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21/03/2016 1 • Morte de uma população microbiana * Conceito de morte em Microbiologia * Percepção da morte • Inibição do Crescimento * controle dos microrganismos, limitando o seu crescimento MÉTODOS DE CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO - Esterilização – morte ou eliminação de todos os organismos viáveis e esporos presentes em um meio de cultura - Descontaminação – tratamento de um objeto ou superfície de modo a torná-los seguros à manipulação - Desinfecção – direcionada contra os patógenos, embora possa não eliminar todos os microrganismos 21/03/2016 2 • Esterilização pelo calor – gera desnaturação de proteínas e enzimas – Calor úmido • Água fervente (100 ºC) - células viáveis x esporos • Sob pressão (autoclavagem) – 121 °C a 1,1 kg cm-2 • rápido aquecimento • grande penetração CONTROLE POR AGENTES FÍSICOS Efeito da temperatura na viabilidade de uma bactéria mesofílica Fonte: Madigan et al., 2004. Microbiologia de Brock Medida da Esterilização pelo Calor 21/03/2016 3 Fonte: Madigan et al., 2004. Microbiologia de Brock Relação Entre Temperatura e Tempo de Morte em Mesófilos e Termófilos Mesófilos Termófilos Fonte: Madigan et al., 2004. Microbiologia de Brock Autoclave 21/03/2016 4 Ciclo Típico de Autoclavagem Fonte: Madigan et al., 2004. Microbiologia de Brock – Calor Seco • Oxidação dos constituintes orgânicos • Menor eficiência do que o calor úmido • Incineração - eliminação de contaminantes e cadáveres • forno de Pasteur - 160ºC durante 2 h – Observação - Baixas Temperaturas • preservação de alimentos, drogas • inibição das reações metabólicas • redução da água disponível 21/03/2016 5 • Esterilização por radiação • Radiação ionizante • raios gama, raios-X, feixes de elétrons • Poderoso oxidante • alto poder de penetração • Radiação não ionizante • luz ultravioleta: 136 a 400 nm (** 260 nm) • excita os elétrons produzindo vários tipos de reação • DNA (mais afetado): dímeros de pirimidina • baixo poder de penetração 21/03/2016 6 Capela de fluxo laminar com uma fonte de radiação ultravioleta (lâmpada de vapor de mercúrio) utilizada para a descontaminação das superfícies internas • Esterilização por filtração • membranas de ésteres de celulose - 150 um de espessura, poros uniformes, diâmetro variável, descartáveis • filtros HEPA (high efficiency particulate air): acetato de celulose dobrado ao redor de folhas de alumínio: retenção 99% da matéria particulada 21/03/2016 7 Fonte: Madigan et al., 2004, 2010. Microbiologia de Brock Unidades de Membranas Filtrantes Descartáveis, Pré-Esterilizadas e Montadas • Agentes esterilizantes – Óxido de etileno – ativo contra células viáveis e endósporos – alta penetração, mas necessita longa exposição – líquido abaixo de 10,8ºC, acima disso é um gás – inativação das proteínas com H lábil (-SH, -NH) – Alquilantes – beta-propionolactona – Glutaraldeído – Formaldeído (formol) CONTROLE POR AGENTES QUÍMICOS 21/03/2016 8 • Desinfetantes • Fenóis • ácido carbólico - primeiro agente químico usado para o controle - Joseph Lister (1865) • solução a 5% mata células viáveis, mas não os endósporos • Álcoois • Desnaturação de proteínas - dissolvem os lipídeos da membrana • Etílico a 60-85%: mata células viáveis • Metanol: mais eficiente porém muito tóxico • Halogênios • Iodo e compostos relacionados • agente oxidante, combina-se com a tirosina, inativando proteínas • Cloro • formação de ácido hipocloroso liberando radicais de oxigênio • Metais pesados • chumbo, zinco, prata, cobre, mercúrio • combinam-se com proteínas, provocando sua inativação 21/03/2016 9 • Detergentes • desnaturação das membranas • Iônicos • Aniônicos - [C9H19COO]-Na+ (sabão) • Catiônicos: Cloreto de amônio • Não iônicos: octoxinol • agentes físicos – processos agressivos • agentes químicos – tóxicos • antissépticos moderados – uso tópico • antimicrobianos • classificados de acordo com • estrutura molecular • mecanismo de ação • espectro de atividade antimicrobiana • capacidade de eliminação AGENTES ANTIMICROBIANOS 21/03/2016 10 MECANISMOS DE AÇÃO DE AGENTES ANTIMICROBIANOS Principais alvos Parede celular Membrana plasmática Processos biossintéticos síntese de proteínas síntese de ácidos nucléicos • Sulfonamidas • Gerhard Dogmagk da Bayer (1935): teste com corantes orgânicos sintéticos contra estreptococos – Prontosil • Jacques Tréfouël: Sulfanilamida: análogo estrutural do PABA (ác. p-aminobenzóico) FÁRMACOS ANTIMICROBIANOS SINTÉTICOS 21/03/2016 11 • Agentes antimicrobianos produzidos por microrganismos a fim de inibir crescimento ou matar outros microrganismos ANTIBIÓTICOS 21/03/2016 12 Fonte: Madigan et al., 2010 Antibiograma 21/03/2016 13 Resistência a Antimicrobianos Fonte: Madigan et al., 2010. Microbiologia de Brock * * * Fonte: Madigan et al., 2010. Microbiologia de Brock Antifúngicos 21/03/2016 14 • Análogos de Nucleosídeos • AZT (Zidovudine) - bloqueia a síntese de DNA intermediário dos retrovírus • Aciclovir - inibe o alongamento do ácido nucleico viral • Neviparina: inibe a transcriptase reversa • Rifamicina: inibe a RNA polimerase Antivirais
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