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Universidade Federal do Rio de Janeiro Faculdade de Farmácia Toxicologia Geral Aula Prática: Determinação de corantes em balas ou pós para refresco Material: Amostra para análise Metanol amoniacal (metanol com 5% de hidróxido de amônio) Extrator de Soxhlet (balas) ou bécher de 200mL (pós para refresco) Balão volumétrico de 100mL Cubetas Espectrofotômetro Métodos para balas: Pesar cerca de 7g de balas em cartucho para extração no Soxhlet Extrair com metanol amoniacal por cerca de 6 horas ou até a amostra no cartucho ficar incolor Transferir para balão volumétrico de 100mL e completar o volume com metanol amoniacal Ler em espectrofotômetro no(s) corante(s) identificado(s), utilizando o metanol amoniacal como branco Método para pós para refresco: Pesar cerca de 3g de pós para refresco em bécher de 200mL Adicionar 30mL de metanol amoniacal, decantar Transferir líquido colorido para balão volumétrico de 100mL (não completar o volume) Repetir a extração com mais duas porções de 30mL de metanol amoniacal até a amostra ficar incolor Completar o volume do balão com metanol amoniacal Ler em espectrofotômetro no(s) corante(s) identificado(s), utilizando o metanol amoniacal como branco Tabela 1. Características espectrofotométricas dos corantes artificiais Corante Comprimento de onda nm E 1%1cm Amarelo crepúsculo 481 564,1 Azul brilhante 630 1840,0 Azul indigotina 610 449,3 Bordeaux’S 519 436,0 Eritrozina 524 1130,0 Tartrazina 426 536,0 Vermelho sólido E 505 447,9 Vermelho 40 505 536,0 Ponceau 4 R 507 442,5 De acordo com a tabela 1, absorbância azul brilhante 630nm (comprimento de onda onde tem absorção máxima) = 1840,0 na concentração de 10mg/mL (E 1%1cm) Ou se pode realizar a leitura do espectro de absorção dos corantes para observar a absorção máxima (entre 400nm e 700nm – luz visível) com padrões dos corantes Cálculo (exemplo): 1840 – 10mg/mL Abs amostra – x X = ??? Tabela 2. No caso de dois corantes Corante Comprimento de onda nm E 1%1cm Tartrazina 426 535 Tartrazina 481 170 Amarelo crepúsculo 426 426 Amarelo crepúsculo 481 592 Anotar a absorbância nos comprimentos de ondas dos dois corantes Cálculo: A426nm= 535x + 426y A481nm= 170x + 592y Sendo: A426nm = absorbância da solução a 426nm A481nm = absorbância da solução a 481nm x= concentração do corante tartrazina y= concentração do corante amarelo crepúsculo Resolvida a equação, temos: X= 2,67 (A426nm) - A481nm 1258 Y= A426nm – 535x 221 Referência: TAKAHASHI, M.Y. et al.; determinação quantitativa de corantes artificiais em alimentos, Rev. Inst. Adolfo Lutz, 48(1/2):7-15, 1988
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