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Leucograma Adpatações Rômulo Negreiros • Contagem dos leucócitos totais Câmara de contagem de células Automação • Contagem diferencial relativa Contagem de no mínimo 100 leucócitos diferenciando pelo tipo de leucócito (um a um). • Contagem diferencial absoluta Com o número de leucócitos totais e as porcentagens de cada célula obtidas na contagem diferencial é possível calcular o número absoluto de cada um dos leucócitos Contagem diferencial relativa • Contagem de no mínimo 100 leucócitos diferenciando pelo tipo de células • Se houver leucocitose (contagem global de leucócitos > 10 .103/uL) deve-se contar na contagem diferencial maior número de células (200 ou 500). Para identificar cada um dos leucócito, utilize os seguintes critérios morfológicos: • Tamanho da célula • Razão núcleo/citoplasma • Características do citoplasma (cor, presença ou ausência de grânulos, cor e tamanho dos grânulos) • Características do núcleo (forma, cor, padrão de cromatina, presença e ausência de nucléolo) Os leucócitos podem ser classificados Granulações no citoplasma • Granulócitos (neutrófilos, eosinófilos e basófilos) • Agranulócitos (monócitos e linfócitos) Segmentação do núcleo • Polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos e basófilos) • Mononucleares (monócitos e linfócitos) De acordo com a função • Fagócitos (neutrófilos, eosinófilos, basófilos e monócitos) • Imunócitos (linfócitos) Contagem relativa dos leucócitos É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula. Contagem relativa dos leucócitos • É realizada através da análise morfológica dos leucócitos, contando no mínimo 100 leucócitos, diferenciando célula a célula. Contagem dos leucócitos totais Valores de referência: 5,0 a 11,0 x 103/uL ou 4,0 a 11,0 x 103/uL - Leucocitose = leucócitos totais > 11,0 x 103 /uL - Leucopenia = leucócitos totais < 4,0 x 103/uL Neutrófilos • É o leucócito mais frequente no sangue periférico do adulto • Apresenta vários estágios de maturação (mieloblastos, promielócitos, mielócitos, metamielócitos, neutrófilos bastonetes e neutrófilos segmentados) • A meia vida dos neutrófilos desde a fase de mieloblasto até a morte é de 9 a 10 dias • No sangue periférico são encontrados, fisiologicamente, poucos neutrófilos bastonetes ( 2 a 5%) e grande frequência ( 50 a 60%) são neutrófilos segmentados • No sangue do adulto é o leucócito mais predominante (40-70%) • Alto poder de fagocitose • Primeira linha de defesa contra microorganismos • Vida-média curta na circulação sanguínea (6 horas) • Pool de neutrófilos: Medula Óssea, Circulação Sanguínea e Tecidos NEUTROFILO • Núcleo - polimórfico - 2-5 lóbulos - cromatina condensada de coloração púrpura • Citoplasma - ligeiramente acidófilo - granulações abundantes, finas e de coloração rósea • Tamanho: 12-15 µm FUNÇÃO • Quimiotaxia Citocinas Monocinas Toxinas bacterianas Células e tecidos necrosados • Diapedese Selectinas e integrinas Moléculas de adesão intercelular (ICAM) • Comunicação com outras células Recrutamento de células para o local da infecção Fagocitose • Degranulação ou açãoenzimática; • Geração de radicais oxidantes • Queda do pH no interior do fagossoma. Fagocitose 1) Reconhecimento e fixação da partícula 2) Engolfamento 3) Destruição ou degradação Mecanismos dependentes de O2 (O2- e MPO) Lizozima, lactoferrina, proteína básica principal Em condições de estresse e em processos reacionais • O tempo de maturação pode ser diminuído • O número de divisões podem ser abolidas • As células podem ser liberadas no sangue periférico precocemente Em processo infecciosos O tempo decorrido do estágio de mielócito a neutrófilo segmentado no sangue periférico pode ser reduzido a 48 horas CINETICA DOS LEUCOCITOS • Os neutrófilos circulam no sangue periférico cerca de 6 a 10 horas • Aproximadamente a metade da quantidade de neutrófilos presentes no sangue periférico estão marginados • Mudanças na posição de marginados para circulantes podem ocorrer em condições de estresse, exercícios físicos ou após a administração de adrenalina, levando a leucocitose transitória • A taxa de produção de neutrófilos é de 1,63 x 109 células/ kg de peso corpóreo. Esta produção pode aumentar dramaticamente frente a um estímulo inflamatório Neutrofilia é a condição na qual uma pessoa possui no sangue um número aumentado de granulócitos neutrófilos (um tipo de glóbulos brancos). Número de neutrófilos > 8.000 /uL (contagem absoluta desta célula no hemograma) Número de neutrófilos < 2.000/ul Intensidade da neutropenia: • Discreta: 1.000 a 2.000 neutrófilos/uL de sangue • Moderada: 500 a 1.000 neutrófilos/uL de sangue • Grave: < 500 neutrófilos/uL de sangue Neutropenia é às vezes chamada (erroneamente) de leucopenia ("déficite de células brancas no sangue"), devido aos neutrófilos serem as células brancas mais abundantes no sangue, mas neutropenia é considerada um subtipo de leucopenia como um todo • Célula de 10-15µm • Granular, com afinidade por eosina • Originada a partir de cél. Hematopoética CD34+ • IL3, IL5 e GM-CSF são críticas para a estimulação da MO Para a sua produção • Essas citocinas também são produzidas por linfócitos T, CD4 e CD 8+ EOSINOFILOS Série Branca LEUCOGRAMA • Número total de glóbulos brancos e sua contagem diferencial no sangue periférico – Interpretação criteriosa – Baixa sensibilidade e especificidade – Considerar contexto clinico – Variação: Idade, sexo, raça, temperatura, doenças subjacentes, uso de medicamentos • Recém- nascido até 1º mês de vida → predomínio de neutrófilos • Raça negra – Redução 20% dos leucócitos totais. LEUCOGRAMA • Contagem Global de Leucócitos • Neutrófilos • Segmentados, bastões. • Metamielócitos, mielócitos, promielócitos, blastos. • Eosinófilos • Basófilos • Linfócitos • Monócitos • O “Desvio à Esquerda” VALORES DE REFERÊNCIA Leucócitos: 3600 – 11000/mm3 • Neutrófilos: 1500 – 7000 /mm3 (45-70%) • Linfócitos: 1000 – 4500 / mm3 (20-50%) • Eosinófilos: 50 – 600 /mm3 (1 – 6%) • Basófilos: 0 – 200 / mm3 (2 – 10%) • Monócitos: 100 – 1000 / mm3 (2 – 10%) NEUTRÓFILOS • Os Neutrófilos são os granulócitos mais comuns no sangue. (55-70% de todos os Leucócitos são Neutrófilos). • Eles tem núcleo segmentado, tipicamente com 2 a 5 lobos conectados entre si através de finas fitas de cromatina as quais podem ser difíceis de se ver. • A célula pode aparentar ser multinucleada. LEUCOCITOSES COM NEUTROFILIA Aumento dos Neutrofilos • Neutrofilia sem “desvio” • Stress, corticosteróides, infecções, atividade física, gravidez... • Neutrofilia com “desvio” • Presença de bastões ( >10%) • Presença de formas mais jovens (desvio • escalonado) • Neutrofilia com “desvio” • Sugere infecção, mas pode ocorrer em sangramentos agudos (Reação Leucoeritroblástica) ou em Doenças • Mieloproliferativas. • Pode ocorrer precocemente no curso de uma • infecção, ou tardiamente, com o paciente já em • recuperação ! AVALIAÇÃOCLÍNICA É • SOBERANA !!! EOSINOFILOS • Os Eosinófilos correrspondem a 2-5% do total de leucócitos, e são distinguíveis pelos seus grânulos acidofílicos (vermelho/laranja) proeminente contendo um componente conhecido como Proteína Básica Principal, a qual é tóxica para muitas larvas de parasitas. • O núcleo tem usualmente apenas 2 a 3 lobos. • As funções desse tipo de granulócito estão associadas com respostas alérgicas e defesa contra parasitas. Basófilos • Os Basófilos compreendem menos de 1% do total de leucócitos,e são distinguidos pelos grânulos azul escuro específicos proeminentes que contém histamina, heparina e outros componentes. • O núcleo está usualmente obscurecido pelo densidade dos grânulos. • Os Basófilos estão associados com a resposta imune inata a antígenos externos, assim como na ocorrência de asma e anafilaxias. MONOCITOS • Os Monócitos são as maiores células vistas no esfregaço sanguíneo e constitue5 a 8% dos leucócitos. Seu núcleo não é multilobular como os granulócitos,mas pode ser em forma de “U” com cromatina aparentemente reticular. • O citoplasma dos monócitos contém numerosos grânulos lisossomais os quais dão a ele uma aparência acinzentada de vidro fosco. • Os Monócitos saem eventualmente da corrente sanguínea e se tornam macrófagos tissulares, os quais são responsáveis pela remoção de ‘debris’ assim como pela defesa contra certos tipos de invasores Leucograma • O linfócito é uma célula arredondada ou ovalada com um núcleo oval ou em forma de rim que ocupa a maior parte da célula. • O nucléolo pode estar presente mas a cromatina densa impede a distinção. Possui um diâmetro de 6 a 16 micrômetros. • Normalmente são menores que os monócitos. Os linfócitos desempenham inúmeros papéis na resposta imune adquirida. Leucograma •Linfócito •Neutrófilo •Eosionófilo •Monócito Leucograma Leucograma: Limites de referência (ambos os sexos) Idade cordão 10 dias 2 anos % por l % por l % por l Leucócitos 6000 a 24000 6000 a 16000 5000 a 14000 Neutrófilos 40 a 70 4000 a 14000 20 a 50 2000 a 6000 20 a 40 1000 a 4000 Linfócitos 20 a 40 3000 a 6000 40 a 70 3000 a 10000 50 a 80 3000 a 10000 Monócitos 2 a 8 400 a 1500 2 a 8 200 a 1200 2 a 10 100 a 1000 Eosinófilos 1 a 6 100 a 1200 0 a 7 0 a 800 0 a 7 0 a 700 Basófilos 0 a 2 0 a 400 0 a 3 0 a 300 0 a 3 0 a 300 Idade 5 anos 10 anos Adultos caucasóides % por l % por l % por l Leucócitos 4000 a 14000 4000 a 12000 3600 a 11000 Neutrófilos 20 a 60 1000 a 6000 30 a 60 1400 a 6000 45 a 70 1500 a 7000 Linfócitos 40 a 70 2000 a 8000 30 a 60 1600 a 6000 20 a 50 1000 a 4500 Monócitos 2 a 10 100 a 1000 2 a 10 100 a 1000 2 a 10 100 a 1000 Eosinófilos 0 a 7 0 a 700 0 a 7 0 a 700 0 a 7 0 a 700 Basófilos 0 a 3 0 a 300 0 a 3 0 a 300 0 a 3 0 a 200 Leucograma 1 ) Contagem de Leucócitos A Contagem de Leucócitos na verdade não é um parâmetro de avaliação, pois representa o somatório das contagens de granulócitos, linfócitos e monócitos por unidade de volume do sangue total. Existem normalmente entre 4000 e 11000 leucócitos por microlitro no sangue humano. Leucograma 2) Granulócitos Incluem neutrófilos (bandas e segmentos), eosinófilos e basófilos. Na avaliação numérica das aberrações dessas células (e em qualquer dos outros leucócitos), primeiro deve-se determinar a contagem absoluta por multiplicação do valor percentual da célula pelo total de leucócitos. Por exemplo, 2% de basófilos em 6.000/L de Leucócitos totais, resulta em 120 basófilos por L, o que é normal. Entretanto, 2% de basófilos em 75000/L resulta em 1500 basófilos por L, o que é grosseiramente anormal e estabelece o diagnóstico de Leucemia Mielóide Crônica. Leucograma A) Neutrófilos- Neutrofilia Avaliação Laboratorial: A contagem absoluta de neutrófilos está maior que 6.5X109/L(>25000/L). Causas: Produção e liberação aumentada da medula óssea em conseqüência de desordens como infecções bacterianas, lesões agudas, leucemias ou necrose celular. O número aumentado é normalmente acompanhado por um "deslocamento para esquerda" indicando uma liberação de granulócitos imaturos da medula óssea. Mal distribuição entre os "pools" marginais e circulantes em consequência de desordens físicas ou estresse emocional. Fumantes tendem a ter uma contagem de granulócitos maior que os não fumantes. Leucograma Neutropenia Avaliação Laboratorial: a contagem absoluta de Neutrófilos está menor que 1.5X109/L. Causas: Diminuição da produção pela medula óssea em consequência de desordens como Anemia de Falconi, Anemia Aplástica, Lesão tóxica ou Anemia Perniciosa. Bloqueio da liberação da medula óssea em consequência de desordens como neutropenia cíclica ou agranulocitose. Aumento da destruição na circulação periférica em consequência de desordens como esplenomegalia, neutropenia neonatal isoimune ou por certas infecções, incluindo febre tifóide, brucelose e malária. Mal distribuição entre os "pools" circulantes e marginais em conseqüência de desordens como viremias, diálise ou descanso prolongado em leitos. Leucograma B) Eosinófilos Eosinofilia - Avaliação Laboratorial: A contagem direta de eosinófilos está maior que 0.7X10 9 /L. Causas: Aumento na produção pela medula óssea em conseqüência de desordens alérgicas, infestações parasitárias, certos tumores malignos. Outras causas incluem febre escarlate, artrite reumatóide, febre reumática aguda, sarcoidose, tuberculose e fumo. Leucograma Eosinopenia - Avaliação Laboratorial: Contagem direta de eosinófilos menor que 0.05X10 9 /L. Causas: Diminuição na produção da medula óssea em conseqüência de condições similares as que causam neutropenia. Além dessas, a administração de hormônio adrenocorticotrófico (ACTH) resulta em contagem diminuídas em indivíduos normais. Certas drogas também produzem eosinopenia como corticosteróides, adrenalina, niacina, niacinamida e procainamida. Leucograma C) Basófilos Basofilia - Avaliação Laboratorial: A contagem direta de basófilos maior que 0.3X10 9 /L. Causas: Aumento da produção da medula óssea em conseqüência de desordens como hipersensibilidades ou doenças mieloproliferativas. Estrógenos, drogas anti- tireóide e desipramina podem também aumentar os basófilos. Leucograma Basopenia - Avaliação Laboratorial: As contagens de diminuição de basófilos são difíceis de determinar visto que os valores normais são muito baixos. Causas: Diminuição da produção pode ocorrer durante o estresse e infecções. Não é geralmente um problema clínico. Leucograma 2- Monócitos Monocitose Avaliação Laboratorial: A contagem absoluta de monócitos está maior que 0.9X10 9 /L. Causas: Aumento da produção e liberação da medula óssea em conseqüência de distúrbios como tuberculose, infecções bacterianas e parasitárias crônicas, estados mieloproliferativos, após quimioterapia e em anemias hemolíticas. É característico de inflamações granulomatosas crônicas. Envenenamento por fósforo e tetracloretano, assim como administração de haloperidol, pode causar monocitose. Leucograma Monocitopenia Avaliação Laboratorial: a contagem absoluta de monócitos está menor que 0.2X10 9 /L Causas: Infecções extremamente graves e administração de glicocorticóides pode produzir uma diminuição de monócitos. Leucograma - Linfócitos Linfocitose Avaliação Laboratorial: Contagem absoluta de linfócitos maior que 4,5X10 9 /L Causas: É encontrado na mononucleose infecciosa, hepatites virais,infecções por citomegalovírus, outras infecções virais, Coqueluche, Toxoplasmose, Brucelose, Tuberculose, Sífilis, Leucemias linfocíticas e envenenamento por arsênico e tetracloretano. A contagem de linfócitos maduros maior que 7000/L é num indivíduo após os 50 anos muito sugestivo de Leucemia linfocítica crônica. Certas drogas aumentam a contagem de linfócitos incluindo ácido aminosalicíclico, griseofulvina, haloperidol, levodopa, niacinamida e fenitoina. Leucograma Linfopenia Avaliação Laboratorial: Contagem absoluta de linfócitos menor que 1.2X10 9 /L. Na SIDA o número de linfócitos T CD4 está permanentemente diminuído. Causas: É característico da SIDA. É também encontrado em infecções agudas, doença de Hodgkin, Lupus Eritematoso Sistêmico, Insuficiência Renal, Carcinomatose e em administração de corticosteróides, lítio, niacina e radiações ionizantes. De todas as células hematopoéticas, os linfócitos são as mais sensíveis à irradiação.
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