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Questões sobre a extração de DNA 1) Onde o DNA está presente e como podemos isolá-lo? O DNA está presente em todos os organismos. Nos eucariotos o DNA fica localizado dentro do núcleo da célula; já nos procariotos, o DNA fica disperso no citoplasma. Para isolar o DNA se usa as técnicas de extração de DNA. 2) Por que o material precisa ser macerado para isolar o DNA? O material é macerado para que a parede celular seja rompida, esse processo também dissocia tecidos, permitindo que a solução de lise haja sobre um número maior de células. 3) Qual o papel do detergente presente na solução de lise no processo de extração do DNA? O detergente faz interação com os lipídeos, causando o rompimento na membrana plasmática e na carioteca. 4) Visto que o DNA não é solúvel em álcool, o que ocorre com suas moléculas quando colocadas neste meio? O alcool causa desidratação no DNA fazendo com que o mesmo se agrupe e se precipite na superfície do extrato. 5) Levando em consideração as condições e propriedades do material genético, justifique o uso da proteinase K e RNase no processo de extração do DNA. A proteinase K é utilizada na desnaturação das proteínas do DNA, fazendo com que ele fica de maneira descompactada; a RNase é utilizada na quebra dos RNAs visto que o mesmo não é útil no processo. 6) Quais as principais formas de avaliar (qualidade) e quantificar o DNA resultante de um processo de extração? O DNA pode ser quantificado para avaliar sua qualidade usando o gel de agarose ou poliacrilamida, aplicando-os junto as amostras de DNA; os padrões de concentração conhecido e analisado pelo espectrofotômetro também são utilizados no processo.
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