Técnicas de análises biológicas( Hemograma )

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Técnicas de análises biológicas
Hemograma 
Nomes: Ana Clara Fonseca 
              Josue Lima Barbosa 
              Natan Pinheiro Dornellas 
              Thaíza Passos da Silva 
Turma: BM-171 
Professores: Julienne Ramos
                     Luisa Hoffmann
Rio de Janeiro 
2019 
Sumário 
1.Hematócrito………………………………………………………...................... 3 
Macrométodo……………………………………………………................ 3
1.2 Micrométodo……………………………………………………................. 3-4
2. Dosagem de hemoglobina (hemoglobinometria)………………………...……… 5
3. Diluição para contagem de hemácia……………………………………………… 6
4. Diluição para contagem de leucócitos…………………………………………..... 7
5. Índices hematimétricos…………………………………….............................. 8
                
5.1 Volume corpuscular médio……………….................................................. 8 - 9
       5.2 Hemoglobina corpuscular média……………………………………........ 9
       5.3 Concentração de hemoglobina corpuscular média………........................... 9 - 10
6. Esfregaço Sanguíneo ………………………………………………........…….……… 11
Hematócrito
    É um parâmetro laboratorial que indica a porcentagem de células vermelhas, conhecidas por glóbulos vermelhos, eritrócitos e hemácias, no volume total de sangue, sendo importante identificar e diagnosticar algumas situações, como a anemia, por exemplo. 
1.1 Macrométodo
Princípio do método 
     Utiliza-se um tubo de Wintrobe para a medição da porcentagem de eritrócitos em certa quantidade de sangue.
Diagnóstico 
De acordo com o método, há 40% de eritrócitos no volume preenchido até a marca de 100 no tubo. 
1.2 Micrométodo
Princípio do método 
     Utiliza-se um tubo capilar para a medição da porcentagem de eritrócitos em certa quantidade de sangue.
Diagnóstico 
De acordo com o método, há 40% de eritrócitos em, aproximadamente, ¾ de volume de sangue no capilar. 
Valor de referência
	Paciente 
	Hematócrito 
	Recém-nascido 
	44-62
	3 meses
	32-44
	1 ano
	36-44
	10-12 anos 
	37-44
	Mulheres 
	35-47
	Mulheres ( gestantes)
	34-47
	Homens
	50-54
     Levando em consideração os valores de referência pode-se afirmar que a paciente possui níveis normais de eritrócitos de acordo com o micrométodo e o micrométodo, que tiveram resultados iguais. 
Dosagem de hemoglobina (hemoglobinometria)
Princípio do método 
	A dosagem é feita pelo método da cianometahemoglobina, que é baseado na oxidação do Ferro, pelo ferrocianeto, presente na hemoglobina, formando a Metahemoglobina que é convertida em Cianometahemoglobina após a reação com o Cianeto de Potássio, para que seja feita a análise colorimétrica.
Concentração do padrão: 13,6g/dL
Absorbância do padrão: 0,404
Concentração da amostra: 15,2g/dL
Absorbância da amostra: 0,452
Cálculo da contagem de heoglobina: 
_________________________________________________________________
Concentração amostra/ concentração padrão = absorbância amostra/ absorbância padrão
Conc. amostra/13,6 = 0,452/0,404
Concentração amostra = 15,2g/dL
_________________________________________________________________
Valores de referência para o paciente: Mulher - 12 a 16,5g/dL
 Em comparação com os valores de referência o paciente encontra-se com níveis normais de hemoglobina.
Diluição para contagem de Hemácias
Princípio do método 
 O sangue total reage com o líquido de Dancei. O citrato trissódico da solução é anticoagulante,logo, permite uma melhor visualização das células na Câmara de Neubauer pois mantém as hemácias livres umas das outras. O etanol 70% e formol 40% desidratam e preservam as células, que foram contadas em um microscópio óptico com auxílio do tipo de Lâmina mencionado.
Cálculo da Contagem de Hemácias: 
_____________________________________________________________________________
Hem = hemácias(contadas) x 200 x 10 x 5
Hem = 338 x 200 x 10 x 5
Hem = 3.380.000 /mm3 
____________________________________________________________________________   Valor de referência :3.9 a 5.4 milhões/mm3 
      Neste caso a situação do paciente se encontra abaixo do valor de referência, 
 podendo indicar anemia, tumores, fibrose pulmonar e ou alguma alteração na produção de células vermelhas pela medula óssea.
Diluição para  Contagem de Leucócitos
Princípio do método 
 
 O Líquido de Turk reage com uma amostra de sangue total.Esse líquido contém ácido acético, que lisa as hemácias e Azul de Metileno ou Violeta de Genciana, que dá cor ao núcleo dos leucócitos. Depois de preparada, a mistura é analisada pela contagem na Câmara de Neubauer
Cálculo da contagem de Leucócitos:
____________________________________________________________________________
Leu = leucócitos (contados) x 20 x 10 / 4
Leu = 126 x 20 x 10 / 4
Leu = 25.200 / 4
Leu = 6.300 /mm3 
_____________________________________________________________________________
Valor de referência: 4.000 a 11.000/mm3
 O paciente se encontra em situação normal, se estivese acima do valor de referência pode indicar leucocitose devido a infecções bacterianas,inflamação, estresse e outros. Se estiver abaixo do valor de referência pode indicar leucopenia, devido a doenças imunológicas ou tratamentos quiometratipicose/ou Radioterapias.   
5. Índices hematimétricos
Valores de referências
	Pacientes
	VGM (fl)
	HCM (pg)
	CHCM (%)
	Recém – nascido
	           –
	            –
	          –
	      3 meses
	83 –110
	 24 – 34
	27 – 34
	1 ano
	77 – 101
	23 – 31
	28 – 33
	10 – 12 anos
	77 – 95
	24 – 30
	30 – 33
	      Mulheres
	81 – 101
	 27 – 34
	31,5 – 36
	Mulheres(gestantes)
	-
	 –
	–
	Homens
	82 – 101
	27 – 34
	31,5 – 36
5.1 Volume corpuscular médio  
Princípio do método
Também conhecido como VGM, o método define o volume médio das hemácias da amostra de sangue, ele é calculado através da razão entre o hematócrito e o número de eritrócitos(em milhões).
Cálculo do volume corpuscular médio
___________________________________________________________
VGM= hematócrito x 10/ número de eritrócitos(em milhões)
Hematócrito= 40
Número de eritrócitos= 3.380.000 /mm3
VGM=40,0x10/3,3=121,21fl
______________________________________________________________________
Valores de referência para o paciente: Mulher - 81 a 101fl
 O VGM está alterado, como o valor encontrado está maior que os valores de referências pode indicar uma anemia do tipo macrocítica. Vale ressaltar, que erros como má homogeneização do sangue no hematócrito e erro na contagem das hemácias podem ter influenciado no resultado.
 
5.2 Hemoglobina corpuscular média
Princípio do método
Também conhecido como HCM, a partir desse método é possível calcular a quantidade de hemoglobina nas hemácias, através da divisão da dosagem de hemoglobinas pelo número de eritrócitos(em milhões).
Cálculo da hemoglobina corpuscular média:
_________________________________________________________ 
HCM= Hemoglobina x 10/ número de eritrócitos(em milhões)
Hemoglobina=15,2g/dL
Número de eritrócitos= 3.380.000 /mm3
HCM=15,2x10/3,3=46,06pg
______________________________________________________________________Valores de referência para o paciente: Mulher - 27 a 34pg
 O HCM desta paciente se encontra acima do valor de referência e pode indicar que a paciente possui anemia hipercrômica, novamente lembrar que erros na contagem de hemácias podem influenciar o resultado.
5.3 Concentração de hemoglobina corpuscular média
Princípio do método
 Indica a relação de hemoglobina presente em um determinado volume de sangue e o volume globular sendo expressa em porcentagem.
Cálculos da concentração de hemoglobina corpuscular média: 
____________________________________________________________
CHCM=hemoglobina x100/hematócritoHemoglobina=15,2g/dL
Hematócrito= 40
CHCM=15,2x100/40= 38%
Valores de referência para o paciente: Mulher - 31,5 a 36%
 O CHCM da paciente se encontra acima do valor de referência e pode indicar que a paciente possui anemia hipercrômica, caso o sangue no hematócrito tenha sido mal homogeneizando pode alterar o resultado. 
Esfregaço Sanguíneo
Princípio do método
 Esfregaço sanguíneo é uma técnica que permite a separação de células em meio líquido. Consiste em espalhar um fragmento de tecido ou de uma colônia sobre uma lâmina de vidro, o que provoca a dissociação de alguns elementos celulares e a sua aderência ao vidro. Forma-se assim uma fina camada de células, facilitando a observação.
 É interessante ressaltar, que as lâminas preparadas na prática com a técnica do esfregaço não foram analisadas.