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Prof. Msc Dênis Furtado BIOQUÍMICA FARMACÊUTICA: MEMBRANAS BIOLÓGICAS E TRANSPORTES ATRAVÉS DAS MEMBRANAS CURSO DE GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA HISTÓRICO Desde finais do século XIX que numerosos investigadores têm vindo a propor modelos para a estrutura e composição química da Membrana Plasmática. Overton, em 1895 estudou as taxas de penetração de mais de 500 compostos químicos em células animais e vegetais, chegando às seguintes conclusões: Apresentavam diferentes permeabilidades. Compostos solúveis em lipídios apresentam taxas de difusão superiores. As estruturas membranares eram destruídas quando sobre elas se fazia atuar solventes lipídicos. ESTRUTURA DA MEMBRANA PLASMÁTICA MODELO DO MOSAICO FLUIDO O Modelo do Mosaico fluido diz que as membranas biológicas são formadas por uma bicamada de lipídios, na qual estão inseridas diversas proteínas. Por isso dizemos que a membrana é LIPOPROTÉICA LIPO : diz respeito aos lipídeos presentes nas membranas PROTÉICA : diz respeito às proteínas presentes nas membranas. Mitocôndria: 20-25% Lipídios e 75-80% de proteínas. Bainha de Mielina: 75% de lipídios e 25% de proteínas. MEMBRANA PLASMÁTICA Principais funções: Delimitação do volume celular; Trocas entre a célula e o meio (permeabilidade seletiva); Manutenção de um potencial elétrico através da membrana; Reconhecimento e adesão celular; Ponto de fixação para enzimas e estruturas de sustentação. DELIMITAÇÃO DO VOLUME CELULAR E PERMEABILIDADE SELETIVA A Membrana Plasmática é a organela que delimita o limite externo das células eucariontes animais. Além disso é ela quem determina quais substâncias irão entrar ou sair das células, e em quais quantidade e velocidades isso vai acontecer. A essa função de seleção denominamos PERMEABILIDADE SELETIVA. Os mecanismos que determinam a permeabilidade seletiva são denominados mecanismos de transporte através da membrana. GLICOLIPÍDEOS Contém restos glicídicos; Cerebrosídeo: possui somente um resíduo de ose (glicose ou galactose); Gangliosídeos: até 7 resíduos de oses (síndrome de Tay-Sachs); Reserva nutritiva FOSFOLIPÍDIOS Radical PO4-3 em uma das extremidades (polar); Duas cadeias de ácidos graxos; Derivados do glicerol – fosfoglicerídeos. COLESTEROL Lipídio neutro; Somente em eucariontes; Concentração depende do tipo celular; Precursor dos sais biliares e dos hormônios esteróides; Maior taxa de colesterol na membrana, maior sua fluidez. LÍPIDEOS DE MEMBRANAS PROTEÍNAS MÓVEIS OU MIGRATÓRIAS: EXTRÍNSECAS E INTRÍNSECAS Interagem de forma fraca com a bicamada de lipídeos, podendo ser facilmente extraídas das membranas PROTEÍNAS ESTRUTURAIS OU FIXAS Interagem de forma bastante forte com a membrana, sendo de difícil extração Podem atravessar a bicamada mais de uma vez, chegando a formar canais de passagem através dela PROTEÍNAS DE MEMBRANAS PROTEÍNAS DE MAMBRANA FUNÇÕES DAS PROTEÍNAS NA MEMBRANA Transportadores de substâncias que não conseguiriam atravessar a bicamada Estruturas de ligação entre a célula e o meio extracelular (matriz), ou ainda entre a célula e estruturas do citoplasma (citoesqueleto) Receptores de substâncias do meio extracelular, desencadeando uma resposta intracelular (sinalização intracelular) Enzimas para diferentes reações químicas Antígenos que identificam que uma célula pertence a determinado organismo Porção de carbohidratos dos glicolipídeos e glicoproteínas, constituindo o glicocálix Nas membranas existem glicoproteínas e glicolipídeos. Estes são formados respectivamente por proteínas e lipídeos ligados a uma molécula de carboidrato. As glicoproteínas e glicolipídeos estão distribuídos nas membranas conforme pode ser observado na imagem a seguir. GLICÍDEOS DE MEMBRANAS IMPORTÂNCIA DO GLICOCÁLIX Proteção química e mecânica das superfícies celulares Reconhecimento e adesão celular Função enzimática Especificidade celular (Sistema ABO) } glicocálice COMPOSIÇÃO E PROPRIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS DOS COMPARTIMENTOS DOS ORGANISMOS SUPERIORES DISTRIBUIÇÃO DOS SAIS Nos líquidos corporais, quase todos os ácidos, bases e sais se apresentam como partículas carregadas de eletricidade, os íons, em virtude da elevada constante dielétrica da água. Os compostos que formam íons em solução são chamados eletrólitos. Os íons de importância fisiológica são Cátions: H+, Na+, K+, Ca++, Mg++ Ânions: OH-, HCO3-, Cl-, PO4-, HPO4-- , prot-) e SO4- 15 COMPOSIÇÃO E PROPRIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS DOS COMPARTIMENTOS DOS ORGANISMOS SUPERIORES 16 MECANISMOS DE TROCA DE SUBSTÂNCIAS ENTRE OS COMPARTIMENTOS MECANISMOS DE TROCA DE SUBSTÂNCIAS ENTRE OS COMPARTIMENTOS TRANSPORTE PASSIVO DIFUSÃO Simples Facilitada (proteínas carreadoras) e através de canais (proteínas de canal) OSMOSE FILTRAÇÃO TRANSPORTE ATIVO PRIMÁRIO SECUNDÁRIO TRANSPORTE VESICULAR ENDOCITOSE Pinocitose Fagocitose EXOCITOSE 18 TRANSPORTE PASSIVO Ocorre a favor do gradiente de concentração sem gasto de energia (ATP). DIFUSÃO SIMPLES Passagem de soluto do meio mais concentrado para o meio menos concentrado OSMOSE Passagem de solvente do meio menos concentrado em soluto para o meio mais concentrado em soluto. A hemácia perde água Hemólise Equilíbrio Crenação Retração Hemácia Solução Hipertônica Solução Isotônica Solução hipotônica A hemácia ganha água OSMOSE DESLOCAMENTO DA ÁGUA ATRAVÉS DA MEMBRANA MEC MIC NORMAL MEIO HIPERTÔNICO MEIO HIPOTÔNICO SOLUTO SOLVENTE CRENAÇÃO - PLASMÓLISE HEMÓLISE - PLASMOPTÍSE MEIO HIPERTÔNICO COM ALTA CONCENTRAÇÃO MEIO HIPOTÔNICO COM BAIXA CONCENTRAÇÃO MEIO ISOTÔNICO COM CONCENTRAÇÃO IGUAL MEIO ISOTÔNICO MEC MIC MEC MIC DIFUSÃO FACILITADA Passagem de macromoléculas por proteínas carreadoras denominadas PERMEASES e por CANAIS PROTÉICOS. FILTRAÇÃO Processo de transferência de substâncias através de uma membrana por meio de um gradiente de pressão hidrostática. A natureza da membrana, ou seja, o diâmetro dos seus poros, é quem determina quais as partículas que poderão ou não atravessá-las. A filtração constitui um importante mecanismo de troca de substâncias entre os compartimentos intravascular e intersticial através das paredes dos capilares. Normalmente, a membrana dos capilares é amplamente permeável à água e pequenas moléculas e impermeável às macromoléculas como as proteínas e os polissacarídeos. 25 TRANSPORTE ATIVO Possibilita o transporte de solutos através da membrana contra seus gradientes eletroquímicos. É sempre mediado por proteínas carreadoras. Tem gasto de energia. Transporte ativo primário: Utiliza diretamente a energia obtida a partir da hidrólise do ATP, ou de qualquer outra fonte de energia metabólica (glicose). Transporte ativo secundário: Energia deriva secundariamente, da que foi armazenada, geradas inicialmente pelo transporte ativo primário. PROTEÍNAS CARREADORAS Ligam-se a um soluto específico a ser transportado e sofrem mudanças conformacionais, que possibilitam a transferência do soluto através da membrana. Podem ser acopladas a uma fonte de energia para catalisar o transporte ativo Uniportadora Transportam um único soluto de um lado a outro da membrana Transportadores acoplado O transporte de um soluto depende da transferência simultânea ou sequencial de um segundo soluto, na mesma direção (SIMPORTE) ou na direção oposta (ANTIPORTE) TRANSPORTE MEDIADO POR CARREADOR: 3 TIPOS TRANSPORTE ATIVO PRIMÁRIO Na+/K+ATPase Proteína carreadora 4 subunidades (2 alfa e 2 beta); Tem: 3 locais receptores para fixação de íons Na+; 2 locais receptores para íons K+ no exterior; a porção interna, perto dos locais de fixação do Na+, tem atividade ATPase; Clivagem da molécula de ATP em ADP + P (liberação de energia) A proteína carreadora bombeia ativamente Na+ para fora e K+ para dentro da célula contra seus gradientes eletroquímicosBOMBA DE Na+ / K+ ATPase TRANSPORTE ATIVO SECUNDÁRIO Energia deriva secundariamente, da que foi armazenada, geradas inicialmente pelo transporte ativo primário; Co-transporte: Na+/glicose (forma de absorção intestinal da glicose) Na+/K+/2Cl- (importante na reabsorção de solutos nos túbulos renais) Contra-transporte: Na+/Ca2+ (entrada de sódio e saída de cálcio). CO-TRANSPORTE CONTRA-TRANSPORTE Na+/Glicose Ca++/Na+ FAGOCITOSE Englobamento de partículas SÓLIDAS por pseudópodes. PINOCITOSE Englobamento de partículas LÍQUIDAS por invaginações. EXOCITOSE CLASMOCITOSE OU CLASMATOSE Eliminação de resíduos.
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