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Ozônioterapia na reprodução e reabilitação equina

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Haroldo Vargas L. Jr.
Medicina Equina, Biotecnologias da Reprodução e 
Fisioterapia Equina
Membro da ABRAVEQ
Professor do IBVET 
Ozonioterapia na
Clínica, Reprodução e 
Reabilitação de Equinos
São Paulo, maio 2018
Ozonioterapia na Medicina Equina
• Experiência no uso no início da década de 1990
principalmente em feridas
• Histórico de uso pessoal da Ozonioterapia
Ozonioterapia na Medicina Equina
• Utilização de equipamentos simplórios para
tratamento de água e utilizando O2 não
medicinal na década de 90;
• Soluções tópicas de água+O3 para assepsia de
feridas demonstravam grande diferencial qdo
comparadas com sols. KMnO4, Líquido Dakin,
Iodopovidona e sabões medicinais.
Ozonioterapia na Medicina Equina
Principais problemas hoje: 
- Exterminar as crenças das “receitas de bolo” para o
uso na clínica e reprodução equina.
- Consolidar a importância de uma ótima anamnese,
um exame clínico acurado;
Principais entraves até 2-3 anos atrás:
- Ceticismo tanto de criadores da área médica como de
colegas da clínica de equinos;
- Dificuldade em convencer as pessoas que a
ozonioterapia não é um “procedimento mágico” e sim
uma importante opção de terapia coadjuvante para
diversas patologias e seus benefícios.
Ozonioterapia na Medicina Equina
Ozonioterapia na Medicina Equina
Principais problemas hoje: 
- Conscientização de colegas de classe, atuantes na
equinocultura, quanto ao uso responsável da
ozonioterapia;
- Conscientização da importância dos profissionais
participarem de cursos e ESTUDAREM sobre o tema;
Mercado do Agronegócio Cavalo no Brasil:
- Movimentação financeira atual:
R$ 16,15 bilhões
- Empregos Gerados:
3 milhões de empregos
Ozonioterapia na Medicina Equina
CNA 2016: Revisão do estudo do Complexo do Agronegócio Cavalo
Ozonioterapia na Medicina Equina
EXAME CLÍNICO
↓
AVALIAÇÃO DO ESTADO GERAL
↓
PROCESSO PATOLOGICO
INFLAMATÓRIO
INFECCIOSO
DEFINIR: DOSES – VIAS DE APLICAÇÃO – NÚMERO DE APLICAÇÕES
Ozonioterapia
Ozonioterapia
Principais áreas de aplicação da 
ozonioterapia na equideocultura
Ozonioterapia na Equinocultura
- Medicina Equina
- Reprodução Equina
- Fisiologia do Exercício
- Reabilitação / Fisioterapia
- Odontologia Equina
- Esterilização de materiais e equipamentos
Ozonioterapia
APLICAÇÕES NA 
MEDICINA EQUINA
Ozonioterapia na Medicina Equina
- Pré e Pós operatórios de cirurgias diversas 
como orquiectomias, drenagens de 
abcessos, artroscopias, peritonites, 
enucleações, etc...
- Tratamentos de lesões dos sistema 
locomotor como desmites, tendinites e 
lombalgias;
Ozonioterapia na Medicina Equina
Controle de processo infeccioso pré enucleação
Ozonioterapia na Medicina Equina
Controle de processo infeccioso pré enucleação
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações perilesionais em tendinites e desmites
Assepsia com Clorexidine Degermante 3 X Assepsia com Álcool 70 G 
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações perilesionais em tendinites e desmites
Aplicação peri e intralesional em tendões guiada por ultrasonografia
Ozonioterapia na Medicina Equina
- Lavagens articulares;
- Síndromes hipoxêmicas de neonatos;
- Septicemias e doenças infecciosas na fase 
aguda; 
- Perfusão regional: ex: Linfangites e edemas 
de membros;
Ozonioterapia na Medicina Equina
Auxiliar no tratamento de artrites infecciosas
Lavagens articulares: SF ozonizada e uso direto do gás O2-O3 em alta concentração
Ozonioterapia na Medicina Equina
Tratamento de doenças infecciosas de potros e neonatos 
Ozonioterapia na Medicina Equina
- Pós operatório de Cólicas
- Miosites
- Dermatites diversas
- Úlceras de córnea e conjuntivites
 ALVES et al, 2004, comprovaram a eficiência da
ozonioterapia na atenuação das lesões de reperfusão do
jejuno de eqüinos. Os efeitos de estresse oxidativo
produzido pelo O3, induzindo sistemas enzimáticos,
podem atenuar lesões de reperfusão que aliadas aos
efeitos antinflamatórios e liberação de óxido nítrico
induzindo a vasodilatação podem colaborar na
recuperação de eqüinos.
Ozonioterapia
Síndrome do Abdome Agudo Equino
20
Ozonioterapia
Síndrome do Abdome Agudo Equino
Ozonioterapia na Medicina Equina
Tratamento de Miosites
Ozonioterapia na Medicina Equina
- Laminites
- Pododermatites
- Doenças com sintomatologia nervosa
- Herpes Vírus
20
Ozonioterapia
Tratamento de Laminites
Número de animais tratados: 5
• 2 éguas PSA na fase aguda que não aceitavam a crioterapia
• 1 éguas PSA na transição da fase aguda para a fase crônica
Tratamento:
Auto Hemo Terapia menor 48/48 hs 240 ml, 3 aplicações
20 ml SC na região falangiana 24 / 24 hs, 5 dias
O3 Retal, 1 litro / 100 Kgs, [ 33 mcg ] 48 / 48 hs, 5 aplicações
AINES BID
AAS SID
Acepromazina BID
PAD de EVA
Tamanco na égua da fase crônia
Avaliação por RX com e sem venografia
• RESULTADO: 100 % CURA, SEM SEQUELAS
Número de animais tratados: 5
• 2 cavalos Mangalarga Marchador, Castrados, na transição da fase aguda para a
fase crônica, sem rotações de falanges, em propriedade sem condições para a
crioterapia
Tratamento:
20 ml gas O2-O3, 17 mgs, SC na região falangiana , MTE e MTB, 24 / 24 hs, 5 dias
3 litros de SF Ozonizado 15 min, 50mcs, via IV, SID
AINES – Firocoxib 0,01mg / Kg, SID
Acepromazina BID
PAD de EVA
Avaliação por RX sem venografia
• RESULTADO: 100 % CURA, SEM SEQUELAS
Ozonioterapia
Tratamento de Laminites
Ozonioterapia
Tratamento de Laminites
Infiltração gás O2-O3 região NDP, bilateral, SC, 10 cm3, [15 mcg ] 3 a 5 dias 
Ozonioterapia
Tratamento de Laminites
Auto Hemoterapia Menor + Retal - Dias alternados 
Ozonioterapia
Tratamento de Laminites
Ozonioterapia
Tratamento de Laminites
Ozonioterapia
Tratamento de Laminites
Ozonioterapia
Tratamento de Laminites
VENOGRAFIA PARA AVALIAÇÃO GRAU DE LESÃO
Experimento em andamento:
 Avaliação das alterações circulatórias através da
venografia no casco de equinos pré e pós aplicação do
gás O2-O3
 Região: F1 – F2 – próximo ao NDP
 Concentrações: 15 e 23 mcg
 Volume: 10 cm3 medial e 10 cm3 lateral
 Autores: Prof Leonardo R. de Lima (UFRF), Dr Haroldo
Vargas.
Ozonioterapia
Experimento Laminites
Ozonioterapia
HERPES VÍRUS
Ozonioterapia
HERPES VÍRUS
 Experiência pessoal
 Perspectivas da Ozonioterapia para um dos maiores
problemas da criação de equinos
- Problemas reprodutivos
- Problemas neurológicos
Ozonioterapia na Medicina Equina
- Processos inflamatórios diversos com ou 
sem associação aos AIES e AINES
- Associação com PRP e Ácido Hialurônico
Ozonioterapia
Aplicações com objetivos antinflamatórios
Aplicações Peri Articulares e Intra Articulares
Ozonioterapia na Medicina Equina
Publicações diversas comprovam sua
eficiência na Clínica de Equinos
 O ozônio atua diretamente sobre os mediadores químicos do
processo inflamatório. Inibe a produção de prostaglandinas, a
formação do ácido aracdônico e atua indiretamente sobre as
citocinas, bloqueando o processo inflamatório. (VIGLINO, 2008)
 A ozonioterapia pode ativar monócitos e linfócitos e induzir a
formação de citocinas tais como interleucinas, inteferon e fator
de necrose tumoral (TNF). Fundamental no tratamento de
doenças imunosupressoras (Chow, 2001; Bocci et al, 1993; Bocci &
Paulesu, 1990).
 No uso em problemas na coluna vertebral Lineiro et al,
2008, observou analgesia pela liberação de endorfinas no
local da infiltração, melhora na microcirculação sanguínea
através de maior concentração de óxido nítrico, aumento
das concentrações de IL10 inibindo a citocina IL6 (que uma
precursorade prostaglandinas inflamatórias), e aumento
da oxigenação dos tecidos mediante um aumento da
2,3DPGlicerase.
Ozonioterapia na Medicina Equina
Coluna Vertebral
- Doses: 5 cc [15 a 25 mcg ] / ponto
- Uso de agulhas de raquianestesia em diagonal com distribuição na 
musculatura
- Espaçamentos de 5 a 10 cm
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações paravertebrais em lombalgias
Aplicações na região da coluna guiadas por ultrasom
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações em lesões focais na região
paravertebral 
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações de PRP na coluna vertebral 
Coleta de Sangue para preparação do PRP
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações de PRP na Coluna Vertebral 
Infiltração para vertebral em área lesionada com PRP
Ozonioterapia na Medicina Equina
Coluna Vertebral
- Aplicações em animais com EPM sem 
pontos de lesão diagnosticados
- Aplicações nos Trigger Points
40
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações base da cauda
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações associadas ao PRP e Ácido Hialurônico
PRP + Ozônio
Ativação Plaquetária
Atuação sobre a formação de proagregantes como PGFe e 
Tromboxanos
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações associadas ao PRP e Ácido Hialurônico
PRP + Ozônio
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações associadas ao PRP e Ácido Hialurônico
PRP + Ozônio
Mistura Gás O2-O3 em mesmo volume 
Homogeinização lenta
Concentração: 50 mcg / ml, segundo 
Hernandez, 2013
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações associadas ao PRP e Ácido Hialurônico
Assepsia com Clorexidine Degermante 3 X Assepsia com Álcool 70 G 
Ozonioterapia na Medicina Equina
Aplicações associadas ao PRP e Ácido Hialurônico
Protocolo de assepsia pré-cirurgica para: 
- Aplicação Gás O2-O3 [ 20 mcg/ml ]
logo após o injeção IA de Ácido Hialurônico
sem associação de antibióticos
- Aplicação associada ao PRP fazendo a 
mistura Gás – PRP na seringa

Ozonioterapia na Medicina Equina
- Síndrome do Osso Navicular
- Dermatites e processos alérgicos
Ozonioterapia na Medicina Equina
Síndrome do Navicular
Ozonioterapia na Medicina Equina
Síndrome do Navicular
EXAME CLINICO
Ozonioterapia na Medicina Equina
Síndrome do Navicular
EXAME COM IMAGENS
Ozonioterapia na Medicina Equina
Síndrome do Navicular
EXAME COM IMAGENS
Ozonioterapia na Medicina Equina
Síndrome do Navicular
EXAME COM IMAGENS 
Ozonioterapia na Medicina Equina
Síndrome do Navicular
Infiltração da Bursa do Navicular com 3 cc de Ozônio [15 mcg ] 
Papiloma Vírus
Ozonioterapia na Medicina Equina
Dermatologia / Alergologia
Ozonioterapia na Medicina Equina
Dermatologia / Alergologia
Alergia de origem inespecífica
Tratamento com AHTM + IR (20mcg / ml ) 2 
x semana por 2 semanas
Ozonioterapia na Medicina Equina
Outras Aplicações
 TRATAMENTOS ESTÉTICOS:
Aplicações em baixíssimas doses – Efeito lipolítico
Insersão da cauda
Borda superior do pescoço
 ONCOLOGIA
 Problemas clínicos diversos:
Anemias
Doenças hepáticas
Doenças Renais
Ozonioterapia na Medicina Equina
FERIDAS
Ozonioterapia
- Redução no tempo de cicatrização e presença de 
citocinas anabólicas
- Maior fator de sucesso na clínica de equinos
- Uso de óleo ozonizado na grande maioria dos casos
- Associação de limpeza com SF Ozonizada e Bagging
- Facilidade de uso
- Baixo custo
Ozonioterapia
Tratamento de Feridas
8/6/16 8/7/16
Ozonioterapia
Tratamento de Feridas
37 dias →
Ozonioterapia
Tratamento de Feridas
Ozonioterapia
Tratamento de Feridas
Cortesia: Prof. Bruno Zambelli Loiacono
Ozonioterapia
Tratamento de Feridas
Cortesia: Prof. Bruno Zambelli Loiacono
Bagging
Ozonioterapia na Medicina Equina
Tratamentos de Pitioses
- Bagging 2 X / semana nas primeiras 2 semanas e 1 X nas semanas 3 e 4
- Clorexidine degermante + Óleo Ozonizado diário
- Bandagem protetora
- Triancinolona pós cirurgia 
Ozonioterapia na Medicina Equina
Tratamentos de Pitioses
Ozonioterapia na Medicina Equina
Tratamentos de Pitioses
ANTES OZONIOTERAPIA DEPOIS DA OZONIOTERAPIA
Ozonioterapia na Medicina Equina
Tratamentos de Pitioses
Ozonioterapia na Medicina Equina
Problemas com Pitium Vac
Abcesso pós aplicação da Pitium Vac
Ozonioterapia
Outras Aplicações
Ozone therapy in periodontics
G Gupta and B Mansi
J Med Life. 2012 February 22; 5(1): 59–67. 2015
Ozonioterapia na Odontologia
Ozonioterapia na Odontologia
Ozonioterapia
APLICAÇÕES NA 
REPRODUÇÃO EQUINA
Ozonioterapia na Reprodução Equina
• Endometrites Fungicas
• Endometries Bacterianas
• Endometrites Pós Cobertura
• Vaginites
• Funiculites
• Degeneração testicular
• Melhora na espermatogênese
Ozonioterapia na Reprodução Equina
• Pós cirurgico de vulvoplastias
• Retenções de Placentas
• Placentites
• Vesiculites
• Fístulas Reto-Vaginais
• Feridas no pênis e prepúcio
• Uretrites
Ozonioterapia na Reprodução Equina
• Protocolos mais recomendados?
• Doses / concentrações?
• Toxicidade?
60
Ozonioterapia na Reprodução Equina
• Experimentos em andamento:
- Efeito de diferentes concentrações
do gás O2-O3 na aplicação direta
sobre o endométrio
- Avaliação da eficiência do lavado
uterino com solução fisiológica
ozonizada no controle da EPC
Ozonioterapia na Reprodução Equina
• Experimentos em andamento:
• Efeitos de baixíssimas doses de gás O2-O3
em diferentes diluentes de sêmen
- Avaliação da qualidade do sêmen de
garanhões com e sem tratamento com
Ozonioterapia
Ozonioterapia na Reprodução Equina
• Experimentos em andamento:
- Uso de óleo ozonizado em éguas
receptoras negativas há 5 ou mais
inovulações nos últimos 3 anos.
Principais aplicações em reprodução equina: 
 Intra Uterina: Lavagem do utero com solução
fisiológica ozonizada ou água destilada ozonizada
 Infusão de 0,5 a 1 litro (dependendo da categoria do animal) 
com concentração 50Mcg/ml em 500 ml / 10 minutos
 Massagear e drenar
 Infudir nova solução ozonizada até total expansão do útero e 
deixar agir por 10 minutos
 Repetir por 3 dias
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Ozonioterapia na Reprodução Equina
- 10 minutos na SF
- Concentração 50 -67 mcg
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Infusão Uterina de SF Ozonizada
RESULTADOS PRÁTICOS
Lavagem do utero com solução fisiológica ozonizada
no tratamento de endometrites
 Resultados satisfatórios relatados por vários colegas
 Maior eficiência nas endometrites fungicas que 
bacterianas ( ? )
 Excelente alternativa para endometrites pós cobertura
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Principais aplicações de uso em reprodução equina: 
 Trans Retal :
 Aplicação intraretal simultânea a Infusão
Uterina para tratamento de endometrites.
 Aplicação visando a melhora na oxigenação de 
tecidos e ação antinflamatória.
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Ozonioterapia na Reprodução Equina
UTILIZAÇÃO DO GÁS O2 – O3 DIRETAMENTE NO 
ENDOMÉTRIO
- Praticidade
- Resultados na prática por quem usa em grande número 
de tratamentos
- Ponderações sobre necessidade de protocolos bem 
fundamentados
Publicações:
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Resultados do uso em Reprodução Equina:
 Receptoras que não ficaram gestantes pós 3 ou 4
inovulações com infusões uterinas de soro ozonizado, e
prenhês nas inovulações subsequentes ( inf pessoais estação monta
2015/16)
 Tratamento de matrizes velhas PSI problemáticas e
doadoras MM também idosas com histórico de LIU /
Endometritepós cobertura, com infusões 3 dias antes da
IA.
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Casos clínicos Dr Leandro Dantas
24 Éguas receptoras negativas a 5 ou mais inovulações
Cultura e antibiograma negativos
Todas tratadas com 50 ml de óleo ozonizado IU
Lavagem uterina no dia seguinte à aplicação com 10 –
12 litros de solução Ringer Lactato
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Óleo Ozonizado intra uterino
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Óleo Ozonizado intra uterino
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Casos clínicos Dr Leandro Dantas
Resultados:
Das 24 Éguas receptoras tratadas
13 foram inovuladas
9 gestações aos 12 e 30 dias
8 gestações aos 60 dias
Principais aplicações de uso em reprodução equina: 
 Trans Retal :
 Melhora na espermatogênese:
Aplicações em baixas concentrações visando a 
melhora na oxigenação dos testículos.
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Principais aplicações em reprodução equina: 
 Tratamentos pós orquiectomias seguidas de 
funiculites:
Aplicações diretas do gás O2-O3 nas fistulas 
de drenagem, 3 x / semana, 33 mcg, por 4 
semanas
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Resultados do uso em Reprodução Equina:
 Melhora na qualidade do sêmen de garanhões de
baixa qualidade seminal pós aplicação em baixas
concentrações via trans retal.
 ESTRESSE OXIDATIVO em Garanhões
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Resultados do uso em Reprodução Equina:
O estresse oxidativo esta correlacionado eventos fisiológicos como a
capacitação espermática, reação acrossomal, hiperativação e fusão do
espermatozoide com o oócito (BAUMBER et. al., 2000; GADELLA et. al., 2001),
RISCO: uso exagerado com altíssimas doses aumentando a concentração
de EROs, induz a peroxidação lipídica e proteica da membrana
plasmática, comprometendo a integridade espermática. IMPORTÂNCIA
DO USO DA OZONIOTERAPIA EM DOSES BAIXAS
Podem ocorrer danos à fita de DNA, resultando, assim, em efeitos
indesejados na função espermática (MORTE et.al., 2008).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Garanhões:
Estudos demonstraram que a peroxidação lipídica,
por EROS pode em alguns casos estar associada com
a diminuição da fertilidade (BAUMBER et al, 2000; BALL e VO, 2002)
Ocorre a fluidez da membrana plasmática e
compromete a fusão das membranas espermáticas,
durante a reação acrossomal (BALL, 2011)
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Garanhões:
Correlação negativa da lipoperoxidação com a
viabilidade espermática e com o potencial
mitocondrial sugerindo que a lipoperoxidação
influencia diretamente na crio-resistência do sêmen
de alguns garanhões, e também, entre ejaculados
dos mesmos (Ortega-Ferrusola et. al. 2009)
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo:
- Seja pela produção excessiva de espécies reativas de oxigênio
(EROs) ou por deficiência na função dos antioxidantes, o
desequilíbrio entre sua produção e neutralização caracteriza o
estresse oxidativo (DIPLOCK, 1994).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo:
- O estresse oxidativo está ligado a eventos fisiológicos como a
capacitação espermática, reação acrossomal, hiperativação e
fusão do espermatozoide com o oócito (BAUMBER et. al., 2000;
GADELLA et. al., 2001), o aumento excessivo da concentração
de EROs, induz a peroxidação lipídica e proteica da membrana
plasmática, o que compromete a integridade espermática,
trazendo consequências e danos à fita de DNA, resultando,
assim, em efeitos indesejados na função espermática (MORTE
et.al., 2008).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo:
- Estudos demonstraram que as EROs atuam promovendo a
peroxidação lipídica, além de estar associada com a diminuição
da fertilidade (BAUMBER et al, 2000; BALL e VO, 2002), visto
que a peroxidação altera a fluidez da membrana plasmática e
compromete a fusão das membranas espermáticas, durante a
reação acrossomal (BALL, 2011).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo:
- Ortega-Ferrusola et. al. (2009) observaram uma correlação
negativa da lipoperoxidação com a viabilidade espermática , e
com o potencial mitocondrial, sugerindo que a lipoperoxidação
influencia diretamente na crio-resistência do sêmen de alguns
garanhões, e também, entre ejaculados dos mesmos.
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
EROs ( Espécies Reativas de Oxigênio )
- Moléculas e/ou átomos derivados do metabolismo oxidativo,
apresentam alta instabilidade devido a presença de elétrons
desemparelhados, o que faz com que sejam extremamente
reativas e atuem tanto como agente oxidante (sequestrando
elétrons), ou como agente redutor (doando elétrons)
(HALLIWELL 1991; MARLIN et al., 2002; AGARWAL et al., 2005;
MAKKER et al. 2009).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
EROs ( Espécies Reativas de Oxigênio )
- A principal fonte de produção de EROs no sêmen dos mamíferos esta
relacionada à cadeia de transporte de elétrons nas mitocôndrias (BALL et al.,
2001; KOPPERS et al., 2008; ORTEGA-FERRUSOLA et al., 2009; PEÑA et al.,
2011), sendo esta a responsável pela fosforilação oxidativa e produção de
maior parte da energia fornecida às células (BLIER et al., 2001). À partir de
reações oxido-redução, uma molécula de oxigênio é reduzida e origina uma
molécula de água e energia na forma de ATP. Essa reação pode gerar
intermediários reativos acarretando na formação das EROs (DOWNLING e
SIMMONS, 2009; MAIA, M. e BICUDO, S., 2009).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
EROs ( Espécies Reativas de Oxigênio )
- Dentre os intermediários reativos originados do metabolismo
energético destaca-se o radical superóxido (O2-), o radical
hidroxila (OH-) e o peróxido de hidrogênio (H2O2) como os
principais envolvidos no estresse oxidativo das células
espermáticas (HALLIWELL, 1989; FERREIRA e MATSUBARA,
1997; BAUMBER et al., 2000; BILODEAU et al, 2001; BURNAUGH
et al., 2007; BURNAUGH et al., 2010).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
EROs ( Espécies Reativas de Oxigênio )
PERÓXIDO DE HIDROGÊNIO
- Não é um radical livre e sim um metabólito intermediário do
oxigênio, que sob a ação da catalisação de íons Fe2+ ou Cu2+, é
transformado pela reação Fenton e resulta na formação do radical
hidroxila (OH-). É considerado altamente reativo e deletério,
apresenta tempo de meia-vida longo e é capaz de transpassar
membranas biológicas (BALL et al., 2001; BURNAUGH et al., 2007;
OTT et al., 2007; PEÑA et al., 2011; FERREIRA e MATSUBARA, 1997;
NORDBERG e ARNÉR, 2001; MAIA,
2006).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
EROs ( Espécies Reativas de Oxigênio )
RADICAL HIDROXILA ( OH-)
- Considerado o mais reativo das EROs, o radical hidroxila (OH-), é
produzido a partir da reação de Fenton, catalisada por íons Fe2+ ou Cu2+
(FERREIRA e MATSUBARA, 1997; NORDBERG e ARNÉR, 2001; MAIA, 2006;). É
capaz de desencadear a reação de peroxidação lipídica da membrana
plasmática pela retirada de um átomo de hidrogênio dos ácidograxos poli-
insaturados danificando-a e comprometendo sua função. Além disso,
quando produzida próximo à molécula de DNA causa danos estruturais e
funcionais à cromatina (MAIA e BICUDO, 2009; SILVA e GUERRA, 2010;
FERREIRA e MATSUBARA, 1997; NORDBERG e ARNÉR, 2001).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
EROs ( Espécies Reativas de Oxigênio )
RADICAL HIDROXILA ( OH-)
- Ao reagir com as EROS, as duplas ligações presentes nos ácidos graxos
poli-insaturados da membrana plasmática sofrem uma reação em cadeia de
peroxidação lipídica, levando a diminuição da permeabilidade dessa membrana
e, consequentemente, à perda da função espermática (AITKEN e KRAUSZ,
2001). Baumberet al (2000) averiguaram que a motilidade espermática pode
decair antes mesmo de se detectar a lipoperoxidação, sugerindo que as EROs
influenciam a cinética espermática independente da peroxidação lipídica, muito
provavelmente pela alteração da função mitocondrial (BAUMBER et al., 2003).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
EROs ( Espécies Reativas de Oxigênio )
RADICAL HIDROXILA ( OH-)
- No processo de criopreservação ocorrem danos na membrana plasmática
dos espermatozoides, e na presença de células criolesadas, não viáveis e/ou
com defeitos morfológicos, como gota citoplasmática proximal ou defeitos
na peça intermediária, há um aumento na formação de EROs e
consequentemente do estresse oxidativo (BALL et al., 2001), que por ser
considerado a principal causa de fragmentação do DNA espermático
(SAKKAS e ALVAREZ, 2010), eleva os níveis basais de danos no DNA, que
podem atingir até 50% após 6 horas de incubação a 37°C (LÓPEZ-FERNÁNDEZ
et. al, 2007), comprometendo de forma significativa a fertilidade (TESARIK et
al., 2004).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
EROs ( Espécies Reativas de Oxigênio )
RADICAL HIDROXILA ( OH-)
- Ball (2008) observou que outra importante alteração derivada do
processo de criopreservação são os efeitos deletérios causados às
mitocôndrias, evidenciado pela alta prevalência de edema de peça
intermediária no momento pós-descongelação, o que pode levar a um
metabolismo oxidativo anormal, a formação excessiva de EROs e a
indução da apoptose.
Ozonioterapia na Reprodução Equina
ANTIOXIDANTES
ANTIOXIDANTES ENZIMÁTICOS:
- Superóxido dismutase (SOD)
- Catalase (CAT)
- Peroxirredoxinas (Prx)
- Glutationa (GSH)
- Glutationa redutase (GR)
- Glutationa peroxidase (GPx).
- Já os antioxidantes não enzimáticos ou sintéticos são adquiridos pela dieta,
apresentam baixo peso molecular e incluem o ácido ascórbico (Vitamina C),
ácido α-lipóico, o tocoferol (Vitamina E), ubiquononas, taurinas, caroteno,
betacaroteno, selênio e zinco. (MAIA, 2006; FERREIRA e MATSUBARA, 1997).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
ANTIOXIDANTES
ANTIOXIDANTES NÃO ENZIMÁTICOS:
- Alguns são adquiridos pela dieta;
- Geralmente possuem baixo peso molecular;
- Ácido ascórbico (Vitamina C)
- Ácido α-lipóico
- Tocoferol (Vitamina E)
- Ubiquononas
- Taurinas, Albumina
- Piruvato e Lactato
- Caroteno e betacaroteno
- Selênio e Zinco
( adaptado de MAIA, 2006; FERREIRA e MATSUBARA, 1997; BAUMBER et al., 2000; AITKEN 2004; ).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
ANTIOXIDANTES
FUNÇÃO PRINCIPAL PARA REPRODUÇÃO GARANHÕES:
Manter as concentrações de EROs em níveis fisiológicos, prevenindo a
ocorrência de danos celulares.
PROBLEMAS QUE LEVAM A SUA DEFICIÊNCIA:
Redução na concentração de antioxidantes, acarreta em um aumento das EROs, do
estresse oxidativo e um consequente aumento no dano celular (BAUMBER et
al., 2000; AITKEN 2004).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
IMPORTÂNCIA NA INFERTILIDADE MASCULINA
- Características importantes do dano oxidativo:
1) Ocorrência da catalisação da cascata da peroxidação por
metais de transição, como ferro e cobre, presentes encontrados
no plasma seminal em quantidade suficiente para catalisar esta
reação.
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
IMPORTÂNCIA NA INFERTILIDADE MASCULINA
- Características importantes do dano oxidativo:
2) Presença de antioxidantes nas secreções do trato
reprodutivo, incluindo enzimas protetoras secretadas no espaço
extracelular, como, por exemplo, a GPx e a SOD, produzidos na
cabeça e cauda do epidídimo, respectivamente (VERNET et al.,
1996 e 1997).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
IMPORTÂNCIA NA INFERTILIDADE MASCULINA
Os espermatozóides apresentam baixa capacidade de
resistir ao estresse oxidativo (AITKEN,1994; NICHI et al., 2006). Por isto
se tornam dependentes de substâncias antioxidantes.
Elas podem estar tanto no plasma seminal como nos
(BAUMBER et al 2005) diluentes, objetivando minimizar os
efeitos deletérios das EROs. (CRESPILHO et al, 2014; BAUMBER et al., 2002 e
2003; AITKEN & CLARKSON, 1988).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Estresse Oxidativo: 
IMPORTÂNCIA NA INFERTILIDADE MASCULINA
O plasma seminal dos equinos apresenta alta capacidade
neutralizadora das EROs e correlacionada à diluição e remoção
do plasma seminal durante a criopreservação (BALL et al., 2001; BALL, 2008).
Precisamos retirar o plasma para criopreservar . . .
Mas tornarmos os espermatozoides mais suceptíveis ao
estresse oxidativo (BAUMBER et al., 2005).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Oxidação Lipoperoxidação da membrana

Subprodutos Tóxicos*

Falha da Inativação

Interferência na MT e viabilidade Sptz
* Radical peroxil, o malondialdeido (MDA) e o 4-hidroxinonenol
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Fragmentação do DNA Espermático
Danos na cromatina e integridade do DNA dos SPTZs
influenciam a fertilidade masculina. ( AGARWAL & SAID, 2003).
Origem multifatorial sendo a presença de EROs e ocorrências de
Apoptoses 2 importantes fatores (KODAMA et al, 1997; SUN et al, 1997; AITKEN et al,
1998; LOPES et al, 1998; IRVINE et al, 2000; AITKEN e KRAUSZ, 2001; MOUSTAFA et al, 2004;; DE AMBROGI et
al, 2006, 2005; GOSÁLVEZ et al, 2006).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Fragmentação do DNA Espermático
Aumento da concentração de EROs

Aumento da peroxidação lipídica e proteica de membrana
(plasmática e acrossomal) 

Comprometimento da integridade de membrana

Desnaturação da fita de DNA 
( MORTE et.al., 2008).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Integridade da Cromatina x Viabilidade embrionária
Acreditava-se que a mortalidade embrionária nas espécies
mamíferas fosse resultante de fatores relacionados com a
infertilidade feminina (D’OCCHIO et al, 2007).
Realidade: existem importantes evidências que correlacionam à
integridade da cromatina espermática, não só com a
fertilização, mas também com o desenvolvimento embrionário
(MORRIS et al, 2002; WARD et al, 2000; D’OCCHIO et al, 2007).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Integridade da Cromatina
A avaliação da estrutura da cromatina espermática tem
mostrado uma boa correlação com a fertilidade em diversas
espécies e foi comprovada em garanhões. (LOVE e KENNEY, 1998; FARRÁS,
2012),
Espermatozoides de indivíduos com baixa fertilidade
apresentaram uma maior desnaturação da cromatina que os
espermatozoides de machos de alta fertilidade (GILLAN et.al., 2005; FARRÁS,
2012).
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Integridade da Cromatina
Love (2005) demonstrou que a qualidade da cromatina pode
decair mesmo com a manutenção de bons padrões de
motilidade espermática.
Ahmadi e Ng (1999) perceberam que ejaculados contendo
espermatozoides com DNA comprometido, parecem ter
amesma capacidade de fertilizar oócitos quanto
espermatozoides normais.
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Técnicas de detecção da Integridade da Cromatina Espermática
Técnicas 1:
SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay);
COMETA (Single-cell gel electrophoresis-SCGE);
SCDtest (Teste de Dispersão da Cromatina Espermática)
Medem a capacidade da cromatina e do DNA em sofrer
desnaturação diante de vários tratamentos
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Tecnicas de detecção da Integridade da Cromatina Espermática
Técnicas 2:
TUNEL
ISNT (In Situ Nick Translation)
Uso de marcadores, incorporando moléculas nos locais de
quebra do DNA, facilitando a sua determinação
(GOSÁLVEZ et al, 2006)
Ozonioterapia na Reprodução Equina
Ozonioterapia como coadjuvante
na Fisiologia do Exercício
Cortesia: Dra Manoela Marques
Ozonioterapia como coadjuvante
na Fisiologiado Exercício
EXPERIMENTO EM ANDAMENTO
- Objetivo: Determinar a importância da Ozonioterapia para animais de 
concurso de marcha 
- 16 animais da Raça Mangalarga Marchador – Haras Zel – Ouro Fino – MG
- Animais no exercitador mecânico 5 dias da semana, 30 minutos
- Montados em dias alternados por 10 – 15 min
- 1 X mês submetidos a simulação de prova de 50 minutos de duração
- Supervisão e execução: Dr Pedro Costa e equipe
80
Ozonioterapia como coadjuvante
na Fisiologia do Exercício
EXPERIMENTO EM ANDAMENTO
AVALIAÇÕES:
- Hemograma
- Frequência cardíaca
- Lactato Desidrogenase ( LDH )
- Aspartato Transaminase ( AST )
- Creatina Kinase ( CK )
- Gama Glutamil Transferase ( GGT ) 
- Glicose
Ozonioterapia como coadjuvante
na Fisiologia do Exercício
Ozonioterapia como coadjuvante
na Fisiologia do Exercício
Ozonioterapia como coadjuvante
na Fisiologia do Exercício
Atuação dos peróxidos sobre a oxiemoglobina, liberando
oxigênio e, consequentemente, aumentando sua
biodisponibilidade para a contração muscular. Além das
ações antiálgicas e anti-inflamatórias (Hernández e González,
2001).
Após penetrar no organismo, o ozônio é capaz de
melhorar a oxigenação e, consequentemente, o
metabolismo corporal (Recio del Pino et al., 1999).
Ozonioterapia como coadjuvante
na Fisiologia do Exercício
Tratamentos com aplicações de AHTM a cada 3 dias
promoveram a diminuição dos efeitos negativos do
metabolismo aeróbico / anaeróbico em condições
de máximo esforço em animais de corrida
(Scrollavezza et al., 1997).
Ozônio na esterilização de
materiais e equipamentos
Uso do ozônio na esterilização
de materiais e equipamentos
Ozonioterapia
Uso do ozônio na esterilização de materiais e 
equipamentos:
- Experimento comparando o cloro com o
ozônio como agentes desinfectantes, observou-
se que ambos destroem, neutralizam e inibem a 
maioria dos organismos patogênicos (Kroll et al, 
1995).
- Possui ação oxidativa sobre poluentes
orgânicos e inorgânicos ( Torres et al, 1996)
Uso do ozônio na esterilização de materiais e 
equipamentos:
- 2 diferentes experimentos mostram sua
efetividade entre 6,0-8,5 (Garcia,2014) e 5,6-9,8 (Greene 
et al., 1993).
- O ozônio ataca a membrana plasmática de 
bactérias pelos glicolipídeos ou aminoácidos como o 
triptofano e atua sobre grupos sulfidrilas de certas
enzimas interompendo a atividade enzimática de 
bactérias (Garcia,2014) .
Ozonioterapia
Ozonioterapia
Uso do ozônio na esterilização de materiais e 
equipamentos:
- Experimento comparando a eficiência da 
estufa a seco x ozônio em fios de sutura de 
algodão observou-se maior eficiência para o 
O3 (Garcia, 2014). 
- Comparando-se o formol pastilhas x ozônio na
esterilização de materiais cirúrgicos possuem a 
mesma eficiência.
Ozonioterapia
Concentração de O3 nas seringas plásticas:
Após 40 minutos

Temperatura 
(20C) 
Ozonioterapia
Formas de aplicação:
 Auto Hemoterapia menor
 Auto Hemoterapia maior
 Transretal
 Intravaginal
 Transcutânea (óleo tópico)
 Transcutânea – Bagging com gás
 Subcutânea
 Intrarticular
Ozonioterapia
Formas de aplicação:
 Intramuscular
 Fístulas dentárias ou temporo mandibulares
 Intraósseo
 Intradiscal
 Pós drenagem de abcessos
 Intrauterina
 Intratesticular ou peritesticular
Ozonioterapia
Ponderações e riscos com uso de ozônio:
 Baixíssimo custo de produção
 Alta eficiência
 Possibilidade de uso a campo 
 Diversidade de usos
 Equipamentos de custo acessível
Ozonioterapia
Lembrando que:
O Ozônio não é mágico . . .
Apenas muito eficiente .
Com baixíssimo custo! 
É FUNDAMENTAL AVALIAR SUAS 
APLICAÇÕES EM CADA CASO CLÍNICO
E utilizá-lo com responsabilidade !
Ozonioterapia
Homenagem a D. Maria Helena Macedo Leal
Minha mãe em quem fiz diversas aplicações de Ozônio

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