Aula Prática 8_2017 (2) Bioquímica (4)

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Universidade Federal do Rio Grande – FURG 
Instituto de Ciências Biológicas (ICB) 
Disciplina de Bioquímica – Biologia Bacharelado – Docente: Dr. José M. Monserrat
Roteiro da Aula Prática Nro. 8
1. Título: Uso de softwares no ensino de Bioquímica – Ciclo de Krebs e fosforilação oxidativa
2. Objetivos
· Utilizar atividades on-line para fixar conceitos do papel central do Ciclo de Krebs no metabolismo celular.
· Utilizar atividade on-line para fixar conceitos do papel e importância bioquímica da fosforilação oxidativa.
· Obter uma visão integradora dos principais aspectos do ciclo e Krebs e fosforilação oxidativa. 
3. Atividades
3.1. Ciclo de Krebs
3.1.1. Aspectos teóricos
Representa a via de metabolização do piruvato gerado na glicólise em condições aeróbicas. É o ponto de entrada do acetil CoA gerado na degradação de ácidos graxos. Gera como produtos GTP e co-enzimas reduzidas (NADH e FADH2) que podem alimentar ao processo de fosforilação oxidativa com produção de ATP. ACONTECE APENAS QUANDO A CÉLULA TEM DISPONIBILIDADE DE OXIGÊNIO.
3.1.2. Atividades
Execute as atividades presente no site:
http://www.johnkyrk.com/krebs.pt.html 
4. Perguntas para afirmar conceitos.
Responda as seguintes perguntas utilizando os aplicativos vistos nesta aula, as notas tomadas nas aulas ou através da busca pela Internet.
(1) Marque a opção correta. O ciclo de Krebs:
 (a) É denominado de ciclo dos ácidos tricarboxílicos porque todos os intermediários do ciclo são ácidos com três grupos carboxílicos.
(b) Utiliza exclusivamente NAD+ como agente redutor.
· (c) Acontece nas mitocôndrias.
 (d) O citrato é clivado a duas moléculas de piruvato.
(2) Marque a opção correta. O piruvato a ser oxidado no ciclo de Krebs:
 (a) Deve ser convertida a oxaloacetato.
· (b) É convertido primeiro a acetil-CoA por descarboxilação oxidativa.
 (c) Sua síntesse é inibida por níveis baixos de NAD+. 
 (d) É conjugado com oxaloacetato.
(3) Marque a opção correta. O ciclo de Krebs como um todo:
 (a) Produz acetil-CoA. 
 (b) Consome ATP. 
· (c) Gera uma molécula de GTP em cada giro do ciclo.
 (d) É catalisada por um único complexo multienzimático.
(4) Marque a opção correta. No ciclo de Krebs, a formação de fumarato a partir de succinato é única entre as reações deste ciclo já que:
 (a) Requer de glicose 6 fosfato. 
 (b) Envolve a quebra de uma dupla ligação. 
 (c) Caracteriza uma reação de desidratação.
· (d) É catalisada pela única enzima do ciclo que está localizada na membrana mitocondrial interna.
5. Fosforilação oxidativa 
5.1.1. Aspectos teóricos
Representa a via mais eficiente de geração de ATP em condições aeróbicas. O processo de re-oxidação do NADH e FADH2 gera -simultaneamente- eventos de transporte de prótons e elétrons, criando um potencial eletroquímico que favorece a produção de ATP. ACONTECE APENAS QUANDO A CÉLULA TEM DISPONIBILIDADE DE OXIGÊNIO.
5.1.2. Atividades
a. Execute as atividades presente no site:
http://www.wiley.com/college/boyer/0470003790/animations/animations.htm
Uma vez na página inicial escolher a opção de fosforilação oxidativa.
Efetue as três atividades do módulo: “Overview”, “Electron Transport Chain” e “ATP Synthesis”. No fim de cada módulo tem um questionário para avaliar o entendimento dos conceitos apresentados. 
6. Perguntas para afirmar conceitos.
Responda as seguintes perguntas utilizando os aplicativos vistos nesta aula, as notas tomadas nas aulas ou através da busca pela Internet.
6.1. Marque a opção correta. O transporte de elétrons mitocondrial:
 a- Independe da existência de proteínas transportadoras de elétrons. 
 b- Acontece na matriz mitocondrial.
· c- Transporta os elétrons que vem do NADH ou FADH2 ao oxigênio.
 d- Requer de energia. 
6.2. Marque a opção correta. No caso da fosforilação oxidativa pode-se dizer que:
· (a) é um processo bioquímico associado ao ciclo de Krebs. 
 (b) requer de ATP para acontecer (endergônico). 
 (c) não precisa de oxigênio.
 (d) nenhuma das opções anteriores é correta.
6.3. Um pesquisador realizou dois tipos de experimentos. No primeiro colocou numa preparação mitocondrial 10 equivalentes de NADH, 10 equivalentes de FADH2 e um inibidor do complexo I. No segundo experimento em outra preparação mitocondrial as mesmas quantidades de equivalentes de coenzimas reduzidas e um inibidor do complexo II. Discuta em qual dos dois experimentos ouve maior produção de ATP. Justifique sua resposta. 
6.3 Por cada NADH reoxidado tem-se 2,5 moléculas de ATP, e por cada FADH² reoxidado tem-se 1,5 moléculas de ATP. A reoxidação de 1 molécula de NADH contribui para bombear 10 prótons e acontece pelo Complexo I, já a reoxidação do FADH² contribui bombeando 6 prótons e acontece pelo Complexo II. O experimento com maior síntese de ATP seria o segundo, pois, ele não inibiria o Complexo I pelo qual ocorre a maior síntese de ATP.
6.4. Conecte com setas os nomes detalhados na primeira coluna com aqueles listados na segunda coluna. 
	(1) Transporte de elétrons 
	 (a) Ferro-sulfo proteínas
	(2) Complexos I, III e IV 
	 (b) Oxigênio
	(3) Processo redutivo 
	 (c) Gradiente eletroquímico
	(4) Formação de água 
	 (d) Complexo IV
12/9/2017
Universidade Federal do Rio Grande – Instituto de Ciências Biológicas – Disciplina de Bioquímica - Ciências
Aula Prática nº 8
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