Aula Prática 2- Bioquímica I Titulação do Aminoácido Glicina

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Bioquímica I- relatório
Prática 2- Titulação do Aminoácido Glicina
Aluna: Heloise Martins de Souza 
 Curso: Biofísica 
 
Introdução: 
 Titulação é uma técnica comum de laboratório em análise química quantitativa, usado para determinar a concentração de um reagente conhecido. O método consiste em reagir completamente um volume conhecido de uma amostra com um volume determinado de um reagente, de natureza e concentração conhecida (solução padrão). A substância de interesse em qualquer determinação recebe o nome de analito. A espécie química com concentração definida recebe o nome de titulante, que é, em geral, uma solução obtida a partir de um padrão primário, podendo ser um sal ou uma substância gerada na solução que se deseja dar o valor. A solução a ter sua concentração determinada recebe o nome de titulado.
 A titulação potenciométrica é feita a partir da adição de uma base ou de um ácido numa solução a partir da qual será medida a variação de pH, causada pela mudança da concentração de íons H+ e OH- .
 A partir dos volumes de base ou ácido adicionados e dos valores de pH obtidos, obtém-se dados suficientes para compor uma curva de titulação. Essas informações permitirão estimar os pKas a partir do gráfico, possibilitando o cálculo do ponto isoelétrico, ou seja, o pH no qual a carga líquida de todas as substâncias é zero. 
 A importância de fazer a titulação potenciométrica de aminoácidos é descobrir as diferentes formas do aminoácido de acordo com o pH da solução em que eles se encontram. Isso é relevante, pois quase todos os processos biológicos dependem do pH direta ou indiretamente, devido as diversas reações que ocorrem nesse sistemas. Uma pequena alteração na concentração de H+ produz uma grande mudança no processo. 
 Além disso, os aminoácidos possuem curvas de titulação distintas, as quais permitem determinar exatamente quais aminoácidos estão presentes em certa solução.
 No processo de titulação ácido-base, que foi o realizado, faz-se reagir um ácido com uma base, a medida que é adicionado o titulante ao titulado, o pH da solução vai variar sendo possível construir o gráfico desta variação (curva de titulação), o ponto de equivalência pode variar dependendo da concentração inicial do titulante e do titulado.
Objetivo: 
 Coletar dados que permitam construir a curva de titulação da glicina, e a partir disso estimar os valores de pKas e calcular o ponto isoelétrico, e também executar corretamente as manipulações usuais de laboratório, tais como: pipetar e medir volumes analiticamente.
Materiáis e métodos:
 Neste processo colocaremos a barra magnética no béquer de 50 mL, tranferiremos 20 mL de glicina para o béquer de 50 mL com a barra magnética, coloca-se o béquer no agitador magnético e ajusta a velocidade da barra, limpa-se a sonda de pH com água deionizada e seca-se com papel macio. Calibra-se o pHmetro e anota o pH da solução de glicina.
 Adiciona-se 1 mL de HCl (a glicina assumirá forma totalmente protonada), em seguida anota-se o pH da solução de glicina na tabela dada.
 Por fim, adiciona-se 1 mL de NaOH 0.1 M, misturando por agitação e anota-se o pH na tabela. Como dado no roteiro. 
Resultado e discussões: 
Foi determinado o pH inicial da solução de glicina a 8,1 M, posteriormente foi acrescentado a esta solução, 1,0 mL de NaOH 0,1 M e foi repetido este procedimento até ter atingir o valor do pH de 11.39 M, na solução. Resultados na tabela acima. 
E.T.: o gráfico está em anexo em folha milimetrada. 
Conculsão: 
 De acordo com Lehninger, 5ª ed., os pKas da glicina são: pKa1 igual a 2,34 e o pKa2 igual a 9,60. Os dados estimados a partir do experimento apresentaram pequenas alterações nesses valores. Isso pode ser justificado pelo fato de que quando o pH está muito próximo de 1 ou de 14, os valores medidos mostrados pelo pHmetro podem sofrer algumas alterações devido a presença de altas ou baixas concentrações de íons, segundo explicação contida no Lehninger, 5ª ed.
 Conclui-se que há uma elevada importância ao se realizar uma titulação quando se leva em conta a especificidade das curvas de aminoácidos, ou seja, a partir da obtenção de uma curva se identifica o aminoácido correspondente.
 Através da titulação dos aminoácidos é possível determinar o efeito do pH sobre sua estrutura. A titulação também é útil para determinar a reatividade das cadeias laterais dos aminoácidos.
Bibliografia: 
Dept de bioquímica, Instituto de química UFRJ, cursos práticos em bioquímica 18ª ed. 
LEHNINGER. PRINCIPIOS DA BIOQUIMICA, 5ª ED., 2009
www2.iq.usp.br/docente/.../TITULACAO_DE_AMINOACIDOS.pdf
 
Perguntas:
O grupamento amino da glicina pode ser considerado um ácido? E o grupamento carboxilico uma base?
Resposta: Sim, o grupamento glicina pode ser considerado um ácido, porque ele é um glicerol, uma base fraca, e como toda base fraca, dependendo do meio pode se comportar como um ácido. E o mesmo ocorre com acontece com o grupamento carboxilico, se o meio for muito ácido, depende do solvente.