 
Referência 
Instruções de Uso: Cloretos – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
 
COLESTEROL HDL – Ref. 13 
 
Princípio 
As lipoproteínas de muita baixa densidade (VLDL) e as lipoproteínas de baixa densidade 
(LDL) são quantitativamente precipitadas e, após centrifugação, o colesterol ligado às 
lipoproteínas de alta densidade (Colesterol HDL) é determinado no sobrenadante. 
 
Reagentes 
1. Precipitante - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
2. Padrão – 20 mg/dL - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
Usar soro. O analito é estável 3 dias entre 2 - 8 °C. Obter a amostra após jejum de pelo menos 
12 horas. Não utilizar amostras fortemente hemolisadas. 
 
Procedimento 
 
Precipitação das VLDL e LDL. 
Em um tubo 12 x 75, adicionar: 
Soro 0,25 mL 
Precipitante 0,25 mL 
 
Agitar vigorosamente durante 30 segundos. A agitação sugerida é fundamental para obtenção 
de resultados consistentes. Centrifugar a 3.500 rpm por pelo menos 15 minutos para obter um 
sobrenadante límpido. 
 
Pipetar o sobrenadante límpido imediatamente após a centrifugação, tomando o cuidado para 
não ressuspender o precipitado, a fim de evitar resultados falsamente elevados. 
 
Colorimetria 
Utilizar com o Reagente 1 - Colesterol Liquiform Labtest (Cat. 76). 
 
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: 
 Branco Teste Padrão 
Sobrenadante ---- 0,1 mL ---- 
Padrão (nº 2) ---- ---- 0,1 mL 
Reagente 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL 
Misturar e incubar em banho-maria a 37 °C durante 10 minutos. O nível da água no banho 
deve ser superior ao nível do reagente nos tubos de ensaio. Determinar as absorbâncias do 
teste e padrão em 500 nm ou filtro verde (490 a 540) acertando o zero com o branco. A cor é 
estável por 60 minutos. Ver observação 3. 
 
Cálculos 
Devido a diluição 1:2 aplicada às amostras durante o procedimento de precipitação das VLDL 
e LDL, o valor do Padrão para cálculo dos resultados deve ser corrigido para 40 mg/dL. 
 
Absorbância do Teste 
Colesterol HDL (mg/dL) = ——————————— x 40 
 Absorbância do Padrão 
 
Linearidade 
O resultado da medição é linear até 200 mg/dL. Para valores maiores diluir a amostra 1:2 com 
NaCI 150 mmol/L (0,85%), realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido por 2. 
 
Controle Interno da Qualidade 
O laboratório deve manter um programa de controle interno da qualidade que defina 
claramente os regulamentos aplicáveis, objetivos, procedimentos, critérios para especificações 
da qualidade e limites de tolerância, ações corretivas e registro das atividades. Materiais de 
controle devem ser utilizados para avaliar a imprecisão e desvios da calibração. Sugere-se que 
as especificações para o coeficiente de variação e o erro total sejam baseadas nos 
componentes da variação biológica (VB). 
 
Valores Recomendáveis ou Desejados 
Os valores abaixo substituem os valores de referência e foram determinados a partir de dados 
epidemiológicos tratados estatisticamente, que relacionam os níveis do colesterol com a 
prevalência de doença coronariana isquêmica (DCI). 
Classificação ATP III de LDL, Colesterol Total e HDL (mg/dL): 
Adultos 
Colesterol Total (mg/dL) 
Desejável: < 200 
Limiar elevado: 200-239 
Elevado: 240 
 
Colesterol HDL (mg/dL) 
Baixo: < 40 
Elevado (desejável): 60 
 
Colesterol LDL (mg/dL) 
Ótimo <100 
Limiar ótimo: 100-129 
Limiar elevado: 130-159 
Elevado: 160-189 
Muito elevado: 190 
 
Crianças e Adolescentes (ver Instruções de Uso) 
 
Conversão: Unidades Convencionais (mg/dL) x 0,026 = Unidades SI (mmol/L). 
 
Referência 
Instruções de Uso: Colesterol HDL – Labtest Diagnóstica 
 
Obs.: Não deixe de consultar as instruções de uso. 
COLESTEROL Liquiform – Ref. 76 
 
Princípio 
Os ésteres de colesterol são hidrolisados pela colesterol esterase a colesterol livre e ácidos 
graxos. O colesterol livre é oxidado pela colesterol oxidase a colest-4-en-ona e peróxido de 
hidrogênio. Na presença de peroxidase e peróxido de hidrogênio, o fenol e a 4 
aminoantipirina são oxidados formando a antipirilquinonimina que tem absortividade 
máxima em 500 nm. 
 
Reagentes 
1. Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
2. Padrão – 200 mg/dL - Armazenar entre 2 - 8 °C. 
Os reagentes 1 e 2 contém azida sódica. 
 
Precauções, cuidados especiais e interferências: 
Ver Instruções de Uso. 
 
Amostra 
Usar soro. Anticoagulantes como citrato, oxalato ou EDTA produzem resultados 
falsamente diminuídos. O analito é estável por 7 dias entre 2 – 8 °C e por 6 meses a 20 °C 
negativos. Misturar bem as amostras lipêmicas antes de iniciar a dosagem. Não utilizar 
amostras fortemente hemolisadas. 
 
Procedimento 
 
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: 
 Branco Teste Padrão 
Amostra --- 0,01 mL --- 
Padrão (nº2) --- --- 0,01 ml 
Reagente 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL 
Misturar e colocar em banho-maria a 37 °C durante 10 minutos. O nível da água no banho 
deve ser superior ao nível do reagente nos tubos de ensaio. Determinar as absorbâncias do 
teste e padrão em 500 nm ou filtro verde (490-510) acertando o zero com o branco. A cor é 
estável por 60 minutos. 
 
Cálculos 
 Absorbância do teste 
Colesterol (mg/dL) = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 200 
 Absorbância do padrão 
 
Linearidade 
O resultado da medição é linear até 500 mg/dL. Para valores maiores diluir a amostra com 
NaCI 150 mmol/L (0,85%) e repetir a medição. Multiplicar o resultado obtido pelo fator de 
diluição. 
Controle Interno da Qualidade 
O laboratório deve manter um programa de controle interno da qualidade que defina 
claramente os regulamentos aplicáveis, objetivos, procedimentos, critérios para 
especificações da qualidade e limites de tolerância, ações corretivas e registro das 
atividades. Materiais de controle devem ser utilizados para avaliar a imprecisão e desvios 
da calibração. Sugere-se que as especificações para o coeficiente de variação e o erro total 
sejam baseadas nos componentes da variação biológica (VB). 
 
Valores Recomendáveis ou Desejados 
Os valores abaixo substituem os valores de referência e foram determinados a partir de 
dados epidemiológicos tratados estatisticamente, que relacionam os níveis do colesterol 
com a prevalência de doença coronariana isquêmica (DCI). 
Classificação ATP III de LDL, Colesterol Total e HDL (mg/dL): 
 
Adultos 
Colesterol Total (mg/dL) 
Desejável: < 200 
Limiar elevado: