Liquido Seminal (Sêmen) - 14 05 19

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Liquido Seminal (Sêmen)
14 de maio de 2019 – Dámiris Gripa Giacomin
As duas principais razões para analise do sêmen são avaliações de casos de infertilidade, estado pós-vasectomia, avaliação de doenças testiculares e penianas.
Em medicina legal, pode ser necessário para identificar um liquido para dizer se é seminal ou não.
 
O sêmen é composto por quatro frações:
 a) Glândulas bulbouretrais e uretrais	Comment by Dámiris: Responsável pela secreção do fluido pré-ejaculado que integra 5% do ejaculado.
 b) Testículos e epidídimos
 c) Próstata	Comment by Dámiris: Produz parte do liquido que forma o esperma.
 d) Vesículas seminais (contém ácido cítrico, flavinas, frutose e potássio)	Comment by Dámiris: Produz liquido seminal.
	Comment by Dámiris: Testículo: Produção de espermatozóide.Epidídimo: amadurecem os espermatozoides.
 
As frações diferem entre si em termos de composição. Para que o sêmen seja normal, deve haver uma mistura das frações durante a ejaculação.
Os espermatozóides são produzidos nos testículos e amadurecem no epidídimo. Sendo responsáveis por pequena parte do volume total do sêmen, enquanto a maior é fornecida pelas vesículas seminais na forma de um liquido viscoso que fornece frutose e outros nutrientes para manter os espermatozóides. Outra contribuição importante é a da próstata, que consiste num liquido leitoso que contem fosfatase ácida e enzimas proteolíticas que agem sobre o liquido proveniente das vesículas seminais, provocando a coagulação e a liquefação do sêmen.
 
  
 
Coleta do material e preparação do paciente
A amostra deve ser coletada após um período de abstinência sexual de 3 a 5 dias. O paciente deve ser instruído para evitar perda de material, principalmente o 1º jato, que contém a maior concentração de espermatozóides.
Se a abstinência sexual for superior a 5 dias, aumenta o número de formas imaturas, o número de espermatozóides mortos e volume do sêmen. Se a abstinência for inferior a 3 dias, diminui o volume do sêmen e o número de espermatozóides.
A amostra deve ser obtida por masturbação e ejaculação dentro de um recipiente de boca larga de vidro ou de plástico. Se for de plástico, deve-se analisar os possíveis efeitos tóxicos sobre os espermatozóides.
O frasco contendo a amostra deve ser identificado, contendo o nome do paciente, o período de abstinência sexual, data e hora da coleta, o nome do medicamento em uso.
Duas amostras devem ser coletadas num período de 7 dias a 90 dias. Se o resultado dessas duas análises for discrepante, analises adicionais deverão ser realizadas.
O ideal é coletar o material no laboratório, porém, se isso não for possível, a amostra deve ser enviada ao laboratório em no máximo 1 hora após a coleta.
  
 
 
Cuidados na manipulação
Toda amostra deve ser tratada como infecciosa.
Recomenda-se o uso de luvas e avental no laboratório.
Nada deve ser pipetado com a boca, utilizando-se pipetas automáticas para manipulação das amostras.
Não comer, não beber ou fumar na área do exame.
Após o trabalho, desinfetar as mesas do laboratório com hipoclorito de sódio a 1% ou álcool 70%.
O material contaminado deve ser desprezado em coletores de artigos descartáveis apropriados.
Os principais contaminantes, em potencial, do sêmen são os vírus da hepatite B, AIDS e herpes.
 
 
Tempo de duração da coagulação ou tempo de liquefação 
Após a ejaculação, o esperma transforma-se em gel (coagulação) para facilitar a dispersão dos espermatozóides e protege-los do contato com o pH vaginal ácido, isso se deve ás proteínas coagulantes presentes na secreção das vesículas seminais. Onde o tempo normal para a coagulação inicial é de 5 a 30 minutos. Em temperatura corpórea, a amostra seminal normal se liquefaz em até 60 minutos devido à ação de espermolisinas contidas na secreção prostática.
A amostra de sêmen pode apresentar alterações, como ausência de coagulação, ausência de fatores de coagulação, agenesia ou obstrução dos ductos das vesículas seminais, ausência de liquefação, ausência de fatores de liquefação, agenesia ou afecções de próstata, liquefação parcial, deficiência de fatores da liquefação.
 
 
  
Volume e Viscosidade ou Consistência
O volume normal de sêmen é de 2 a 5 mL, e para medir despeja-se a amostra em tubo cônico graduado.
 a) Hipoespermia: volume < 2,0 mL (insuficiência ou ausência de abstinência sexual, insuficiência vesicular ou baixos níveis de testosterona)
 b) Hiperespemia: volume > 5,0 mL (abstinência sexual prolongada, tumores benignos ou malignos próstato-vesicular)
 c)Aspermia: ausência de ejaculado (agenesias, alterações no controle neurológico da ejaculação)	Comment by Dámiris: Atrofia de um órgão ou tecido por parada no desenvolvimento.
A viscosidade pode ser determinada enquanto a amostra está sendo despejada no tubo, e se for normal a amostra gotejará no recipiente e não se mostrará aglutinada ou filamentosa. Na transcrição dos resultados, a viscosidade pode ser expressa segundo uma classificação que vai de 0 (aquosa) a 4 (forma de gel).
Qualquer aparência anormal do liquido, como a presença de sangue, pigmentação, grande turvação, que pode ser devida a presença de leucócitos, também deve ser registrada neste momento.
 a) Viscosidade diminuída: a amostra se desprende da pipeta em gotas.
 b)Viscosidade normal: a amostra se alongará em filetes com menos de 2 cm.
 c) Viscosidade aumentada: a amostra se alongará em filetes com mais de 2 cm de comprimento.
 
  
Aspecto e cor 
O aspecto deve ser analisado após liquefação por simples inspeção á temperatura ambiente.
 a) Amostra normal: aparência homogênea e opaca.
 b) Amostra anormal: aspecto heterogêneo por agregados proteicos de consistência firme e incolor pode ser por períodos prolongados de abstinência sexual, diminuição dos níveis de testosterona, alterações nas concentrações de espermolisinas, processos inflamatórios genitais, medicamentos.
Normalmente o sêmen é branco-opaco ou amarelo. Onde a presença de leucócitos em grande quantidade confere ao esperma uma cor amarelada, enquanto que a presença de hemácias confere uma cor avermelhada. Outras tonalidades (esverdeada) pode se dar devido ao uso de medicamentos.
 
Obs: Aspecto: opaco (contém muitos espermatozóides/ não se enxerga a pipeta), translucido (enxerga a pipeta embaçada), transparente (contém pouco ou nenhum espermatozóide/ enxerga a pipeta).
 
 
 
pH 
O pH normal é ligeiramente alcalino, de 7,0 a 8,0, e pode ser medido com o uso de uma fita medidora de pH.
Se a relação entre o liquido prostático e o seminal for anormalmente elevada, o pH poderá ser mais ácido.
 a) pH acima de 8,0: deficiência da glândula prostática.
 b) pH abaixo de 7,0: deficiência das vesículas seminais.
  
 
 
Motilidade
Trata-se de uma avaliação subjetiva, realizada por microscópio da amostra não diluída, em que se determina a porcentagem de espermatozóides que apresentam motilidade ativa.
Os espermatozóides devem ser avaliados em seus movimentos progressivos para frente, não se devendo considerar os eventuais movimentos brownianos.
Considera-se normal uma motilidade mínima de 50 a 60% com boa qualidade, em amostras dentro destas 3 horas após a liquefação.
Procedimento: Homogeneizar a amostra em temperatura ambiente, colocar 10 mL de sêmen em uma lâmina de vidro limpa e cobrir com uma lamínula. Fazer 2 lâminas, e tirar a média entre elas. Se o número de espermatozóides por campo variar, razoavelmente, isto indica que a amostra não está homogeneizada. Se o número de espermatozóides for muito pequeno, deve-se centrifugar novamente a amostra. A avaliação da motilidade deve ser realizada até 60 minutos após a coleta, observando os espermatozóides em objetiva de menor aumento, rastreando 4 a 6 campos para avaliar 100 espermatozóides, obtendo a porcentagem das categorias classificadas abaixo.
 a) Espermatozóides com motilidade rápida e progressiva (atravessa rapidamente o campo)
 b) Espermatozóides com motilidade lenta eprogressiva (atravessa o campo mais lento)
 c) Espermatozóides com motilidade não progressiva.
 d) Espermatozóides imóveis.
Valor Normal: Acima de 50% de espermatozóides em A+B
 Acima de 25% de espermatozóides em A
 
 a) Astenospermia: abaixo de 50% das categorias A+B	Comment by Dámiris: È quando a motilidade os espermatozoides está diminuída.
 b) Astenospermia extrínseca: devido a aumento da viscosidade.	Comment by Dámiris: Aumento da viscosidade do sêmen.
 c) Astenospermia intrínseca: nível baixo ou ausente de frutose.
 
 
 
Vitalidade
Baseia-se no principio de que a membrana plasmática danificada de uma célula morta permite a passagem de certos corantes, o que não ocorre nas células vivas.
Procedimento: Em um tubo de hemólise, misturar 20mL de sêmen e 1 gota de eosina, esperar 30 segundos, colocar 2 gotas de nigrosina, homogeneizar e confeccionar um esfregaço tipo sanguíneo, secar rapidamente. Fazer a leitura em imersão, contando 100 espermatozóides, os espermatozóides vivos não se coram (brancos), enquanto os mortos coram-se em rósea. O resultado é expresso em % de espermatozóides vivos.
 a) Valor normal: acima de 50% de espermatozóides vivos.
 b) Necrospermia: acima de 50% de espermatozóides mortos. Ocorre na deficiência de frutose.
  
 
 
Contagem dos espermatozóides
São contados apenas o espermatozóides maduros com cauda.
Procedimento: Fazer duas diluições em um tubo de hemólise, homogeneizar e preencher a Câmara de Newbauer, contando nos 4 quadrantes laterais da câmara.
 
1:20 - 20mL de sêmen + 0,4mL do liquido diluidor
Resultado da contagem multiplica por 50.000
 
1:200 - 20mL de sêmen + 4,0mL do liquido diluidor
Resultado da contagem multiplica por 500.000
 
Valor normal: acima de 20.000.000/ml
 
 a)Oligozoospermia: quando o número de espermatozóides é menor que 20.000.000/ml. A Oligozoospermia pode ser permanente e periódica. Podem ser causadas por infecção do trato genital, anomalias cromossômicas, alterações hormonais e pouca abstinência sexual.
 b) Azoospermia: ausência de espermatozóides no sêmen. Podem ser causadas pelas mesmas da Oligozoospermia e agenesias gonodais.
 
 
 
Contagem global de leucócitos e hemácias
A contagem de leucócitos e hemácias é realizada nos 4 quadrantes laterais da câmara de Newbauer, na ocasião da contagem de espermatozóides.
Procedimento: É o mesmo para contar leucócitos e hemácias em hematologia. Na diluição 1:20, multiplica-se o resultado por 50.
Valor normal de Leucócitos e hemácias: até 1.000/mm³
 
 
 
Morfologia dos espermatozóides maduros
Espermatozóides normal: cabeça oval (o acrossoma ocupa uma área entre 40% - 70% da região cefálica), peça intermediária e flagelos normais.
 
 
Espermatozóides anormais: com defeitos na forma e tamanho da cabeça, defeitos na peça intermediária e com defeitos na cauda.
 a) defeitos no acrossoma: acrossoma pequeno ou grande.
 b) defeitos do corpo e peça intermediária: peça intermediária larga, gôta intracitoplasmática, peça intermediária separada.
 c) defeitos estruturais: piriforme, achatado, forma de ampulheta, superfície irregular, mais de dois vacúolos, achatado no sítio de implantação da cauda, não ovalada de um lado, redonda.
 d) defeitos da cauda: inserção, espiralada, ângulo >90. 
 
 
Procedimento: Confeccionar um esfregaço fino (tipo hemograma), secar a temperatura ambiente e corar pela técnica de Leishmann ou de Papanicolaou. Observar em imersão, e contar 200 espermatozóides, sendo o resultado relatado em % de espermatozóides normais e espermatozóides anormais. 
 Valor Normal: acima de 50% de espermatozóides normais.
 Teratospermia: acima de 50% de formas anormais. Causas: alterações na temperatura escrotal devido a varicocele e hidrocele.
 
 
	QUESTIONÁRIO PARA A COLETA DE ESPERMOGRAMA
 
Data da coleta: ___/___/____ Registro: ______________
 
Nome: _____________________________________________________
Local da Coleta: ( ) Interno
 ( ) Externo
Têm filhos. Quantos? ____________
 
Quanto dias de abstinência sexual: ______________________________
Em uso de medicamentos. Qual? ________________________________
Motivo do exame: ( ) Fez vasectomia ( ) Engravidar ( ) Reversão de Vasectomia
 ( ) Varicocele ( ) Varicocele após tratamento
 ( ) Diagnóstico de Varicocele ( ) Outro: __________________________
 
Perda do Material: ( ) Não ( ) Sim, assinar termo de anuência
 
 
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Assinatura paciente
 
 
 
 
REFERÊNCIAS:
MUNDT, Lilian A.; SHANAHAN, Kristy. Exame de urina e de fluidos corporais de Graff. 2ª ed. Artmed, Porto Alegre, 2012.
PIVA, S. Espermograma, Análise e Técnicas. 6º ed. Santos, São Paulo, 1985.
STRASINGER, SK. Uroanálise e Fluidos Biológicos. Ed. Panamericana, São Paulo, 1991.