Dieta rica em metionina e perda de memória

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Epigenômica
Uma dieta rica em metionina, baixo teor de folato e vitaminas B6, B12 pode estar associada à perda de memória pelo silenciamento epigenético de Netrina-1
Palavras-chave: Alzheimer’s disease; epigenetics; memory; methionine; 5-methylcytosine; methylation; netrin-1
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Introdução
 A metionina, um aminoácido essencial, tem sido estudada como fator de risco para patologias vasculares cerebrais, incluindo deficiências cognitivas e demência.
Principal fonte: carne vermelha.
(Dayal et al., 2005; Zhuo et al., 2010)
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Introdução
Situações de acúmulo metabolizam homocisteína, pela transferência de um grupo metil de s-adenosilmetionina para s-adenosilhomocisteína (Kalani et al., 2013);
↑ Homocisteína → Doença de Alzheimer, distorção hematoencefálica, distúrbio sináptico (Kamat et al., 2016);
Carbono 5 do dinucleotídeo citosina-guanina (CpG) → 5-metilcitosina (5-MC) (Bender e Weber, 2013).
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Introdução
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Introdução
Família netrina
Netrina-1
Antinflamatórios
Angiogênicos
Plasticidade sináptica
Manutenção da memória
Neurogênese
Orientação axonal
Orientação celular
Orientação axonal
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Objetivo
Comprovar se uma dieta rica em metionina e pobre em vitaminas B6, B12 e folato leva ao comprometimento da memória através da metilação global do DNA e consequentemente o silenciamento do gene Netrina-1.
Metodologia
Ratos selvagens, alimentados durante 6 semanas consecutivas;
Grupo experimental: alimentados com a dieta HMLVD;
Grupo controle: dieta normal;
 Idade: 8-10 semanas.
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Metodologia
Teste de esquiva passiva
Avaliar a perda de memória motivada pelo medo;
2 compartimentos separados por guilhotina: claro e escuro (choque de baixa intensidade).
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Metodologia
Coleta de tecido cerebral;
DNA isolado > Medido os níveis de 5-mC .
Western blotting
Amostra: tecido cerebral;
Proteínas isoladas;
Antígenos injetados > Visualização da expressão do gene;
Análise: expressão da netrina-1 a nível de proteína.
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Metodologia
 Imunohistoquímica
Amostra: tecido cerebral; 
Secções incubadas com anticorpo;
Montagem de lâminas; 
Coloração.
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Metodologia
Análise de metilação do gene promotor;
Análise de enzima de restrição sensível à metilação;
Análise de fusão de alta sensibilidade da metilação.
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Metodologia
Administração intracerebral de netrina-1
Ratos alimentados com a dieta HMLVD foram divididos em 3 grupos (4-5 ratos);
Administração de 100ng de netrina-1;
Teste de esquiva passiva.
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Resultados
Teste de esquiva passiva 
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Resultados
Western blotting
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Resultados
Quantificação de metilação 
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Resultados
Imunohistoquímica 
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Resultados
Expressão de Netrina-1 após dieta HMLVD 
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Resultados
Teste de esquiva passiva após administração de Netrina-1 
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Discussões 
 expressão gênica de Netrina-1 na 4ª semana;
 função de memória após administração de Netrina-1.
Estudos demonstram que uma dieta rica em nutrientes apoia positivamente os processos cognitivos.
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Conclusão 
O presente estudo determinou o efeito da dieta HMLVD no comprometimento da memória de longo prazo após quatro semanas em ratos. A partir dos testes realizados, foi comprovada a redução da expressão de Netrina-1, em consequência da metilação na região promotora deste gene. Comprovou-se ainda que, a administração da Netrina-1 restaurou significativamente a função da memória nos ratos expostos a dieta. 
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Referência Bibliográfica 
KALANI, Anuradha et al. A high methionine, low folate and vitamin B6/B12 containing diet can be associated with memory loss by epigenetic silencing of netrin-1. Neural Regeneration Research, [s.l.], v. 14, n. 7, p.1247-1254, 2019. Medknow. http://dx.doi.org/10.4103/1673-5374.251333. Disponível em: <http://www.nrronline.org/article.asp?issn=1673-5374;year=2019;volume=14;issue=7;spage=1247;epage=1254;aulast=Kalani>. Acesso em: 04 abr. 2019.