Buscar

From Genes to Genomes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes
Você viu 3, do total de 360 páginas

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes
Você viu 6, do total de 360 páginas

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes
Você viu 9, do total de 360 páginas

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Prévia do material em texto

safecover (100x150x16M jpeg)
���� ����� 	�
�������
From Genes to Genomes: Concepts and Applications of DNA Technology.
Jeremy W Dale and Malcom von Schantz
Copyright  2002 John Wiley & Sons, Ltd.
ISBNs: 0-471-49782-7 (HB); 0-471-49783-5 (PB)
���� ����� 	�
�������
�����	� 
�� ������
	���� �� ��� ����������
������ � ��	� 
�� 
�	��	� 
�� �������
���������	 
� �
���	� ��
�������	 � ���� �� ���� ����� � ���� 	�!
"
����� 
��! 
������	��!
���	 �#���$ %&'( )*�! +���
��
����
��� �'�,- ..(...
���������
��� /�,,0 '�,- ..(...
�1�
�� /��� ������ 
�� �#�	���� ���2��� ��3#�����04
��1���5�67����8��8#5
9���	 �#� :��� %
�� �� �		�4;;77787�����#����8���
�� �		�4;;77787����8���
��� ����	� �����2��8 �� �
�	 �� 	��� �#����
	��� �
� �� ������#���! �	���� �� 
 ��	���2
�
���	��! �� 	�
����		��! �� 
�� ���� �� �� 
�� ��
��! ����	�����! ����
���
�! ���	��������!
���������! ��
����� �� �	���7���! �$���	 #���� 	�� 	���� �� 	�� 
�������	! ������� 
��
%
	��	� ��	 '(<< �� #���� 	�� 	���� �� 
 ������� ���#�� �� 	�� 
�������	 �������� ������!
(� ��		���
� 
�#�	 =�
�! �����! *> �'% ( :+! 7�	��#	 	�� ���������� �� 7��	��� ��
	�� �#�������8
����� ����	 ����
���� �������
���� ����� � ����! )��8! ?�@ ����� �2��#�!
��7 A��5! �A '�'@<1��'�! *��
�����19
: 9���
� ���:! %
����
���� -!
�1?(,?( ��������! ����
��
���� ����� � ���� /�#�	�
��
0 	�! -- %
�5 =�
�! B��	��!
C#�����
�� ,�?,! �#�	�
��
���� ����� � ���� /���
0 %	� 	�! � 
�����	� ��� D��1�'!
��� E��� ���	���
�5! ����
���� �@'�
���� ����� � ���� /
�
�
0 	�! �� ������	�� =�
�!
=�$�
��! &�	
��� B(� ' '! 
�
�
������� ����	�
 �	�	�
����� �� ������	��
� �	�	
� �
	
���#� ������ ��� 	��� ���5 �� 
2
��
��� ���� 	�� "��	��� ���
��
)�"� �1,.' ,(.<� . /:
���
�50
�1,.' ,(.<- @ /%
����
�50
������	 �� '�8@;'- �	 ����� �� >��
� )�����
	��� ���2���� %2	8 	�! %����������! )���
%���	�� 
�� ��#�� �� )	
�� �� 
��	� ��������� ���
���� ���5 �� ����	�� �� 
���1���� �
��� ����������� �
�#�
�	#��� ���� �#�	
��
���
�����	��! �� 7���� 
	 ��
�	 	7� 	���� 
�� ��
�	�� ��� �
�� ��� #��� ��� �
��� ����#�	���8
��������
������� ��
� ������������ �
� ����� 
�	���	�� ���	��� 
�8' �#����� ���� �	�#�	#�� @
�8'8' ��� ��� �
�5���� @
�8'8� ��� �
�� �
��� .
�8'8- =�� �	�#�	#�� '�
�8'8, �#����� 
��� ���	����� ''
�8'8@ 
������ 
�� �#���������� '�
�8� ���� �	�#�	#�� 
�� &��
��F
	��� ',
�8�8' &������ ',
�8�8� +$��� 
�� ��	���� '@
�8- )�����
	��� ���74 ���� +$�������� '?
�8-8' ��
������	��� '?
�8-8� ��
���
	��� '(
! "�# �� �	��� � $��� ��
-8' ��
	 �� 
������G �'
-8� &2��2��7 �� 	�� %�����#��� ��
-8- ���� ���
���� �@
-8, :������F
	��� �?
-8@ %������
�� 
�
�� =�
�	��� �<
% ������������ ��� ��&������� �� '��	��� (���� !�
,8' +$	�
�	��� 
�� %#�����
	��� �� �#����� ����� -'
,8'8' "��
5��� #� ����� 
�� 	���#�� -'
,8'8� +�F��� 	��
	���	 -�
,8'8- %�����H���������� �$	�
�	��� -�
,8'8, ������� �������	
	��� --
,8'8@ ��
����	 ���	���#�
	��� -,
,8'8? ��5
���� ���
	#�
	��� -,
,8'8. 
��#�� �#�����
	��� -@
,8� ��	��	��� 
�� C#
�	�	
	��� �� �#����� ����� -?
,8- ��� +���	���������� -?
,8-8' ��
��	��
� ��� ����	���������� -.
,8-8� %���
�
	�2� ��� ����	���������� -(
 ������� ��� ������� �'( %�
@8' =��	���	��� +����#���
��� ,'
@8'8' ���������	� ,�
@8'8� �	��5� 
�� ��#�	 ���� ,@
@8'8- )������F����� ,.
@8'8, %��������� ���	���	��� ��
����	� ,<
@8� ��
	��� ,(
@8�8' &�	���F��� ���
	��� �����	���� @'
@8- ��5
���� %�����
	� @-
@8, ��#��� �����	� @,
@8@ B������
	��� �� =��	���	��� ��
����	 +��� @@
@8@8' �������� 
�� ������� @?
@8@8� ��5��� 
�� 
�
�	��� @.
@8@8- :���������� 	
����� @<
@8? &	��� �
�� �� ������� ��� B����#��� ?�
@8?8' �� ������� �� %
= ����#�	� ?�
@8?8� ��� 	���������
�� ?'
@8. �#��
�� ?-
) *������ ) 
?8' %�
���� 9��	��� ?@
?8'8' %�����	��� �� ��
���� 2��	��� ?@
?8'8� ��
������
	��� .'
?8� 9��	��� "
��� �� 	�� 
���
 "
�	������
�� .-
?8�8' 
���
 ������� .-
?8�8� �� ����
 �
�5
���� .<
?8�8- )����	��� 2��	��� .(
?8�8, =���
�����	 2��	��� <�
?8- 
������ <-
?8, B'- 9��	��� <,
?8@ +$�������� 9��	��� <?
?8? 9��	��� ��� 
������ 
�� +$�������� �� +#5
���	�� 
���� (�
?8?8' A�
�	� (�
?8?8� B
��
��
� ����� (�
?8. �#���2��	���4 A�
� 
�� "�
� (?
?8< �#��
�� (.
+ $������ ��� ��'( ,�-������ ..
.8' ������� ���
���� ((
.8'8' %
�	�
� �����	� '�'
.8'8� 
����� �� 2��	��� '�-
.8'8- 
���	�#�	��� 
�� �2
�#
	��� �� 
 ������� ����
�� '�?
�� ��������
.8� ���7��� 
�� �	����� ���
���� '�(
.8- ���� ���
���� ''�
.8-8' )���
	��� �� �=�� '''
.8-8� ���� ���	����� ''�
.8-8- "
�	���
� ���� ''?
.8, =
����! ���
��� 
�� &������ ���
���� ''?
/ 0������ ��� 1���� �	��� ���
<8' ��������� ���
���� 7�	� ���� %����� '�'
<8'8' :������F
	��� '�'
<8'8� 
������� ������ '�@
<8'8- �	��� �� 
 �������F
	��� �$�������	 '�?
<8'8, ��������� ������#�� '�.
<8'8@ %���� �����	��� '�(
<8� ��������� +$�������� ���
���� 7�	� ��	������� '-�
<8- =���������� '-@
<8, �#�������� '-?
<8@ 
�
�
�	���F
	��� �� %�
���� 
����� '-.
<8@8' =��	���	��� �����	� 
�� 
�
���� ��� ����	���������� '-<
<8@8� ��#	���� ���	� '-(
<8@8- %
= 
�� ��3#���� 
�
����� ',�
. ��	������� ����� 1������� 2��13 �%!
(8' ��� %
= =�
�	��� ',,
(8� %
= �� %�
�	��� ',<
(8�8' &�	���F
	��� �� 	�� %
= ��
�	��� ',(
(8�8� ��
����� �� %
= ����#�	� ',(
(8- 
������ %
= %���#�	� '@'
(8, ���1�
��� %
= '@�
(8@ =�2����1	�
������	��� %
= '@-
(8? =
��� ��������
	��� �� ���� +��� /=�
+0 '@,
(8. ������
	���� �� %
= '@.
(8.8' %
= ������� �	�
	����� '@.
(8.8� ��
����� �� ��������
�	 ������ 
�� �
�� �2��	� '@(
(8.8- ��
����	�� 
�����
	���� '@(
�4 �'( ��5������� �)�
'�8' %��������� �� ��� ��3#������ '?'
'�8� �#	��
	�� ��3#������ '?@
'�8- +$	������ 	�� ��3#���� '??
'�8, ���	�#� ��3#������4 
��	�� �������� '?.
'�8@ ������ ��3#������ '?(
'�8@8' &2��2��7 '?(
'�8@8� �	�
	����� '.�
'�8@8- =���	�	�2� ������	� 
�� �
�� '.-
�������� ���
�� (��	���� �� ��5����� ���� �++
''8' ��
����� 
�� ����	
	��� '..
''8'8' &��� ��
���� ��
��� '..
''8'8� +$��;��	��� ��#��
���� '<'
''8'8- )���	����
	��� �� 	�� �#��	��� �� ����� 
�� 	���� ����#�	� '<�
''8'8, +$�������� ����
�� '<,
''8'8@ &	��� ��
	#��� �� �#����� 
��� ��3#����� '<@
''8'8? %��	��� �	�#�	#�� '<<
''8'8. %��	��� ��	��� 
�� ���
��� '(�
''8� �
	
�
�5� '(�
''8- ��3#���� 
���
������ '(@
''8-8' ��� ��3#����� '(@
''8-8� %��	��� ��3#���� ����
������ '((
''8-8- ��3#���� 
�������	�4 
 *��� ��?
�� (��	���� �� $������ *�������� �4.
'�8' �
	#�� �� ����	�� 9
��
	��� ��(
'�8'8' ������ �#����	��� ������������� �'�
'�8'8� 
���1��
�� 2
��
	���� �'�
'�8'8- 
�����2�� 
�� 2
��
��� ���
��� �'�
'�8� B�	���� ��� �	#����� 9
��
	��� �',
'�8�8' ������� ��#	���� ���	 
�
����� H ���	���	��� ��
����	
����	� ������������� /=� %�0 �',
'�8�8� %
=1�
��� ��	���� �'.
'�8�8- ������17��� ����
������ ���
�! (��	���� �� $��� 6�&������� ��+
'-8' ��
������ ��
������	��� ��.
'-8'8' ���	���� ���	� ��<
'-8'8� =�
�� ���	��	��� 
��
� ��(
'-8'8- =�2���� 	�
������	��� %
= �-'
'-8'8, �� ���
 �������F
	��� �-,
'-8'8@ %����� �$	������ 
��
� �-@
'-8� 
���
���� ��
������	���� �-?
'-8�8' ��������	�
� ��������� �-.
'-8�8� �#�	�
�	�2� �������F
	��� �-<
'-8�8- ��������	�
� �����
� �,�
'-8�8, ���
�1�
��� ��	���� �,'
'-8- B�	���� ��� �	#����� 	�� %����	�� �,,
'-8-8' =����	�� ����� �,,
'-8-8� ��
	��� 	�� �����	�� �,@
'-8-8- *���� �����	�� ����� 	� �	#�� ���#�
	��� =�� ������	� �,<
'-8-8,=��#�
	��� ������	� 
�� ���1������� ���	���� �,<
'-8-8@ =#�1�� 
��
�� �@�
'-8, ��
���
	���
� ��
����� �@-
'-8,8' ���	��� ���	� �@-
���� ��������
'-8,8� )��#����	�������	�� 
�� ���#�����	�������	�� �@,
'-8,8- �7�1���������
� ����	���������� �@@
'-8,8, %��	������ �@?
�% (��	���� �� $��� 0������� � .
',8' =��
	��� ����� 
�� �#��	���� �@(
',8� ����	�� B
�� �@(
',8�8' ��5�� 
�� #����5�� ����� �@(
',8- =��
	��� ����	�� 
�� %�����
� B
�� �?�
',8, ��5
�� ��
����� �?-
',8,8' &������ ����
���� 
�� ���������� 7
�5��� �?,
',8@ ��
������� B#	
������� �?@
',8@8' ��
������	��� �� ��
�
����� �?<
',8@8� &	��� 
�����
	���� �� 	�
�������� �.�
',8? ������� =���
�����	 
�� ���� >���51�#	� �.�
',8. 
��������	
	��� �.,
',8< �	#����� ���� �#��	��� 	���#�� %��	��� )�	��
�	���� �.,
',8<8' �7�1������ ��������� �.@
',8<8� %�
�� �����
� ����
���� �.?
� 
���&�	����� $��� 6�&������� �+.
'@8' �
�	��� �����	��� +$�������� �� 
����� ����� �<�
'@8� +$�������� �� 
����� ����� �� "
�	���
 �<,
'@8�8' ��
������	���
� �#����� �<,
'@8�8� �	
����	�4 �����	���
� �$�������� �<?
'@8�8- +$�������� �� ��	�
� ����� �<(
'@8�8, ��
���
	���
� �#����� �(�
'@8- +$�������� �� +#5
���	�� :��	 
���� �(�
'@8-8' A�
�	 �$�������� ���	��� �(-
'@8-8� +$�������� �� �����	 �����4 �
�#��2��#� ���	��� �(,
'@8-8- +$�������� �� �
��
��
� ����� �(?
'@8, ������ �
�� 
�� ����
�� �(.
'@8,8' �
���� ���	���� �(.
'@8,8� �����	��� ����
�� �(<
'@8@ �� ����
 B#	
������� �((
'@8@8' ��	�1�����	�� �#	
������� -��
'@8@8� ���	��	�� ����� -�-
'@8@8- �������� %
= -�,
'@8@8, %��	��� ����������� -�,
�) 
�����	 (&&	��������7 ������� ��� 0����� !4+
'?8' 9
������ -�.
'?8'8' �#�#��	 2
������ -�(
'?8'8� �2� 
		��#
	�� 2
������ -'�
'?8'8- �2� ��������
�	 2
������ -'�
'?8'8, ��� 2
������ -',
�������� ��
'?8� ��	��	��� 
�� )���	����
	��� �� %
	������ -'@
'?8- :#�
� ����	�� ����
��� -'?
'?8-8' )���	������ ����
�� ����� -'?
'?8-8� ����	�� ��
������ -'(
'?8-8- ���� 	���
�� -��
�+ 8���������� !� 
'.8' ��
��������� 
�� 
������ -�@
'.8� ����
� ��
��������� 
�� �	� ������
	���� -�?
'.8�8' +$�������� �� 	�
������� -�<
'.8�8� +�������� �	��1���� 	��������� --�
'.8�8- ���� 5���51�#	� ---
'.8�8, ���� 5���51�� 	��������� --,
'.8�8@ ������
	���� �� 	�
������� 
���
�� --,
'.8- ��
������� %�
�	� 
�� 	���� ������
	���� --@
'.8-8' ���� �#�	�
�	��� --.
'.8, �#��
�� --<
��-	�����&�� !!.
$	������ !%�
����� ! !
� ��������
�������
&2�� 	�� �
�	 -� ��
��! 
 ��2��#	��� �
� 	
5�� ��
�� 	�
	 �
� �#	 �����#�
�
������� 
	 	�� ��
�	 �� 
�� 	�� ��������
� ��������! 
�� �
� �
� �$	����2�
������
	���� �� �
�� ������! ����#���� 	�� ����	��
� 
���
8 � �
I�� ����	#�
������ 	��� ��2��#	��� 7
� 	�� ��2�������	 �� 	�����3#�� 	�
	 
���7�� 	��
����
	��� �� �������� ��� ��
����	� 
�� 	���� ������
	��� �� �
�	���
� �����
/���� ��
����08 ����� 	�����3#�� 
��� ����#��� 	�� 
����	� 	� �������� �
�	���
/
�� �#���3#��	�� �	��� ���
����� ����#���� ��
�	� 
�� 
���
��0 	� �
2� ��2��
������	���! 
�� 	�� ����#�	��� �� ��
��
��#	��
� ����#�	�8 ���� �
� ����
�������� 	� 
� ������� �����������! ������� �����
����
�! 
�� ������� �
��������
�
H 
�� ��
���� �����	�
��� 	�� �
�� 	����8 :�7�2��! �
�� �� 	�� 
�����
	����
�$	��� �#�	��� 	�
� 	�
	! 
�� �� ��	 ��2��2� ������� �� ����� �� ����	��
�������
	��� �� ���
�����! 
�	��#�� 	��� ��
7 �� 	�� 5��7����� ����2�� ��
	���� 7
��8 ���� ����#��� 	�����3#�� �#�� 
� �
����� ���� �	���������
� 
�� 	��
�
�	������ ����� ������
� / !"0! 7���� �
� �� 
������ �� 
 7��� 2
���	� ��
7
�� �
����� ���� 	�� 
�
����� �� ��������	�
	��� �� 	���#�� 	� �������� 
�����
1
	���� �� ��� ����������	��� 
�� 	�� ��
������ �� �#�
� ����	�� ���������8 )�
� 
		���	 	� ��2�� 	��� �
��� �� 	�����3#�� 
�� 
�����
	����! 7� �
2� #��� 	��
	��� ��# �����
�
�	 �� 	�� �#�	�	��8
��� �
�� 	�	�� �� 	�� ���5! $�
� %���� �
 %��
���! �� ����2�� ���� 	��
�������� �� 	��� ��2��#	���8 )	 ��������� 	�� ��2� ���� 	�� �
��� ���#� �� 	��
����
	��� 
�� ����	����
	��� �� �������� ����� 	� 	�� �$��	��� 
�2
���� 	�
	 �
2�
���� �
�� �������� �� 	�� ��3#������ �� ������	� �������8 ���� �
� �� 	#��
��
7��� 
 7���� ��7 �
��� �� 	����������� /�
��&���
����0 	�
	 
�� ��������
��� ������17��� 
�
����� �� ���� �	�#�	#�� 
�� �$��������! ����#���� ���1
�#	��1�
��� 
�
����� �� �#�� �
��� �
	
 ��	� /��
���
�������08
��� �#����� �� 	��� ���5 �� 	� ���2��� 
� ��	���#�	��� 	� 	�� ������	� 
��
�����
	���� �� 	��� �
�����1��2��� 
�� �
����
	��� �����8 )� 7��	��� 	��� ���5!
7� �
� �� ���� �	� #���#����� ��� #������
�#
	� �	#���	� �� 	�� ��������
� 
��
��������
� �������� /7�� 7� 
��#�� 7��� �
2� 
 �
��� ���#����� �� �����#�
�
�������08 :�7�2��! �	 7��� 
��� �� ����2
�	 ��� �
�� �	����! �
����� ����
����
��� 7��5��� 7�� 7
�	 	� #��
	� 	���� 5��7����� �� ���
	�� 
��
� 	�
����� 7�� 7�#�� ��5� 	� #�����	
�� �
	��� ���� �� 	�� �
�5���#�� 	�
�#����	 ���	��2������ 
��#	 	�� 
�����
	���� �� ���� �� 	���� 	�����3#��8
������ � ��	�
�	��	� 
�� �������
��� ���	
��
� �������	�
��
���� ���� �� ���	
 
�� �
	�
 ��� �����	��
��� �� �	����� ������ ��� ��� 
���
��� �� 	��� 
� ������ ���������� �	��
����� ��
��	�� �� ���� � ��
 ���	
 
��
���������� �������
����� �� ���
��	��� ��
 
�� �����
� 
�� ����
�� ���������
��� �� ����
�� 
�� ���� �����	
��� ���� �� 
�� ���������� �������� �� �	� 	�����
�
������ �� ��� ����� ����� ��
�� ���	
 ! 
���� ���� ����
��� ��� � ��
���
��� �������	� ������� �� �����
��� ������
� ����
��� �� ���	���� ���
����� ����
�
�� ��������� ��� ��������� �������� �"�������
� 
��
 ��	�� ������� ��
� ��
��� 
�� ����� ��������� ���� ������
��� ��� �
	�
 �� �	��� ����
��� ����
������ ���� ���� �����
� ����	�� �� ��	��� 
�	 ��	�� ���
 �
	�
 
�� ������
�	����� �� ���
 �������� ��
	����
� ����� �� 
�� #$%!�� 
������	�� ����
���������� 
��
 ������� 	� 
� �	
 &'� ��������
 ��
� �������� �������
�� ���
(��� 
��� 
���
��� ����� �� ��������
 �������
����� )�� 
�� ����
 
��� �
 ���
�������� 
� �����
� ��� �
	�
 �������� ������ *���� 
��� ������� ��	���
 
�
�	��� ������ 
�� �����
 �� �	��� ����
��� ��� ���
��	����
 ������� +�
�������� ��
� 
���� ���������	�
� 
������	�� ���� ��������� 
��
 ������� 
��
����
�����
��� �� �������� &'� ���	������ ��� ��������
 ��
��� ��
���� ����
��
���	��� ��� ��
�������� 
�� ���	���� �� 
���� ��
� �� &'�� ,��������
���� �������� ��
� �	
���
�� 
������	�� ��� 
�� ����	����
 ������� ��
����	
�� ����� ��� ��� 
� 
�� ��
������
��� �� 
�� �	�� ���	���� �� 
��
�	��� �������
���� �����	
��� ���� ��
 ��� ��
� 	�����
������ ��� ����� ���� ��� ���
�� �������
��� �� ������
��� -���
���� ��� ���������
 ������ �����	��� ����
�
���� 	�������� ��� 
�� ���������� ��������� .
 �
	�
���� ��� �����	��
����
�������� ������ �� ������� �	� 	�����
������ �� 
�� ��
 �� ����� 
�� ����	�
�
�� 
���� ����� ��
����
 
� ���� ���� 
� 
�� ������
��� �� 
�� �������� �
����� ����
��	�� ����� ����� ��� �"������ 
�� ��������� �� ��
���
 �� ���
���� 
� 
��
��	��� �� �	��� ����
�� �������� ��� 
�� ��������� 
��
 ��	�� � ���� 
� ����
	����
�������
 ������ ���� 
� � 
	��	�� +� ���
 ������ �� ��� ����
��
 ��������
�� ��	�� �� � �������� ������
� /� ��� ��
 
��
 � ������ �� ��� ������ ���� ��
�� ������ �� � ���
���	����� ���� �
 �����
��
 
� � ���
��� ��
����
��� �� 
��
 �
������ �� ��� ���� �� �	��� &'� ��	�� ��	�� �������
��� �������� ���� ���
����
���� 
�� �	����� �� 
�� ����� �� 
���� 
������	��� ��� ������ 
��� ���� ���
���
 ������� �� ��
���	�
��� 
� 
���� '����
������� �� ���� 
��
 �
 
�� 
���
From Genes to Genomes: Concepts and Applications of DNA Technology.
Jeremy W Dale and Malcom von Schantz
Copyright  2002 John Wiley & Sons, Ltd.
ISBNs: 0-471-49782-7 (HB); 0-471-49783-5 (PB)
�	 ���� �
	���� �
� 
�	 ���� ���� ���� ��������
��� �� ���
 ��� �� ����
������ ��� ����� ���������
-���
�� �����	��
��� �� 
����
������
 ������� ��
� �� ��	�
 ��� �� ���
 �����
�����
������
� �����
���
��� ���� ����
 ���� �� ��	�
� 	���� ��0
��� ������� ����
�����	� ��������� 
� ����
� � �
�
������	 ��� �
�
���
 �� ����� 
�� &'�
��
 ���
 
� �
	�
 �� (����� 
� � �
�	
�� ���� ����������
 ���
�� �����	�� ��
��� ��������� �� ���
 ������ � �
�	 ��������� ���� ��
�� 
��� ��
 � �
���� �� 
��
����
������ �
�� ��� �
��� ���
���	�� � ��
�
 �� 
�� ���
 ����
��� 
�� �������
&'� �� ������ ����	���� � ����
 ���
 ����
���� ������ �� 
�� &'�� ���
����
���� �
� ����	�
� �� ����� ����
� �� ���
 ����� 
�� �� ���
 �
��� ��
�
������ ��
���
��� �
 
�� 	�� �� 1,2 ����
������ ����� ����
����� � ��
���
����� ������ 	� 
� ����	�� ���
 ������ �� �	� &'� �� ��	�
 ��
��	
 
�� ����
�� � ���
 ���������
+� 
�� ����
 ��
�� �� �
�� �
����� ����
��� ����������
 &'� �����	��� ����
���
�� ��
� �"
���� ��	
���� �� �
�� �� � ���
���	� ����� ����� �� �
� ��������
��
��� �	� �����
��� �
�
��� ��� 
���� �� �
��� �������� ��� ����� ����
�	����� �	�
� �����
 �� �	� ����������
� ��� ���
���� �� �	� ���� ��� �� �	�
�������� *� 
���� ��� � ��
 �� ������� 
��
 
�� ��
���	�
��� �� ������� &'�
��
� �� �
�� ��	�� ������
� ���
���� ��
� �������	� ������
���� )��
	��
��
�
��� �� ��� ���� 
��
 ��� ���� ����� 
� �� 	���	����� *��� ��
	��� �� �
��
�
����� ��
 ��
������� 3 �� ���
��	��� 
�� 4#5%67% �
���� ����� ��� ��	��
������ ������� �� ���
�� .
 ���
���
� 
�� �
����� 	��� ��� ����
�� �����	��
���
��� �������� �������� ������
��
 �
����� 
��
 ���� ��
 ���� �	����� �� 
�� �	
�
/������ ��
� ����
�����
 �������� �� �
�� ��� 
�������� �� ���� ���
 �����
���
��	�� ���� ��
� ��� ���
���	� ��� 
� ������ ���� ����� ����
 �	�����
7������� 
�� ���
 �������
 	��� 
�� �� ���
��� ��������� ��� ������ ������
��
���� ���
����8 
�� 
����������� �� �������� ��
���� ���
���� �� ������
�	�� �� 
�� ��
	��� ������ �� ��
����
�� �����
����� /��
 �� �	� ����������
�������� ���� 
������
�� 
� �
��� ���
����� �
����� 
��
 �
 �	����� �� 
����
���9 ����� 
��� ��� 
	���� �	
 ��
 
� �� � ����
 �� 
�� ��(���
 �� ������ ���
�������� 
��������� ���� ���� �����	��
�� �� 
��
 
��
 �����
 �� ������
���������� 
� �
��� ���
����� )	�
�������� ����
��� � ���� �	�� �� 
��
 ������
���� ��
� ������� ���	���� �� �� ��
������� ���������� ����
��� #!! !!! ����� ��
�	��� ������� &'� �� � ����
 �	���� 
� �� �� �
�� ����� ��� ������� �� ������
���
������� +� ���
� �� ����� 
� ���� 
��� �����
 �
� �� ���� 
� ����
� ������
���� 
��
 ���� ���� ��� ���
����� ����� �
	 ����
��� 
�� ������� ����� +� 
�	 ���� 
�
�� �� ���� 
�	 �
��
 
�	� �	�
	�� �� 
�� �������� 
�	 ��� �� �	�� 
��
 
�	�
���
���� ���� ���� ������� 
�� ������� ���� 
�� ��"
 �������� :���	
��� ��
��������;
/����
 �����
 
���
 ������� ���	
 ����
�����
 �������� �� �
��� ��� ������
�����
��� ���� ���� ��(��
��� ����
�����
 �������� ���	��� ����	��� �
 �� �
��
��� �������� 
�� ���	� �� ����
�� ����������� �� ���� �� 
�� �	���� ������� 
���
��� ���
������ 
� ������ ���������� +
 �� �����
��
 
� ���
���	��� 
�� �
�
	��
� ������������
�
������	�
� �� ����
� ��� ������� ���� ��
���� ����
� ��� �������� ��� ��
��
�����
 �������� 
�� ����	�
��� �� ����
�����
 ����
���� �������	���8 �
 ���� ��
������� ��
 ����
�� ��������
��� ���
������� ���� 
�� 
����������� ��� ��
	��� �� 
������ �	
 
��
 �� ���
��� ��
���� *�� �� ���� ������ 
�� ������� ��
������ ��������� ����� ��
��	�� �
 �� ������
	���
 ���
 ������� 
� ����	���� �
����� �� � ����
�����
 �������� �� �
��� �
 �� �����
 � ��
�� �� ������	�
��� ����
������
� ��� ������
 ����
����
 	���
����
��� ���� 
�� �����	��� ����
 �� �����
.
 ���
���
� 
�� ����
�� ��������
��� �� ������ ��������� �� ��
� ������
	���
������� 
� 
�� ����
�� ��������
��� �� ���
����� ��� ���� ���
 ���
����
 �� �
 �� �
��
��
��� ���� �� ���������� �����
 ���
 �������
��� ��������� 
�� �����
��� ���
����
��� �� � �����
�
 
�� 
��� �� ���
���� 
�� �
����� ��� ����������
�� ������	����� �� 
���
�������
��� ��� �
��� � ��
�� �� ����� ����
� ��� ����� �
��
���� ��� �
 ��	��
�� ���
 �	�������� �� 
��� �� ��
 �
��� ���
��	��� �
 
�� 
��� 
�	 ���� 
���� <	�
 ��
�� 
�� ������
��
� 
�� ����
�� ��������
��� �� �	�� �� ��
 ����������
 
�� ������
���� ����� ��	�� �� � ���� ���� ������� � ���� 
��
 ����� �
 
������
 �� ����������
�������������� �
 ��	�� ���� ���������� 
� ����
 ���� ���	
 ��������� ������ ��
���������� �� �	� ���� 
��� ���	
 
�� ����
�� ��������
��� �
����� :�	���
� 
��
����
 ���	
 �	�� �� �������� �������� ��
� 
�� ���� ��
 
	�� �	
 
� ��
�"������
��� <	�
 ��� ��
��	
 �� ����	
�����
 �����	�� 
� ���� 
�� ����
��
��������
���� �	� �� �
�� �� 
�� �"����� ����� ���� �	
 ��������
� �
 �������
�	�
� 	������
 
��
 � ����
 
��
 ���
�� ���	���� ����	���� �� ����	���� �
���
��� 
��
 ���
��
� �
 ������
 ���������� ���� �	����� ���� �� 
�� ���� �� 
��
������� �� ��������� 	���
'���
������� 
��� ���	� �� �
 �� ����� �� �������	
 �� 
��
 �� ����
�����
�������� ���
����� /� �����
 
��
 
���� ��������� �� � ���
����� ������
��
�
���
 
��� ���
�� �� � 
��� 
� ����	�� ���� ������
���� ��
 =! ���	
�� ��
�� �
�� ����� ��� ���� �� 
��
 ���	�� �� �������� �� 
���������� 
���� ��� �
���
���	�� �� ����� �	�� �� 
�� ��� �"��������� ������ ��	�� 
��� �� �� �����
��
 ���
��������
�� ���	�� ��� 
� 	�����
��� �
 �	��
 
�	 ���� 
� ���� ���	
 ����	�
���� ������
� ���� ������
�
� �	
��
���� ��� �����	��� ������
� /� ���� 
��
������� 
��� ���� ���� �� �� ���� ���� ��� 
�� ���
 �� 
����� /� ���� ���� 
��
 �
���� �����
 ���� �� 
�� ������� �"��
����
� ��� ��
�����
	�� �
��	��
��� 
��
��� ������� ������ 
� �
� ����
�
������� /��
 ��
�� ��
 
� ������� 
�� �������
�� � ���� (�	���
 
��� 
� ���	��� �� 
�� ������� ��
�����
��� �� ����
�	�
��� �
������ ��� ��������� ������
��9/�� ����� (����� ��� ��������� �	00��� ����
�	 ��� ���	�� �	
 � ������ ��
 �� (������ 
�� &'� �������
� 
���
���9 ���
��� ��� 
�	 ���� ���� 
�� �������
��� 
�	 ���� ���	
 
�� ���
 
��
 
�� ���� ��
��0
�� 
��
 
�	>�� ������ 
� 
�	� 
��
 
	�� �� ���	
 
� �����	��
� 
�� &'�
�����	��� �� �
 ��
� �	������ ���������9
������������ �
� ����� ��	
��	�� ���	�
�
�� ���� ���	
 �� 
����� ��� 
���
�� �
�� 
 ���	��� 	�������� �� ��� �
���
�������� �� �������
� �������� ���� ��
���� ������ 
� 
 �������� �� ��� 	��
������ �� �������
� ������� ��
� 
�� ������
��� �����
�� �� ���� ���	�
��� �����	� 
�	� �
���
���
����� ��� ��	 
��
���
�
�����
���� �� ������� 
���� �� ��� �
���
���� �� �
��� �� ����� ������
� 
��
������
� ����������
 ����� �� ���� 
�� ��������� �� ����� ��������
� ���������
���������
���
 ��� �� 
 ���� ��
��� ��������� ���������� ��������� ���� ���
�
����� �� ��� ���� ��������������� 
���� ��������
����� ������
 ��� �� ����
������ �
���� �� �� ������ �
� ���� ��������� ���� ���!�� �
������ 
��
��������� "�
�
��� �����
��� �� ��
�� ���� ���� ��
������ �� �������� �� ���
������ ���������� ������
��#���
� �
�	���� �� �
�� ��� ���
��
 �� ����� ���
������
�� ���	� ��� $� �������� �� ��� ���
� �� ��� %� �������� �� ��� ��&�
'(����� )�*+� ��� ����� ������� ����� ����������
 �&����
 
�� �
���� 
����
�� 
�� �������� 	��
�� ,��������� ����
�
���� �� ��� �� ����� ��!����
'�����
���+ ��
� ���
	 ����� ���
���� ������ ����� 
�� ������� ���� ��
���
�������
 ����� 
��
�	 ������
� ����� �� 
 ��� ���
��
 
�� ������������
 �����
������ 
�
� 
� ��� ����� -� �
� ��� ��� ������ ������ ����� ��!���� ��
�
��
�	 ��� �&
���� ��� ����� ���	��� ��� �
��� �� ��� ���
� ��������� ���� ��
����� ��!���� 
�� ���.��������
 
�� ��
� �� 
 �����
��!�� ����������� �� ����
�� �
� ��� ��������� �� ����������� ��
���������� '�� ����������� �������+
 �����
��� ��� ���
��� 
� �������� ���������
 ��
� ������ �� ��� ����������� ��
�����	����� ��� ���������� '/������� �����������0+
 ������� ���� ��� �������
����� �
� 1��� ��� ������.���
���� ��� ��������� ���������
2�����������
 ����� ����
�� ��� ���
� ������ '(����� )�)+
 �
���� ��
� ���
���&������� ����� �� ���
 
�� ���� ��
��� ��
� ���� ���� �� �
���� ��� ��
����� ���
��� �������������� �� 
��
�	 �� �����
��� '��	����������+
 ��� ���� 
��
��� ���� ����������� �� ������
� ����
�
����
 ������
��� �� 
�	
���� �����.
������
From Genes to Genomes: Concepts and Applications of DNA Technology
Jeremy W Dale and Malcom von Schantz
Copyright  2002 John Wiley & Sons, Ltd.
ISBNs: 0-471-49782-7 (HB); 0-471-49783-5 (PB)
OH
5' end
3' end
OCH2
O
3'
5' O
OP
base
O
O
OCH2
O
3'
5' O
OP
base
O
O
OCH2
O
3'
5' O
OP
base
O
O
�	���� ��� ��� �
�	����
2'-Deoxyribose
OCH2
OH
1'
2'3'
4'
5' OH
OH
Ribose
OCH2
OH
1'
2'3'
4'
5' OH
OHOH
�	���� ��� ������� 
��� ���
��
� ����� ���	�
��� ������
����� ��� 
��� �����
�� 
������� �� ��� ���
� ')����&�������+ 
�� ������
��
 ��� ���������
����
�� ���� ��������.����
����� �
��� '(����� )�%+3 ��� �����������
 �������
'�+ 
�� �������� ',+
 
�� ��� �������
 ��
���� '4+ 
�� 
������ '�+� '5����
�
��� �
� �� ��������
��� ���� ��������� ��� �� ��� �
���
����
 
�� ����.
����� ����� �
��� ����� �
���
����+ ����� ��� ������� 
�� ������ ��
� ���
�����������
 
 �����
� ������ ����& �� ����� 
 ������ �� ��� ���
�� �� ��
�
����� �� 
 ���������� �� ��� ������ (����������
 ��� �����
���� �� ���
������ ����& �� ����� �������� �������� ������� ������� ��� �
��� �� ��
�
���� ��� ��������
 ���� 
� � �������� 
 �
 
�� 
 4 �������� 
 , '(����� )�6+�
-� ����� �� ����� �
��� �� �
��� 
� �������������
 
�� ����� �� ��� ���
�� 
�
��� ���������� �� ��� ������ ���� ��
� ��� ��� ��� ���
��� ��� �� ��������
����������� �� 
 ����������
� ���������
���� �� 
 ������.���
���� �� �����
��� /���0 ���
�� �
� 
 $� �����&�� ����� 
� ��� ����.�
�� ��� '
�� �� �
�� ��
�� ������� �� ��� $� �� %� ���������+
 ����� ��� /������0 ���
�� �
� ��� $� ��� 
� ���
�����.�
�� ���� ����� ��� ��� ���
��� 
�� ����������
��
 ����� �� �� �����.
�
���� �� ��� ������ ���
�� ��
� �
���� �� ������� ���� ��� ����� ����
���������
 �� �
�� ��
��
 �� �� ������ �� ��������� 
 ������.���
���� ���
�� ����� �� ������� ��� �� ����� �� ���� ��� ���
��� -��� ���� ��� ���
�� ��
Thymine
CH3 O
O
O
N
N H
Sugar
Cytosine
H
N H
N
N
Sugar
Purines Pyrimidines
Adenine
H
N
N
N
N
N
Sugar
H
Guanine
H
H
N
O
N
N
N
N
Sugar
H
�	���� ��� ������� 
��� �
���
��� �
��	�� ���� ���
��
�	 �
O
O CH3
N
N
Sugar
Thymine
Adenine
H
NN
N
N
N
Sugar
H
H
NH
H
N
N
O
Sugar
Cytosine
Guanine
H
H
N
O
N
N
N
N
Sugar
H
�	���� ��� 7
��.�
����� �� ���
��� ��� ������������� ���������
��� �� ������ 
�� ����� ����������� 
� ��� �� ����� �� 1��� ��� �� ��� ��� ���
���
�� ��� $� �� %� ���������
 ��
���� ���� ���� �� ������ ���� ��� ������.���
���� ���
�� �����
������������
������������
����� �� ����� 
� �44,�4
 ���� ��� ������
���� '����
 ��� �������� �� ��� $� 
�� %�
����+ ����� ���������
�� ��� ��� �� ����� �� ��� ����� '����������
��+ ���
��
 ��� ���� ��� ����
��
��� ��� � 
�� 4 �������� �� � 
�� , '
�� ���� ����
+
 ��� ��� ���� 
��� �������
��� ������
�� �� ���� �&
����
 ��� ���������� �� �44,�4 �� ,�4,,�
 ��
���� ��� �����
���
�� ���� ����� �� ���� '
�
�� �� ��� $� �� %� ���������+�
�����
 �� ��� ��� $� �� %� ���������8 ��� �� ����� �� ��� ������ ���
�� ��
�������� ���� ��
�
 
�� ��� �
�� �� �������� ��
� ��� ������ ���
�� ���� ��
��� �������� ���������� ���� 
 ������ ���
�� �� ����� ������� 
� �44,�4 '��
���� ����� $��44,�4%�+ ����� �
�� 
� ��� ���������� ,�4,,�
'$�,�4,,�%�+ '��� 7�& )�*+�
� ����� ���	�
��� ������
��
�	� �� ���� �
��.�
����� 
��
�������
 ��� ��� ���
��� �
� �� �
����
���
�
��� # ���� �� ��� ���� 
�� �� ��� ���� ���� # ����� ���������� �����
������� ��� �������� ����� ������� ��� �
��� ��� 
�� ���� ��� ���� �� ����
�� ����
� �� ��� ���
���� ����� �� ��� �
�	����� ���� �� �������� �� 
�
����������� �� ��� 
��
 ����	� ��� ���
���
���� �� �
�� ��������
 �� ��
����������� 7��
��� �� ��� ����������
���� �� ��� �
�� �
���
 ��� ���
��� ����
�
���� 1��� �������� 
�
�� 
�� ��������� �� ��� ���� ����
 ��� �� ��
����
���
����� �� ��
����
 
�� ��� ���
���
���� ������� �� ��������� ����� ��������
�� 
� ������� ���� ���� �� �� 
����������� �� ��
�� ����� ��
� ��
� '���� ��
�
59+� ���
���
���� �� 
 ������.���
���� ��� �������� ������ ���� 
����� ������
���� �
���
 
�� ��� �������� �� ��
� �
��� �� ������� 
� ���
������� ����������� '��+� ���� �� ���������� �� ��� �
�� ����������� �� ���
���� ����� ��
����3�������� '4,+ �
�� �
��� �
�� ����� �������� �����
 ����
�� �������� '���� ���� ���� �
����+ ��
� 
������3������� '��+ �
���
 ����� �
��
���� ��� �������� ������ �� �� ��������� �������� �� �����
�� ��� �������
������
���� �� 
 ��� ��
����� �� ��� 	��� ��� �� ����� '�� ��� �
��
����������� 
�� ������+� ����� ��������
����� 
�� ������
�� �� �������
�����
��� ������ �� 	���� 
� ��	��
�������
 �� ����� ���� ���	�� 
�� ���� �� ������
�������� ������� 
��� �� ������� -� ���� ���	 
� �������!
���� �� ���� ���
�� ��
,�
���� :�
�������� ��� ����
� �
�� �
��� '�#� 
�� 4#,+ 
�� ��� ���� ����� ��
� 
��
����� ����
����� ���� ��� -
����#,���	 ������ ����&
 �
����� �� ����� �
���
�
� �����
 ������
��� �� ����
����� ����� 
 �����
� ������ ����& �� ���� ������
��
'���� 
� ��� ������� �� ������.���
���� ������� 
���� ���� ������
�� ���������� #
��� �����+�
�� 
������� �� ��� �������� �����
 ��� ������ ���
���� ��� ��������� ��
�
���
���� �� ��
�����	�� ������������ ������� ��� �
���� ��� �����������
�
���� �� ��� �
��� ��
�� ��
� 
 ������.���
���� ���������
 �� ����� ��� �
���
�� �&����� �� ��� 
 ����� �����������
 �� ����
���� "
����� �� ��� �
���
��
���� ���� �� �� ������� ���� �����
����� ���� ��� ����������� �
���� ��
�����
�� �� ��� �������� �������
 ����������� �����
������ 
�� ���
������ ���.
��������� ����
 ������� 
��� ���
��� ���� ���� �� ����	 �������� ���� �� ���
������ �� �������� �
��.�
�����
 
������� ��� �������� �����
������ �
	� ���
�����
���� ������������ ����������� �� ��� �����
����� �
� ��������� �� ��.
���
��� �� ��� ��� �� ������
�� '���� 
� ����
����+ ��
� ������ ��� ��������.
��� �����
�������
-�
� �
����� �� ����� �� ���� 
 ������ ������� 
��� ���
��; ���� �� ����
���
��� �
�� ���� 2��
 ��� ������.���
���� ����� �� ��� 
��� �&���� (��
�&
����
 �� ���� ������� ��� ������� �
����
� �� ������.���
���� ���� �
������.���
���� ������� 
��� �������� ���� ���� �� ���� �� �� ������ �� ����
���
��!�� ������.���
���� �������
 ��������� ���������� �������� �� 
� �
������
�� ����.���� ����������� ���� �
� ��� ������ �� �������� ��� �
��� ���� ���
����������� �
���� �� ���� ������
����
 �� ��� 
������ �� ���
������ 
�����
��� �
��	�� ���� ���
��
�	 �
 ������.���
���� ������� 
��� ���� ����
��� ������� �� 
 ������& ��� �� ����
���
��!�� ������
�� ��������� ��������
 ����� �� ������
��� ������� ���� 2��
��������� ���� 
� ��
����� 2�� '�2��+ 
�� �������
� 2�� '�2��+� ����
�
� 
��� �
���� �� 
 ������� �&���� ���� ������ ���
���� ���
 ����� �����
�� ������ �
� ���� �� ���� ��� �� ��� �����
� ������ ����&� ����� ���� �
	�� ��
�
���� ��� ��!���� �� ������ ��� ���
 
�� �� ���
�
�� ��� ���
���
 �����
�� ������ �
� ��
� 
 ���� �� ��� �����
���� �� ���� �&��������
 
�� �� ���
�����
���� �� ��� ������
�����
� ������� �
���� �� �� �
	�� ���� 
������ �� ��� ���
���� ��
��� �� ���
������
�� ������ �� ��� ������� 
��� �
�	����� ���� ���	� �� ��� ��������
��������� �� ��� �������� ����� 
�� ����������� �����
������8 ��� ������
���
���� ��
��� �� ��� ��� ���
��� �
���� ���������
��� ��������� ��
� �����
�� ����� ��� ��� ���
���� �� ��� �������� �� �
��
 ���� ������ �� �������
���� ��
��� �������� �� 
 ����� �� ����������� ����������� ��� ��������
 �����
��!���
��� ���
���� ��
��� �� ��� ������
�� ������� 9������
 �� ��� ������ ��� �
��
��������
����
 
�� ��
	 �����
������ ������� ��� ���
��� ���� �� ��������� ��
���������
��� ��������� # 
�� ��������� �� �
� ��� ��� �
�� ���������� ��
�����
�� ��� ����������� �� �������!
���� '��� ,�
���� :+�
����� ��	 ���������
,�����
���
 2�� �� ���� �����
� ������ ��� ����
����
� ������
� ����������
�� ��
� ��� 2�� �
�	���� ����
��� ������ �
���� ��
� ��� )�.���&������� '����
������ ������� ��� �����&�� ����� 
� ��� )� ��������+ ������� �� ��� '(�����
)�$+� 9������
 ���� ������ ���������� �
� 
 �������� ������ �� ���� ���������� ��
��� ������� 
���
 ������
��� �� ��� ��
������� ����
 2�� �� ��
���� ���������
���&������ �� ���� �9� <���� ����� ����������
 ��� �� ��
���3 
������� ���
���
��� ���� ���
�
��
 ���� ���� ���
�� ���
�� 
�� �
�
��� �� ���
���
���� ����
��� �9 �� ������� 
�
��� � ������� ���������� �������2��
����� �� ��
� ���
������ ����
��� ��
��� �
���� ��
� ������� '(����� )�$+�
4����
���
 ����� ���� �� ��� ��� �� ��� �� ������ ���
����
 ���� �� ���
2�� �� ��������� �������� �� 
 ������ �������������� ���
�� # 
������� ��
���� �������� ��� �������� 
���� ���
����� ��� ������� �� ������.���
����
������� 
����� 9������
 ���� ����������� ������� 2�� 
�� ��� �� ��� 
�
�������� �������� �� ��� ������� 
���� ����������
 ��� �� 
 ���������� �� ���
�
���
� ����� �� 2�� 
�� ��� �� ��� ����
 
�� �� ��� ������ �� �����������
�� 
�� �������� ���
����� '���� �&������� �������+
 ��� �� ��� ��������� �
����
�
����������� ��� ��� ������� ����������� �� ��� ����
 
�� ��� ������
���� �������
��
� �
� ������� �� �
��� �� 
 ������.���
���� ��������8 ��� ����� �� 2�� ��
��� ���� �� ��� �� ���� 
 ������ ���
��
 
�� ������ ��� �������� �� 
 ������
����������
��
 ���
�� ����� �������� ��� ���� �� ������� ���������� 9������
����� 
�� ���� ������� ��
� �
�� ������.���
����2��
� ����� ��������
����
�
�� ����� ���	�
��� ������
Uracil
DNA RNA
2'-Deoxyribose
Thymine
N
N H
O
CH2
OH
1'
2'3'
4'
5' OH
OH
Ribose
O
CH2
OH
1'
2'3'
4'
5' OH
OHOH
O
OCH3
N
N H
O
O
�	���� ��� ����������� ������� ��� 
�� 2��
� ���� 
� ���� ���� ������.���
���� 2��
 
�� ���� ������� '
� ���� 
� ����
��
�����+ ������
�� ��
 ������.���
���� ��� ������
����� ������� ��� ���������
-� �� ��� ���� �� �������� 
�� ��� ���
��� �� ��� ������� 
���� 
�� ��������!���
��� �
��� ��
����� ��
� �� ���� �� �������� 
�� ����
��!�� �� (����� )�=
����� ����� ��� 
������� �� 
 ���������� �� ��� ������� ��� '%�.59+ �� 
 ���
���
��� ��� ������
�� ��� ���� ��
����� �� ��� �����
�� ���&����������� �������.
��
�� '���"+
 ���� ��� ��� ��
� �
	�� ��� ������� �
��.�
�� ���� ��� ������.
������� ������� �� ��� �����
�� ���
��� ��� ��� ���
�� �� 
��
�� �&������ 
�
��� %�.59 ���� (�� ���� ��
����� �� ����� �� �� �������
� ��
� ��� ������� 
� ���
%�.59 ���
 �� ����� ��� ��� ���������� �� �� �� 
����
 �� 
����
���� �
��.
�
���� ���� ��� �
����� �� ��� ����� ���
���
2�� ��������� ������ �� ���� ��� �
�� �
�
 
� �
� 
� ���� ����������� ����
�&���� ��
� �� ������ ��� ������
��� 
�� ���������� ���������
��� '��"�+ �
����
��
� ��� ���&����������� ���������
��� '���"�+� ����� �� ��� ���� ������
��
���������� ������� ��� ��������� ���� ������ �� �&������� �� 
� �&������
���
�� # �� 
��
�� ����� 
 ������ �� ��� �� ��
����� 2�� �������
��� �� ���
����� �
�� 
�� �
�
��� �� ��
����� 
 ��� 2�� ���
�� ���� ���
���
 ����� ���
�������
�� ����
���
��� �
��	�� ���� ���
��
�	 ��
5' end 3' end
OH
O
O
3'
5' CH2
O
OP
base
O
O
O
O
3'
5' CH2
O
OP
base
O
O
O
O
3'
5' CH2
O
OP
base
O
O
OH
O
O
3'
5' CH2 O
OP
base
O
O
O
O
3'
5' CH2 O
OP
base
O
O
O
O
3'
5' CH2 O
OP
base
O
O
OH
OP
O
O
OP
O
O dNTP
Formation of 
phosphodiester
bond
�	���� ��� ��� ���������
����! ������" �� �����������"
��� �
� �� ���
����� 
�� ���
�����
 �������� 
�� ��������
 
�� ����� ���
��
��
������ ��������� ���� �� 
 ������
�� ��
����
 ���
��� 
� �
��� 
 �������� 
�
��� ���� ���� �� �� �
�	
��� �� �� �� �� ��� ������ ��� ���� ��
� �� ��������� ���
��� �� 
 ���
� ����������
 �� �� ���� ��������� ��� ���� 
� ���
�	
���
������ ����&
 ����� �� �����
� ����������� ����� ����
 ����� 
�� ��������� ��
��� �
�	
���� �� ��� ���� �������� ��������
����� ��� ����� ���� �&��������
������.���
���� ���
 �� ��� ���
&�� ��
��
 ����
��� �&���� 
� 
 �����.�
����
������ ����& ���� ��� �������� ���� ��� *> �
�� �
���8 ���� �� 	���� 
� ��� �
�� ����� ���	�
��� ������
���� �� ���� 9���������� �����
������ ������� ����������� �
��� �� ���
�
�� ���
�� ���������� �� ���� ������� �� ��� ����&
 
� ��� �
��� 
�� �������
������ �������� ��
����� 
 ���� ��������� �&������� �� �
��� ���� �����
�����
���� ��� ����������� �
����
����� 
�� ����� ����� �� ������ ����& ��
� �
� �&���
 ���
��� ��� � ���� '
���
�����.�
���� ��� ���� ����
��
 ���� ** �
��� ��� ����+ 
�� �
��� ����� �� 
����.�
���� ������ ����& ���� 
 ���� �������
� 
���
�
��� '
 !��!
� ���������
����� ��� ������
����+� ��� �
���� �� �� ������
� �������� 
� ����
�� ������� ��
��� �� ����� �
� ������� 
 ���
��!�� ������ ������� ��� �����.�
���� 7 ����
�� ��� ����.�
���� ? ����� 9������
 �
���
� ��� ��������� ���� ������� ���
7 ����
 ��� ���� �� ��� �������
9������
 ��
� �� ��� ��� �������� ������ ����� 
�� ������ ������ �� �������.
����� ��� ������ ����& �� �� ���� ������ �� ������ # 
� ������ 	���� 
� �����
�������� ����� �� 
� �����
����� ������� ��� ������� �� ��� ����& 
�� ��� ��������
������������� �� ���� 
� ��� ���� 
�� ��&��
 ��
����� ��� ������ �� ������� ����
���� ��� 
����� �� ������������
 
�� ���� ����
� ��� ������ �� �
���� �����.
���
��� '
�� ����
��� 
���
�� �
����
� �� ���+ ���� 
 ��������� ����� �� ���
���
�� ��� �������� �� 
� �� ���� �� ��� ���� ���� ������� 
�� ���� ���� ���
�������� ���
��� ��� ����� ��� ���� ��� ���� ��� ��� ������������ �� ��� ����
��� 
���
 �� ��� ���	 ���� �������
 ��� ���� ��� ��
� ��� ��������� �� ��� �������
�� ��� ���� ������� 
� �� ������� ������������
��� �� ���� �� ������
����8 ��� ���� 
�� ��� ���� �� ���
��� ���� �� ����
��������� ���� �� ������
� ��� ���������� ���� 
� '����+ �
�����
� ��
������
��� ��� ������ �� ������� 
�� ������������ '
 �������� 	���� 
� ��� �������
���	��+ �� ��������� ��&��
 
�� �
���� �� ��
���� ������� ���
	��� ��� �� ���
���
���� �� �
����
 ����� 
�� ��!���� 	���� 
� �������������� '���������
��� ���
��+ ��
� �� 1��� ��
�3 ���� ���
	 ��� ��� ���
���
 
�� ���� �� ������
���
�� ��� ���� 
�� ����
� ����� ���� 
����� ��� ������ �� ������� �� ��� ����&
�� ���� 
������ ��� ������������ �� ��� ���� ����������
��� 
��� �
�� 
�
��������� ��� �� ��� �
���
����
 ����� �� ���� �������� �� ,�
���� $�
�� ��� ��
����� ��
� �� ���� �� ��������� �� ��� ������ �� �
��� �
��� 
��
�
���
��� ����������� ���� ���� 
�� ����
��� ���� ��� ����� 9������
 �� ��� ��
��� ���
��� �� ���	�� 
� 
�� �����
 ��� ��� �� ���� ���� �� ���
�� 
� ��
� �����
�� �
� ��������� ���
& ���� 
 ���.����������� ����
 ���� ��� ��
�
��������� 7
���� �� ��� ����&� ���� �� 	���� 
� 
� ���� �������� ���� '�� �����
�� �� ���
���������� �����
 �������� ���� �� ��� �
���� ��
����+� ��� ��
���� ���� 
��� ��
�� 
 ���
&�� ���� 
���� ��������� �� 
 ������� ��� ��
�����
 �� ����� �
����.
�
������ �������� �� �
�� ����
��� 
�� ��� ���	� �� ��� ���
 �� �
�� ���
������ ��� ������������ �� ��� ��������8 ��
� ���� ��� �
���� ����� �� �
� ����
���������� ���� 
 �
�����
� ����� ���� �� ��� ���������� �� ��� �
�����
���
��
����
 ���� 
� ��� ��
��������� 
������ 
�� ��� �������� �� 
� 
�
���� ���
�� ��������� ��� ��� �
�� 
� ����� �� ��� �
���� ��
���� ����
��� ���� 
�
�����
� �����
��� �
��	�� ���� ���
��
�	 ��
��� ���� �
���
��� ��� �����	��
	��
��� ���������� �� 
 /����0 �� �
���� ���������� ��� ������� �� �
�	 �� ��� �
���
�
�� �� ��������
 ���� �� ����� �� ���� �� ��������� ��� ���� �� �������
��� ��
� ������
��� ��
�
��������� '
 ���������+� �� ��� ����� �� �������� ����������
�� ���
�� �������� �� ��� ��� ���� ���� 
� ��
���� 
 ��� �� ����� ������
��� 
 �������� �����������
 
������� ���� ������� ����� /�����0 ��
� ���� ���
2�� ��������� ���� 
� �������
� 2�� 
�� ��
����� 2��
 ����� 
�� ���
��
���
��� ���� ��������� �� 
��� ������� �����
���� ������� ����� 
�� ������
��
��� ������ �&�������� �� 
 ���� 
������� ��� ���������� ��
�������� �� ��
��.
�
����
-� ����� ��� ��� ���� /����0 
� ����� ���������� ���� /���� ��
���� ��
��0
'52(+
 ���� ��� ������ ������� ��� ��
�� 
�� ���� ������ '
������� ���� ��
�
���������� �� ����� �
��� 
� �� ������� �� ������ �� ������ ��� ������� ��� ����
����� ������+� �� �
�����
 ���� �
	�� ��
�� �� 
� ������������� �� ������ ��
��	
������
 ��� �������� �� ������� '��� �����+ �
	�� ���� ���������� ����
���������8 ��� ������ �� ��� ���������� ��
� ����
��� ��� ������
���� ��� 
�������� ����������� �
� �� �
�� ����� ������ ��
� ��� 
���
� ������ ��.
 ������ 7
���
���
 �� �� ��� �������� �� ������� 
� �������� �
����
����� �����.
������ 9������
 ���� �� �
���� 
 ������� �������� -� 1��� �
�� �� �� �
����� 
� ��
��� �� ��� ��� ���� ��������� �� ������� �� 
�� ���������� ���� ��� ������
������ '52(+
 ��� ������ �� �� ����� ��
� �� ��
�������� ���� �2�� '���������
����
���
��� �������+
 �� ��� ����� ���� �� ��� ������ ����� '��������� �����
.
���� �������� ��
� 
�� ������ ��� ��
���
���� ��
�� ����+�
�� ���� ������� �� �
�� �� ��������� ���� �� ��� 	�� ����������� �� /����0
���
��!
���� ������� ��	
������ 
�� ���	
������ '�
�����
+
 
� ����� ������.
����� ��
� 
 �
1�� ���� �� ��� ���������� �� ��� 
�����
���� �� �������
� �������
������ ��� 
�� ����� ��� �� ��������� ��������
����� #������
�� �
�����
 �� �� ���� ������ ��� 
 ����� �� ����� �� �� ��
�������� ���� 
������ �������� ���� ��� ���� 2�� ��������8 ���� ����� �� ����� �� 	���� 
�
� ������ '(����� )�@+� �� �� 
�� ����������� �������.������ �����
 ��� ��
�.
��������� �������
 ��������� 2�� '�2��+
 �� ���� ��
���
��� ���� 
 ������
�� ���
�
�� ������������� ���� �
� ����� �� ��� ��������� ��
����� ��� ����
����� 
� ��� ��� �� ��� �����������.������ �� �����
 ������
���� ��
���
����
�� ����
���� ��� ������� ������ ��.�����
���� '������� �������
���� ���� ���
�2��+� ������
������
 ��� ��������� �
� 
��
�� ������������� �� ������
�
�������� ������� ����� ������ ��� �2�� �� ������ 4����
���
 ��� �����
�������� 
�� ����������� ��� ��������� ����� �� ��� �
�� �
���
�
 
�� ����
�� ����� ���	�
��� ������
TRANSCRIPTION
TRANSLATION
mRNATranslation start
sites:
A B C D
Gene a Gene b Gene c
Transcriptional
terminatorPromoter
Gene d
�	���� ��� ��������� �� 
� ������
��
������� �
�����
��� ��� ��.�����
�� �����
���� �� ����� �����
 ���� �&����.
���� ���� �� �� ���� �������� �� �������� �� ��
����� �����������
�� ��	
������
 �� �����
��
 ��� �
� �� ����� ��������� �����
�� ��
���
���� ��
���������
 ����� ��
�� ��
� ���� �
���� ������� ���
�
�� �������� ���� 
������ �2�� �� ���� �
�� ����� 
�� �
�� �� ����� 
 ������ �2�� �
� ����
���� �� ��������� ��������
 ��� ����� ���	 �� ��������� �
��
 ���� 
� ���������
���������� �� ��� �2�� '��� �����+ �� �� ��������� ��� ���� ����������� ��
��������� ����� �� ���� ���
��� ���� ��������� �������� '
� ������ �� ����
�������+� � ��� ������� �� 
���
��� �
�� ������
� �������� ����� ������
����� $���� �� �������
�� �
�����
 ����� �� �����
��� 
 ������ ���.���.��� ���
�������� ������� ���
������ �� ����� �� ��� ���
 ��� �2�� 
�� ��� �������� ���� �� ���
��� ���
���� ��� ��	
������ �����
 ����� ��� �����
� ��
���������� ������� �� �
�� �����
������ ��
� ��
� ������ ��� ��
���
���� ���� ��� ���
� �������� �� ����
��� ����	�
�� �� ����� '�������+ ����� 
�� ������� �� ���������� �� �����
�� ��� ���
�
�2�� ��� ��
���
���� '(����� )�:+�
������� �� ����� �� �
�����
 ��� ���� ����� ������� ���� �� �
���� ��� �� ���
���� ��� ������� �� 
 �
�����
� ����8 ��� ��
���� ������ 
�� �����
��� ����
�
��� ������ �������� 
� ���������
�� �������� �� ������ ��������
�� �
���.
�
� ���� ��� ������� � ������� �
���� 
����� ���� ��� �
���� �� ��
����������
�� ��
���
���� �� 
 �
�����
� ����� �� ��� ��������� 
�� ��
���
���� ��� �2��
����� �� �� ����� �
��
 ����� �� ���
��� �� ����������� ��� �������� �� ��� 2��
�� �� ������� ������ ��
���
�����
��� �	�	 ���
��
�	 ��� ������������ ��
AAAA
Promoter
Precursor mRNA
Polyadenylation
site
5'
3'
exon 1 intron exon 2 intron exon 3
AAAAMature mRNA
Removal of introns
(splicing)
AUG Stop
codon
Protein
Cap
�	���� ��� A&��� 
�� �������
��� �� ��!�
	�� ���"# ���� $%&��''	��
��� �
� �� ����� ����� 
�� �&������� �� ������������ �����
� �� �� ���� ��
��� ����� ���� �
����
� �� ���� ���	 ��
� �� �� ����� ��������� ������� ��� �
�����
��
������ ��� �
��� ����
 '(����� )�B+ �� ��
� ����� ��� �� ��� �
��� �������
�
����
� ��
� �
����� ������
���� ���� ��� �����
���� �� �����&�
 ��� ������
�� ��� ��
�
���������� �� ��� ���� �� ����� ������� ��� ������� ���� 2�� '��
�.
���������+
 
�� ���� ��� ��
���
���� �� ��� �2�� ���� 
 ����������� ��
���������� (������ ��������� 
�� �� ����� ������ ��� ������ 
������� �
� ��
�
��������3 ����� ������� ��� ������� �� ��� �����������
 �������� �� 
�����
����
���� ����� �������� �� ���� 
 �����.������� �������
 
�� �� ���� �
��� ������.
�
����
 ���� �� ��������
���� �� ����������
����� �� ������ �� ����� ��
� ��
���� �
���
 2�� �
���� ��
� ������� �� ��� ���
� ������� �� 
 ���� '�������
�
�� ��
����� 2�� ��������� ��� �&
����+�
����� �������������
��
���������� �� �
����� ��� �� 2�� �������
��� 2�� �������
�� �������!��
�� ����� �� 
 �������� �� ����� '��� ��������+
 
�� �����
��� ��� ��������� ��
�2�� ���� 
� 
�1
���� ���������
� �����
� �
�����
� �������� �
����� ��� ��������� �� ������ '���� �� ������
��
� 
�� ������� ���
��� �� 
�� �����+3 ��4�,� ������� 
� �������� �%$ '���� %$
�
��� ������ ��� ��
���������� ��
�� ����+
 
�� ������ 
��*> '(����� )�*>+� ��
�� ������
�� �� �������
�� ��� �
���� �� 
 ���������3 ��� �
�����
� ���������
�� ����� ���	�
��� ������
Transcription
Translation
Folding
Post-translational
modification
RNA
Protein
Biological
activity
DNA DNA
DNA polymerase
tRNA
ribosomes
Replication
RNA polymerase
�	���� ��� ������
���� ����
CAGGTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACA
-35 region
-10 region
GTCCAAATGTGAAATACGAAGGCCGAGCATACAACACACCTTAACACTCGCCTATTGTTAAAGTGT
mRNA
Promoter
−30 −20
−10 +1−40
Transcription
start site
�	���� ���� ��������� �� ��� �������� ������ �� ��� ��� ������8 ���� ��
� ��� �%$ 
��
�*> ������� �� ��� ��� �������� �� ��� ���������� �&
���� ���� ��� ��������� �� ������
��4�,� 
�� ������ ������������
�
�� �&
���� ��� �� ������ ����� ��� �� ��� ���� �� 
 �
��� ������ �� ���.
������ ��� ���� ��� ��
� 
� 
�� ��� �������� 
 �
��� ������ �� ���� �
�� ���
�
�� �
�� '��� 7�& )�)+� ��� 2�� �������
�� �
� ������ 
������� ��� ����
��������� ��
� ������ # ��������� ��� ���� �� ��� �&
�� �
���� �� ��� ���
��������� �� ������ ��� �� 
 ������ �&���� �� ��� �� ����� �� 
 ������ �������
��� �
���� 
�� �����
���� �� �
�����
� ���������
 ��������� ��� �&������� ��
�����
���� ����� �� ���������
 �� ���������� ������� �� ,�
���� *%�
��� ����������� ����� �	�	 	���	����� ��
�� ��	
������
 �� �����
��
 ��� �������� �� 
 ��������
��� �
���� 
��
 
�����
��� ��
���������� ��
�� ����
 ����� 
 ������ �� �����.
����� ��
���������� �
�����
'���� ���.������� �������� ������� �� ����� �� ����� �
��� �� ��� ������+ ����
�� 
 ������ �� ���.
����� �������� �������� '���� �������� ��
� 
����� ���
�&�������� �� ��� ���� ��&� �� ����+ �� 
 ��������
��� ���� ������& ����
����
��� ���� ��� ���� 
���� ������&��� �
� �
���� �� ��
�����8 �� ����� �
������ ���
�
�� ������ 
�� ����������
��� ���� 
 ��������� �� ���� ����� ���������� ����
��������� ���������
 
 ���� ���������
��� ������� ������ �� ������ �� �������
�
�� ���� ���� ���� ��� �������� ���������� �� �����
 
�� �� ����.���� ��� ������ ��
�&�������� ��� �
�� ��� �� ����� �����������
 ��� �������� ������
 �������
������ �� ������&
 ����� ���� �� ��������� ������ �� ��
���������� �� �
����� ������
�� ��	
������
 ��� ����
�� ��
�������
 ������������� ��� '��2��+
 �� ����
�����.����� 
� ����
 
� �� �� ��������� �� 
 ������ �� ������ � �����
��!��
���������� ��� �� 
���� �� ��� $� ���8 ���� �� ��� ���� �������!�� �� ��� ���������
�� ������� ��������� '��� �����+� ��� ��������� �2�� �� ���
��� 
� 
 ��������
���� ���
��� ��� %� ��� 
�� 
 ����
� ����
 ���������� �� 
 ���� �� ����� ��
�������� ��������
 �� 
���� �� ��� ��� ����� ���� �� 
 �������� �������
 ��������
�� ����
�����
���� ����������� �� ������ �� ��� %� ����
���
��� ������� �
�.
���0� /�
�����0 �� �2�� ��������� ����� �� ���� ������ �� ��� �
���
���� ���
��� ����
���� �� ��	
������ �2�� '��� ,�
���� @+� (��
���
 �� ��� ������� ��
��������
 ��� ������� 
�� ������� ��� 
�� ��� �&��� 
�� 1����� ���������
�� �
�����
 ��� ��������� �� ��
���������� 
�� ��
���
���� �
	� ��
�� �� ���
�
�� ����
������ 
�� ������
�������� �� ����� �����
 ��� ��������� ��
��.
�
���� ��� �2�� ������ ������� ������ ��� 2�� �������
��
 
�� �����������
���������� �� ���� ����� �
� ���� ������ ��� �2�� �� ��������� �� ��	
��.
��� ��� $������� �% $� ���	 ���������
7
��� �
������ ��� # *> 
�� %$ ��������� �� ������ 
�� ��&��� ��
��� 
�� �������� ��
������!� ��� 
��������� ���� ��
� ��� ��������� �� ������� ���� 
 ���� �
���� ���������� ��
��
�
�����!�� ����������
"������� * �� ��� ��
���������� ��
�� �����
�� ����� ���	�
��� ������
����
 �� �����
��
 ��� �
���� �2���������� �� ��
�������� ��� �� ��� �������
�� ��� ������
�� ����� ��
���
���� �
	�� ��
���
��� ��������� ����� �� ������� ���������� �� ��������� �� ��� 
����� ��
��� �������� �2�� 
�
��
���
 �
���� ��
� 1��� ��� �
�� �� ����������� ��� �����
�� 
� �2�� ������� ���� �� 
������� �� ��� �
�� �� ����
�
���� 
� ���� 
� ��
��� �
�� �� ���������� �� �
�����
 ���� �2�� ��������� 
�� ����
��� ����
 ���	�� '���� 
 �
�� ���� �� ���� 
 ��� �������+
 
������� ���� 
�� ����
���� ��
���� ��� ����
������ �� ��� �
1����� �� �
�����
� �2�� ���������
��
�� ��
� �
�����
 �
� �
����� 
���� ����� ������� �� ���� �&�������� ��
��
����� ��� ��
���������� �� �������� ������ ��� ������
�� �� ���� ��	
������
�2�� ��������� 
�� ��
����� �� ����� �
���� ��
� �������� ��
��
 ����
�� 
 ���������� �� ��� �
�� ��
� 
� ���
���� ��
� �� 
��� �� ������� ��� ���
����������� �� 
 �
����� �&���� �� ���1����� �� ���� �
���
� �����������
�
��
����� ,���� ������
 �2�� ��������� ���� �� �� ���� ��
��� �� �����.
������
� ���
����� ��
� ��
 ��� �&
����
 ��
��� �����������
 ��� ���������
���
���3 ��� ����� �� 
� �2�� �� 
 �������� �� ��� ���������� 
�� ����
�
����
�
���� -� ���� ������� ��� �� ����� 
�� ������
���� ����� �
�
������ ��
,�
���� *%�
����� �����������
�� �
�����
 ��
���
���� ��
��� ���� ��������� ���� �� 
 �������� ���� '���
��	����� 	��
��� ���� ��!+ ����� �� 
�1
���� �� ��� ��
�� ������ ��� �� �����
�� ��� �������� ������� ���� '
��� 	���� 
� ��� !����"�������� ��#�����+ �
�
���� �������!�� 
� ����� ����������
�� �� ��� %� ��� �� ��� *=� �2�� '(�����
)�**+� ��� ������� �� ����� �� ���� ����
 
�� ��� ����
��� ���� ��� ��
�� �����
���� 
����� ��� ���������� �� ��
���
����
 
������� �� �
���� ���� �� ���� ������.
�� ��
� ��
����������
� ���������� �� ����������� ��� ����� �� ���� �&���������
��
���
���� ���������� ���� 
��� ������ �� ��� ����� ��
��
 ���� ��� �
���
������� ���������� ������ 
�� ��� 
�
��
������ �� �2�� ��
� ���� �������!�
�
�� ������ ���� ������� �� �&������ ���� ����� �� ,�
���� *$�
5'
Translation
3'
mRNA
16s rRNA
30S ribosomal subunit
met
Initiator
tRNA
�	���� ���� 7
�����
� �������� ������� ����
��� ����������� ����� �	�	 	���	����� ��
�� �
�����
� �������
 ����� ��
���������� 
�� ��
���
���� ����� �� ��� �
��
����
������ �� ��� ����
 ��������� ���� ���� �� ��� �2�� 
� ���� 
� ��� 27�
�
� ���� ��������!��� ���� ����� ���� �� 
 ���������� �� ��������� ���������
����� ������ ��� 2�� �������
��
 ��
���
���� ��� �2�� 
� �� �� �����
��������� ��
 
������� ��� �2�� �
� �� ���� �����.�����
 ��� �
�����
 
��
�
�
��� �� ��������� �����
���
� 
������ �� ��� ������������� ������������
�� ��	
������
 ��� ����
���� '
� ���
�+ �� �������� �������
���� �����
�
�� ������� 1��� ������
� �� ��� �����
���� �����
 ��� �������� ����� 
� ��� ����
$� ��� �� ��� �2�� �� ��� �
�
 
�� ��
�� 
���� ��� $� ����
���
��� ������
'<�2+ ����� �� ��
���� 
� �����
���� ������ ��� �� ����� �<4�
� �� ������.
����� �� ��� �
� ������� �����
����8 ��� ����������� �� ����� �� 
��� ������
��
�� ������ ��� ��
�� �� ������� ���������� ��� �
�� ��
� ��� $� <�2 �� ��
���� �� ���
���� ������ �� ��� �������� �
	�� �� 
� ������
�� ������ ��� ���������� ��
��.
�
���� ����������
 
�� ��������� ������
�� ���������� �
� �
�� ������ 
 ��������
�� 
 ���
���� ������ �� ��� 
����� �� ������� ��
� �� ���������
�� ����� ���	�
��� ������
� ��� �� ����	 
 �	�	
��� ���� �	 
��
�
��
������� ��	�
 �
��� 	
���	� 
��
�������� �� ���	�� �
�	��
�
 ��	� 	
� ������
��	��� �������	� �� ��� 	�����
� 	�� �� ��� ��	
����� �� ���
�� ���
 ����
	
�
���� 
���	� 
��
��������� ���
� ��� ���
�
��� 	
� ��� �
�	��� �������	�� �� �
��
�� 
�
�
��� ��	� �����
 	
� ���� �������	� ����������	� ��� 	���	� 	���	
	���
	�� ���	����
 �� ��� �����
 ���� �� ���������� �� ����
 �	���
 
��� 	
 ����
����
������� ��
 	�����
 �!�	��� �� 	�� �
�	��
�
� �
�� �	���
�	 �� ���	�
�
"�
���� ��� ������� �	���	�� ��	� ���
�	
����� 
�
����
 ��� �
� �� ��� ��
�
���������� ���
 �
 	 ������� ��	� ���� �� 
�
�
�
����� �	����	
 �� �	�� ������� ��
�	
�����	
� 	����� ���� 	� ����
�
� �� �	
������ ���� #��� ��	� �� �
 ��
���� ��
�
��	�	�� ��	��
 �� �	#��� �������
� 	�� ��	� �� ���
 �	� ��� ���� �
����� 	
�����
 �� ��	��
 ��	� 	
� �������	� �� ��� �	
���� ��
� 	
� �����
� $����	
���
��� 
������ �	���
�������	� �
�����
� �� ��
������ 	 �	���
�	� 
�
	�� �� ���#���
	 
����� ������ ��
 ������	���� 	 
�
��
 �� �
�
� �����
�
 �
 	�
� 	 ��
� ��
��������
 �� ��
� ��
���� �
 	�
� 	������ �� ����
� 	
 	� �����
��� �� ��� �������� ��
��� ���
����� 	 ��
���� ���� ���� 	 �	���
���� �
 	�� ����
 ���� �� ����� �� 
���
	 �	� ��	� �� ���� �� ������ ���� ��� ���� 
�����	��
� ���� ��� ���� �
����� 	
�	
�� �����
 �� ����
 	�� ���� �������	� �����
 �� ��	� ����� �� "%& ' ��� �	��
��
��� ��� ���� ()���
� *�+,� -� �
������� 	 �	
�� �����
 �� �����
 �� ���
 �	��
��� �	� 
�!����� �� �
 �	��� �� 	
 	 �
��� �� 
���� ��
 ���
�
��� �� ��� �
�	��
�
�� �	�� �
��� .�� �	� ���
�
 ��
 �
����� �
����� �� �	���
�	� �
 ��#	
�����
����
� .�� �	� ���	�� �� 	�� 
���� ��	� �����
���� ��	� ���	���� �	#�
 �� ���
�
���
���
 �� ��� ����� ��
 �
����� �
������ �
 ��� ���� ��	� �	
��
 ��� .�� �	�
���� ��
��� ��� ���� �
�� ��� �	���
�	� ����� 	�� ��/��� �� ���� 	 ���
� ���� 	��
�
����� 	 ���� �� �
	�
����� ���� ��	� ���
�
 ��� -����� 	�� �� ���
� 	�����	�
����
 ���
 	 ������� �
���
 ���� ��� 
	�� �	
�� 
���
�
�� 
��
�!���� ��	���
� �� ���� ���
���
 ��� ���
 �
���
 �
 	��������
�����	��� ���� �	���
�	� ����
 (�	���� �
 �
��, 	
 ��� ��
� 	�� �	��
 ���������
��� ��
��
��� �� 	���
�	���� ��
� ����
� �� ��
��
� �� ���
 ��	���
 �
 �� �
�
���
	� ���
���� �� ��� �
���
� ���� ��� ���	��
 �� ��� �	
���
 
���
 ����� ����
���
�� ��
���
 �� ��� 
��
�!���� ��	���
�
From Genes to Genomes: Concepts and Applications of DNA Technology.
Jeremy W Dale and Malcom von Schantz
Copyright  2002 John Wiley & Sons, Ltd.
ISBNs: 0-471-49782-7 (HB); 0-471-49783-5 (PB)
Mixed
bacterial
culture
Bacterial cloning Gene cloning
Mixture of
DNA fragments
Transformed
bacterial
culture
Each colony
is derived from a single
cell and contains a
different DNA fragment
Each clone carries
a different piece
of DNA
Each colony
is derived from
a single cell
Bacterial clones
Transformation
������ ��� ����	
�
�� �� �	���
�	� ������� 	�� ���� �������
��� �������� �� ��� ���������	
$��� �	���
�	� 
�����
 ���� �	��
	��� �	#� �� "%& �� 	 �
���
 #���� 	
������
�����
�� 0�����
� ��
� 
�����
 �	�� �� �� 
��/����� �� ������	� �
���
��	� �
�	�����
 ����
� "%& ���� ����
 ��� ����
� �� 	�� �	
�
� ��� "%& ����
��� �� 
�����	��� �� ��� ��
� ���� ����
 �� �����
 
��������
 ���� (���� �
 ��
�
���
����, ��� ��
� ��
���
��� �
 	���
�	������ �
 ����
��
	��� ���� 	 �������� ��	�
�
 
������1�� �� ��1���
 ������ ��� ��
� ���� 	
 	 
��
�
	�� ��
 
�����	����� )�
��
� ��
��
�
 ��� �	���
 �
���
 �
 ��� 
����	�� ���� 2� �
� ����
�� �� �	
� ���
"%& 	�� 	���� �� �� �� 
�����	���� ��
� 	
� �	�� ����
 �� �����
 ��
 �
� ����
�	���
�	� $��� �� ���
� �����
 	
� ��������� ����� 	
� �	��
	��� ����
���
�����
 �� "%& ��	� 	
� 
�����	��� ������������� �� ��� ��
���
���� 	�� 	
�
����
���� �� ��� ��� �	�����
 ����
 ���� ��� ���� ������
� (�� ��	���
 3 �� ����
��������
 ����
 ����
 �� �����
� ��������� ��
�
�
 ��	� ������ �	���
�	� ���
�
	
� #���� 	
 �������
������� �
 ��	��
 ��
 
��
��,
 �� "%& ��	� �� �	�� �� ����� �
 ��
�
��� ���� 	 
���	��� �����
� �
�������
	 ���
������� �
������ ���
�
���� �� �����
 ���
 ��
�
� ()���
� *�4,� ��
�������	�� �������� ���� �� 
�����	��� �� ��� �	���
�	� ����� 
� ��	� 	�� ���
����
 ��
������ �
�� ��	� �����	� �
	�
��
�	�� ���� ����	�� 	 ���� �� ���
 �����
�� 
�������	�� "%&� & �	���
��� ��#� �
 �
�� �	� 
�����	�� ��
� 
	����� ����
�	��
	��
� ���������
� �������� ���
� 45 ������
 �
 
�� ��
 ���������	�
�� ��� �� ����� 	 
���
DNA to be
cloned
Vector
plasmid
Recombinant
plasmid
Transformation
Bacterial replication
Bacterial replication
Ligation
Bacterial
cell
Bacterial culture containing a large number of cells; overnight
growth of E. coli will produce about 109 cells/ml
������ ��� -	
�� ������� �� ���� �������
�
���� ����
 
�
� �� ��
� �	
�� �����
 �� ����
� 	���
 *5 ����
	����
 (+5 ���
,�
���
� ���� �� +� +56 (��� ����
	�� �������� �
 + 555 555 555, ��
����	��
 ��
��� �����	� �
	�
��
�	��� 7	�� ��� �� ���
� ����
 �	
��
 	 ���� �� ��� 
��������
	�� "%& ��������� 
� �� ���� �	�� �
������ 	 ��
� �	
�� �����
 �� �����
 ��
��� ������ "%&�
�� ���
� ���������	� �
���� ���
 ��� �������� ������������� 	���
 	 ������
��� �	���
�	 
�	
� �� 
�� ��� �� ���
����
� 	�� 
��� ������������ ( �� 
�	
��
 ��
�
���� 
������� 	
� 	���	��� 
	���
 ��
� ������� ��	� ��	�� ��� ��������� ��
���
����
� ��������� �����
��� �� ������� �
 ��� �	�� �	���
�, 2��� �
 �
��� ���
�������� ����
 ���� 	���� +� +56 �	���
�	 ��
 �� �� �����
�� 0�����
� �� ��
�	#� 	 
�	�� 
	���� 	�� 	�� �� �� �
�
� ������� ���������	� �
���� ����
�
���� �� ����� �	� ���
 �� �
��	�	���� 	�� �� ���
 �	� �� �	� �����������
�
����� ��������� !�	������
 �� ��� ������ "%&� �� �� �	� ��� ��� �	���
�	 ��
��
 �������� �� ��� ���������� ��
���
�
 ��� ������ ����� �� �	� 	�
� ��� ��
� �	
�� 	�����
 �� ��� �
����� ��
��	� �����
�� �
��
 �� �	
� ��� ���
 �
�����
�� �� 
�!��
� 	 ������ ��
 /������ �����
�� "%& �� 
��� 	 �����
� 	
 ���� 	
 	 �	� �� ������� ��� �����
 �� �
����� 	�
����
������ ��
 ���
 /������ �� �	#� ��	��� �� #�� �� ��� ����������� �� ����
������� ���������� �	
 ��� ��
����
� �� ��1���
 ��	� ����� �	
� ��� ���
�
�	�����
 �� 	 ��
� �
���
� �	�� �� �	�� ��1���
 ������ 	
� ���������
�
���
��������� ����� �
�	# ��� 
��	
'���
��	�� �	�#���� �� "%& ��������
	� �
���
� 
���
� 	�� ��� ������� ����� 	
� 	��� �� /��� �������
 ��� �
	�����
�� "%& ��	� 	
� ����
	��� �� ���
 �	� ()���
� *�*,� ��
� ��1���
� 	�� ���
�	�
 �� ����� ���� 	
� �
���� ��
�
���� �� ��
� ���	�� �� ��	���
 8�
���� 	 ����� �� "%& �	
 ���� ��
�
��� ���� 	 ��	
��� (��
���� 	 
��������
	�� ��	
���, �� ���� �	
 �� �� ���
������ ���� ��� �	���
�	� ��
� �� 	 �
	�
�
��
�	���� �
���
� 9���
	��� ���
 �
���
 �
 ��� ��
� ��������� 
� ���� 	 
�	��
�
���
���� �� �	���
�	� ����
 	���	��� �	#� �� ��� ��	
���� 0�����
� �� �
��� 	
��	
��� �����
 ��	� �	
��
 	 ���� ������ ��
 
�
�
�	��� �� 	 
������� 	����������
�� �	� 
����� ��	�� ��� ��� �
	�
��
��� �	���
�	� �����
� ���� 	�	
 ��	��
Vector
plasmid
Linearized
plasmid
Restriction
site
Recombinant 
plasmid
Ligation
Restriction
sites
Cut with restriction endonuclease
������ ��� ������� 	�� /������ "%&
�� ��� �� ����� 	 
���
����	����� ��	� 	���������� 	�� ���� ��� ����
 ����� �	�� 
������� ��� ��	
���
���� �� 	��� �� �
�� 	�� ��
� �������
�
 ��
 ��
�
������ ���
 ��� ���
���
 ��� �� ��� ���� �� 	 ����� �� "%&
�	
���� ��� 
������� ���� ��	� �� �	�� �� ������ 7��� 	 
�	�� 	�� 
��	������
����� �
�	��
� ��#� 	 �	���
��� ����	��
 ����
	��
 �� ����
� 	�� ���� 	
� ���
	
	���� 	
 ��
�
��� �	�#��
 ��� 	
� 
�����
 �� 	 ���������
 "%& ���������
2� �	�� �� �
�	# ���
 �������� ���� 
�	���
 �
	�����
� ����� �� �	� ��
�������	��� (�
��� 
�
�
������ ���������	
�
, �
 ����
�������	��� (�� ����	���	�
��	
���,� -�� ������
 �� �� ��� �� ���� ���	�� 	 ��
� �	
�� �����
 �� �����
���
�
	�����
 �� "%& ���� �� �	
� �	� �� 
���	��� ��
������ 	 
������� �
	������
��� 	���� �
��	���� ��� 
������� �
	����� ��	� �	
��
 ��� 
�!��
�� ����� �� ����
�	� �� 
��	
	���� ��� �
	�����
 �
 �� 
�1�� ��� ���
� 	
� 
� �	�� �
	�����
 ��	�
���
� ���� �� 	 ��� �� �����
��� �����
 �� "%& ��	� 	
� 
� 
����	
 �� 
�1� ��	� ����
�	���� �� 
��	
	����
��� ��
� ��������	
)�
���	���� �� �
 ��� ����
	
� �� �
� �� ��
��� 
������� "%& �
	�����
� ��� ��
��� 
�
�����
 �� ���� ������� �
 ��	� �� �
�����
 	�����
� ��
� ����
���� �	� ��
������� 	 
������� ����� �� "%&� :	���
 ��	� 	��������� �� 
��	
	�� ��� "%&
�
	�����
� �� �	#� ��� �������� �����
� 	�� �
� "%& ���	
� �� ��
�
� ���
�
	�����
 ���� ��� �
��	
�� �����
� ;���
 ��� 
���� ���������
� ���� ���
�
	����� ���� �� ��
�
��� ���� �	�� �����
 ��������� �� ���
 �	�� �� �
�����
	 �����
� �� 	 �	
�� �����
 �� �����
��� 
�������	�� �����
 ��������
� ����� �
#���� 	
 	 ���� ������	 (�
 ��
� 
�������	��� 	 ���
��� ������	� �� ����
	
� ��
���� ����
 ��
�
 �� ���� ���
	
� ��	� ���� �� ��
�
���� �� ��	���
 <,� 2��� ��
�
	�
��
� 	 �	���
�	� �����
� ���� ���
 ���
	
�� �	�� ���� ���� ���� �	#� �� ���
��������� 2��� �� ���� ��	�� ��� �
	�
��
��� �����
�� �	�� ������� �����
	
�
�
 �
�� 	 
����� �
	�
��
��� ����� ���� ����	�� 	 �	
�� �����
 �� �	���
�	 	��
�� ����� �	
� ��� 
	�� 
�������	�� ��	
���� ���� 	 ���� �� ��� 
	�� ����� ��
"%& �
�� ��
 
�	
���� �����
�� $� ��
��	� �� 	 �����
� �� ����
	��
 (�
�������
� �
 ���
 �� �������
, �� �����
��� "%& �
	�����
� �� �	�� 	 �	
��
�����
 �� �	���
�	� �������
 �	�� �� ����� �	
��
 ��� �
	����� ���� ()���
�
*�=,� �� �
�������� 	�� 
�
������ �� ���� ���
	
��
 �
 ���
���
�� �� ��	���
 <
	�� >� ���
� �� ���� 
�� ��	� 	 �	
���� �� �����
��� �����
� ����
 ��	� 
�����
��	
���
� 	
� ����
	��� �
�� ��
 ���
�
������ ������� ���
	
��
�
2� 
���� �	�� 	 ��
� ������� �����
�� ��� ���
�	
 ��
������ 	� ��������	�
"%& �
	����� �
 ���
����� ���������� �� �
 
����� �� �
��	�� ��������	� �	���
�	�
�������
 �
�� ���
 �����
� ' �� /�
� ���# ���� �
�� 	 ��	��� 7	�� ��������	�
�	���
�	� ������ ���� �	
� 	 �����
��� ����� �� "%& �
�� ��
 �
����	� �������
�����
�� 
� �� �� �	� �������� ����� �	���
�	� ������ �	
��
 ��� ���� ��	� �� 	
�
����
�
��� ��� ��
������ �� ������
 	 
����� �	���
� 2� /�
� �	�� �� ���# ���
��� 
��� ����	���� � 
Vector
plasmid
Mixture of
recombinant
plasmids
n
Each colony
carries a
different
insert
fragment
Mixture of DNA fragments
������ ��� ?	#��� 	 ������� ���
	
�
���� ������ 	�� ������	�� �� ���� �
�
� ������� 0�����
� �� 
���� �	�� ���
�
����� �� #������ ����� �� ���
� ����
	��
@�������
 �� �	���
�	� �������
���
 	���	��� �	
� ��� ���� ��	� �� �	��� ��
 �
 ���
���
�� ��
� ����� ��
��	���
 >� ��� ��� �������� �
�� 	�� ��
� ����
��� ������ �	� �� ���
��
����� ��
� 	
 	� ��	����� ��
 ������
 �� ��� ���������� �� �	���������
��
��� !"�����#����
�� 	 �������
�
	���� "%& �
	����� �
 ��	���� ��� �������	���� ����
 �������
��� ��� 
�
	��
 �������
 ���� �� ��
������ 	�� ��� ��� 
�
	��
 ���� 
��	
	���
 ��
 �
 #���� 	
 ����������
�� �
 ��
 ��
�	��� (	�� ��
 	���
	����, 	
���������� 2��� ��� 
������� �
 	������ �� ���� 	�	��� ���
� ����
 ���� 
���
�
�$ ��� �� ����� 	 
���
	�� ��� �
����	� �������
�
	���� �
	����� ���� �� 
����
��� (��� ��� 
�
	��
	
� 
	�� �� ������,�
2� �	� �����1� ���
 ���������� �� �������� 	 
������� ����� �� "%& �� 	
������� �����
� �� �	������� 	 
������� "%& 
�!����� (��� ��
��,� 	�� ������
��� �	������ �
��� ���� ��� ���	��
�� �����
� �� �
	�����
� 2��� ��� �����
�
�
 ������ ����� ��� �
��� ���� ���� �� ���
���1� �� 	�� 
��	��� "%& �
	�����
()���
� *�8,� ����� ��	���
 �
 �� �������� ��� 
������� "%& �
	�����
 ��	� ��
�	���
)�
 
�
������ 	 ���� ���
	
�� ��� �	������ �
��� ���� ���
���1� �� "%& �
��
	�� ������ ��	� �	
��
 ��� ��
�
������� ���� �
 �	
� �� ��� �� �	� ����
�����
 ��	� ������ 	�� �
�� �� 	 �����
� �
�� ��� ���
 �
������� 	� ���������
	����� �� ��
 ������ �����
�� ���
� �� �
 ��� !���� 	
 
����� 	
 ��	� ' �� �	���� ���
���1� ��� �
��� ��
��� �������
 �� 	� 	�	
 ��	��� 0�����
� �� �
 �	
� �� �
	�
��
 	 �	
� �� �	��
������ ���� 	 ����
	�� �� 
�����	����� 	�� ���� ��
� ��� ������ 
� ��	� ���
"%& �� ����	��
 �
 ����� �� ��� ����
	��� ��
 �
�����
 	 �	���
� �� "%&
���
 �� ��� ����
	�� �� ��
�����
 ��
�
������� �� ��� �������
 �� ���
�
����	� ��	�� ()���
� *�3,� ����� �	� ���� �� ���
���1�� �� ��� �	������ �
���
�� ��	��� ���������	����� 	�� 
�����
�� �� ��� 
�!��
�� ������� 0��
���1	�����
�
��� �	������ "%& �
 :%& �
���
� �
 	� ����
�	�� �	
� �� �	�� ����
������!��
 ��	� �� ���� ��������
 �� 
��
�!���� ��	���
�
Denaturation
Annealing
Labelled
probe
Denaturation
Hybridization
with probe
Probe detects
specific fragment
Denaturation and
re-annealing double-stranded
DNA
Hybridization of DNA
with a labelled probe
������ �� 0��
���1	���� 	�� ���� �
���
��� ��������	���� �%
Collection of
recombinant
bacteria
Comparison
with plate
identifies the
required colonyColonies replicated
onto a filter and
lysed to create
a pattern of DNA
spots
Filter hybridized
with a labelled
probe
������ ��$ ������ ���
���1	����
�� ���"&���	� 
���
 '������
 �� ������!�� #���� 	
 ��� ������
	
� ��	�� 
�	����� (A�:, ����� �
�����
	� 	���
�	���� �� ���� ������� 	�� ���� ���
	
��
 	
 	 �	� �� ���	����� �
	���
!�	������
 �� 
������� "%& 
�!�����
� A�: 
�!��
�
 ��� �
� 	 �	�
 �� �
���
��	� ���� 	���	� �� 
���
 	� �����
 
��� �� ��� 
�!��
�� 
����� �� "%& ()���
�
*�<,� "%& ������
	
� 	����� ���� ���� 
�����
�1� ��� "%& 
�
	��
 
�	
����
�
�� �	�� �
���
� "��	��
	���� �� ��� �
�����
� 	�� 
��	���	���� �� ���
�
���
� ���� 	���� 	 
����� 
���� �� 
�����
�
� :���	��� �����
 �� ���	��
�
	����� 	���	���� 	�� �������� ���� ���� 
�
� �� 	� ���������	� 	�������	���� ��
��� "%& 
�!����� ������� ��� ��� �
���
� ���� ��� 	����� �� �
�����
�������� �� �	�� ������ 
� ��	� 	���
 
	� 45 �����
 ���
� ���� (����
����	���, ��
�( ��� �� ����� 	 
���
DNA template
Add primers
Denature and re-anneal
Primer 2
Primer 1
DNA synthesis
Repeat cycle
n times
Amplified product (2n)
������ ��% A�����
	
� ��	�� 
�	�����
	 ������������ ���
�	
� �� ��� 	����� �� �
������ ��
 ��	���
 ��� 	�������	����
�� 	 
������� 
����� �� ��� "%&� 	�� ��� �
����� �	� ���� �� ������ ��
������
 �� ������
	
� ��	�� 
�	������ 	�� 
��� �� ��� �	�� 	�����	����
� 	
� ���
�
���� ��
� ����� �� ��	���
 6�
�� ���
 ��	���
 �� �	�� �
������ 	 �
��� ���
���� �� ��� �
�����	� ������
�
�� �� ���� �������� ��
� �
�����
�
� 	�� 
��� �� ��� �	�� 	���
�	����
�
	�����
� 	
� ��
�
���� ��
� ����� �� 
��
�!���� ��	���
�
��� �������	�� ��	�� ��	����� �)
� ��������	�
� ��� 
�����	�
� 
�
������� �����
��� �����	�
�� ��
 ���
�
	��
�� �� ��	��
	 �	
�
��� ����� ���	 �
� �
�� 
� ��� 	�
��
���� �������
 �
 �� ���� �
� �� �
 ������� ���
��� �
� �
� �
�� 	��	
��� ���� ��
� ��� ���� ��
 �
 	����� �� �� ��	�������
�� ��
� 
���� �������� �
�	
������ ����
��� ������ �����
�
����� �
������
���� ��
� ���� ���� ���� 
� � ��������� ���� �� 
��� ��� ��� !������ 
� ���
�������� �������� ������� � ��������� ��	
����� ����
� �
� �
�� 	��	
���� "
�
�
�� �		������
�� ���� �� #$� ���� $��	��� %� 
� �����
�&���
� �������� ����
$��	��� '� ���� 	��� �������� ��� �� ����	������ (� ���� ���	��� �� ������ ���
�
���	�� ��
������� ��� �
�� �
��
��� ���
 ����
� 
� 	�������� ��
 ����)
��
������ ������� ���
�* �
� ������� ��	��������� 
������ �
� ���� ���
 �
�
����� � ���
���
�� ������ ���� �		��
�� ���
����� �����	
� �
 ����� �
� �	�����
����
��� ����� ��� ���� 
�������� ����
� �
� 	�������� ������� ���
� ����
���� � ������ 
� ����� �������� �� �
��
�� "������ �� ���
 ��� ��������
��������� ���� �
��
 �� � ������� 
� ��������� 
� ������
��� ����� ����� �
��
���	�� ���
 �
 �� ��	�����
 ��
� ��� ��
��� ��
��� ��
� ����	�� �� ������)
������
�� 
� � �
�� �
�	��� ������ ���	�� ����� ����� ���
� �
 �� �
�
���)
�&�
 �
 ���� ��� ��
���
��� ����� ��� �� ����
� +������� 	
������ ��� ��������
��
��
 �� ������� ��������
 
� ��
&�� ����� ���
� �
 ��� �
 ��
�
 
����
���
�
�� ��&���� 	������ �� ��� ���� ��������
��� ����� ���� ���
 �
 �� ����
 �
 ������� ����� �
�	
������ ��� ������ 
� ���
��������� ���� ���� ��
��� ���
�
��� �
 ��� ���� ��	�� ,�������� ����� ���� �����
���� ���� �
 �� ��
��� ���
�� ��� ���� �
������ ��� �� �������
� ���� �� �������
���
�	�����
 �� ����� �������� ��� ��&��� ��������� 	������ �� ��� �����
��
 ����� �
� ��� ���� 	��	
�� 
� �������� 
�� ��������� ���� ������ 
����
�� �
�-�����
� ���� .��� ��
 � 
�������� ���� �� /�/ ��
��� 
����
From Genes to Genomes: Concepts and Applications of DNA Technology.
Jeremy W Dale and Malcom von Schantz
Copyright  2002 John Wiley & Sons, Ltd.
ISBNs: 0-471-49782-7 (HB); 0-471-49783-5 (PB)
���	������ .��� ���������� 
������� ����
�� ��
 ���� 
��������&�� ��� 
����
�������� �� �������� ���� �� �	 
��� ��
 ���
 �������� ������ ���� �
��
�������� ���
 �
 
����
� ��� ��� ����� ��� 
�������� ���� �
������&� ���
�������� ��	�
��
#���� ��
 ������ ����� ���� ���� ����� ���� ��� 
�������� ��
� ��
�� �� �������� 
��
 ��!���� ����������� ���������� ������ ���������� 
� ��&������ �����
������ ����� ������ ���� � ���� ����� ��� ������� �� ����
 �� �
�� ������
��������� ���� � ���
 
���������
����� �������� �	 ���� ����� ��
 	����� �������� �� ���
 
�������� ���� �
������� 
� ���� �������� ��
 ��� ������������� �
�	
����� ����� ���� �
� ����
�������
 0 � �
�	��� �
����
� 
� ��� ��� 	�
����� ��	�
� ��
 ����
��)
������ �
�� ���� ��� ��
�� ����� 
� ��� ���� ���� ������� ������ �� �
�� �������)
����
� 
� ���
�
�
��� ���� (� 	��������� ��� ��������� ���
�
�
�� ����� ��
������� �������� �� ��� ������ ����� ���� �� ��
��� ���
 ������ ���������� +���� ��
�� ��������� �
 
����� ���� ����� ����� ������� ���
�
�
��� ��� �
�� ������
����� �
�
���
�� ��� ��������� ���� ��� 
�����	��
� 
� 	����
 ����
 ��� ������
	�
�)
���� �� $��	��� 12�� ,�������� 	�����
� �
����� ��� ���
��� 
������
 �� �����
������ �������� ����� �� ����
��
 ����� �
�
���
���
��� ���� ���	 �� ��� 	�
��
��� �� �
 ��	����� ��� 
�����
 ������� ���
 ��
�
����� 
���� �
�	
������
����� �
���� �������
�
���
��� 
� ��� ��
� � ��� 	��	�����
� �� ������ �������
 �� ���������
���� ���
�������� �������� /���� ����� �� � ���� ����)������ ��&��� �� �� ����
�
 ������ ���� �� �� ���� 
� ������ 
� 
�
�����
�������� ������� ���� �
��
�������� 
����
� �
�� ��� ���	�� �� ������� ��� ��&��� ���
�� ����
���
��� 
� ��� ��
� ��� 	��	�����
�� ���
 �
 �� ���� ���� ����� �� ��!�����
����� ����
�� ��� ����� ��������� 3
����� �� �� �
� 	
������ �
 ��� �����)
���� ����� ��� ���� �� �����)���� ���
���������� #�
���� �
���������
� ��� ��
���
��
 �� 
������
� ���� � 	�
��
����� ��&��� ���� �� 	�
������� 4�
����� ���������� ��� �		���
 �� ��������� �� 
�������� ������� ���
 	�������)
��
� 	�
�
�
��� 3
����� �� �
�� 	�
�
�
�� ���� ��� 
�����
 ������ ������� ���
�
���������
� �� ����	
����� �
� � �	������ 	��	
�� 
� ������� ��� �
������)
���� ���� �� ���
��
 ������ ���
��� �����!���� ���	� �� 
�������
 ���
��
����� ���
������������� �������	�
���
��� 
� 	�
����� �� 	����������� ��	
����� �� ��� ���� �
������ � ������ 
�
��&���� ���� ���� 
����
� ������� ���
� �� ���� �� 
���� 	�
����� ���� ����
��������� ���� �����!���� 	�
��
���� �� ���
��� �
 ��� ������� ���
�� �
�� ����������	
 �
� �
������	
 	� 
���
�� �����
Aqueous layer (DNA and RNA)
Phenol layer
Protein precipitate
Neutral pH
Aqueous layer (RNA)
Phenol layer (DNA)
Protein precipitate
Acidic pH
�
���� ��� #���
� ��������
�
��������� ��
 ����� ���� ���!������ ��	�
��
 ��� 
� ���
���� 	�
����� �� ��
��������
� ���� ��!�����
 	���
� 
� 	��������� � ������� 
� 	���
� ��
 ���
�
)
�
��� #���
� ��
 ���
�
�
�� ��� ��������� ���������� ���� ����� ��
 �
 �
�
���� ��� ��
 ������ �	������ ���� �
�
 �
 �
�� ���� �������� +��� ��� �������
�� ���
�
���� �������
 ��� 	�
����� ���� �� 
�������
 ��
 	����	�����
 �� ���
�����	���� �"����� 5�1�� (� �
� ��� ����� 	���
� ���� ��� ���� �!���������
 ����
� ������� 
� �������� ������ ��� �� �
������ ��� ����� ��� ������� ���
� ����
��
 ���� ���� ������ �� ��� �!��
�� ������ 6� ��� 
���� ���
 �� �
� ����� 
��
��� ��������
� ���� ���
�� 	���
� ��� ���� 	������
� ���
 ��� 
������ 	���� 
���
���� �
� �
 ���
��� ��� ��
� ��� �!��
�� 	����� #���
� �� ���������
���
�� �
 �!���������
� ���� ����� 
� ��� ��� 
� �� ���
�� ������ ���� 	�
���
��� �		�
	����� �
�
���
���
#���
� ��������
� �� ���
 ������ �� �����!���� ������ 
� ����	�����
� ���� ��
�� ��������� �
 ������ ���� ��� ������ 
� �� ��&��� ���� ���� ���
��
 ���
��
	�
���
��� �
 ��� ���� ���	� ���
�7 	���
� �� ������ �
��� �� ���� ���
�	��
� 
��
 ��
��� ���
 �� �
����
����� ������� 
���	
	���	�
"
��
���� 	���
� ��������
� �
� ���� ���� � 	�
����)���� ���	�� 
� �
��
������� ���
���� 3
����� �� ���� 	�
����� �� �
�� 
����� ���� �
� ���� �� �
�� ��
 ��������
�� �� ���� �
����� ������ 
� 	���
� ��
 ���
�
�
��� #���
� ��

Outros materiais

Perguntas Recentes