pcc de biologia molecular

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PCC – BIOLOGIA MOLECULAR 
 5° SEMESTRE
 Antonia Oliveira da Silva
 1714529
 POLO
 Acrelândia - AC
a) Quantos sítios de rstrição existem nessa sequência?
Um sitio de restrição
b) Faça uma pesquisa sobre os tipos de cortes das enzimas de restrição. Descreva-os e classifique o corte da enzima BamHI.
As enzimas de restrição podem ser de três tipos:
Tipo I e III – tem sequência de reconhecimento assimétrica e a hidrólise é sempre em um local diferente, com gasto de ATP;
Tipo II – A sequência de reconhecimento é palindrômica , sendo que a hidrólise ocorre nas extremidades da sequência reconhecida e sem gasto de ATP. É a melhorpoção de uso pela biologia Molecular.
Os organismos Bacillus amylolíquefaciens H possuem a endonuclease BamHI, enzima tipo II que promove um corte ‘’em escada’’. 
c) O gel abaixo apresenta, na canaleta 1, um padrão de peso molecular onde as bandas representam sequências com 50bp, 80bp, 200bp e 1000pb. Suponha que o DNA acima tenha sido clivado pela enzima PvuII e represente, na canaleta 2, os fragmentos resultantes do corte. 
1 2
 
 ▬ 
 ▬ ─
 ▬ ─
 ▬ 
O sitio de clivagem identificado por PyuII: 5’ CAGCTG 3’
Há apenas um sitio de restrição na sequencia acima, dividindo a fita simples em duas partes. O fragmento menor tem cerca de 280 bases nitrogenadas, portanto 140 pb, ficando entre as sequencias 80 e 200 pb. O fragmento maior tem em torno de 410 bases, ou seja, 205 pb, ficando um pouco depois dos 200 pb.