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Agentes de desinfecção e de esterilização Prof. Ketlen Oliveira Bastos Universidade Federal do Amazonas Instituto de Ciências Exatas e Tecnologia Farmácia Microbiologia Básica Itacoatiara-AM 2020 • Esterilização: consiste na completa destruição e eliminação de todos os microrganismos na forma vegetativa e esporulada. Esta destruição pode ser efetuada através de métodos físicos e/ou químicos. • Desinfecção – é o processo que destrói ou inativa microrganismos na forma vegetativa, mas geralmente não afeta os esporos bacterianos. Os métodos utilizados podem ser físicos ou químicos. • Antissépticos – são desinfetantes que podem ser utilizados sobre a pele e em casos especiais as mucosas. Conceitos Consiste na destruição, inibição ou remoção de agentes microbianos causadores de doenças ou de outros problemas; Ex: degradação de alimentos Muitos dos produtos de limpeza doméstica tais como a amónia e a lixívia, são desinfetantes. O óxido de etileno, o glutaraldeído ou o formaldeído são os agentes químicos de maior utilização a nível industrial. Outros agentes como os álcoois promovem a desnaturação de proteínas e a solubilização de lipídeos. A desinfecção • Duas regras importantes na utilização de desinfetantes são: • 1. Usar sempre a forma mais concentrada que cause o mínimo prejuízo ao tecido ou superfície inerte a desinfetar; • 2. Caso seja necessária a utilização prolongada do produto, deve aplicar-se uma combinação de agentes ou intercalar com outros agentes eficazes. A esterilização de um determinado objeto ou ambiente, significa a destruição completa de toda e qualquer célula viva em crescimento ativo. A desinfecção Agentes químicos • Esterilizantes – agentes químicos que eliminam de um objeto ou material biológico todas as formas de vida microbiana. • Óxido de etileno - é um gás altamente solúvel em água e violentamente explosivo. Utilizado na esterilização de material termo sensível. A esterilização faz-se em câmaras apropriadas. • Atualmente tem sido substituído pelo plasma de peróxido e pelo formaldeído a 2% a baixa temperatura. Estes métodos têm a vantagem de não necessitarem de período de arejamento exigido pelo óxido de etileno. Agentes químicos • Bactericida – induz a morte celular sem ocorrer lise. • Bacteriostático – inibe crescimento e divisão, sem morte celular. • Bacteriolítico – induz a morte celular por lise. Agentes químicos • Desinfetantes e antissépticos – os desinfetantes podem ter sobre os microrganismos as seguintes ações: • - Bactericida / Bacteriostático (impedindo a célula de se dividir) / Bacteriolítico (efetuando a lise da parede da célula) - Fungicida / Fungistático - Viruscida / Virustático - Esporicida Agentes químicos Hipoclorito de sódio – Oxidantes que induzem à destruição da atividade de proteínas celulares. – A concentração mais comum para essa finalidade é a de 1% (p/v). – Revela-se corrosivo para alguns metais e o contato não deve exceder 30 minutos. - Após esse período deve proceder-se à lavagem e secagem das superfícies ou ambientes desinfetados. Agentes químicos • Compostos fenólicos – inativam as proteínas e podem interagir com o DNA. Muito usados na descontaminação de instrumentos clínicos. – São muito eficazes na remoção completa de restos orgânicos. – Ex: triclosan é dotado de atividade bactericida de amplo espectro, com exceção para a Pseudomonas aeruginosa. Doméstico e rural propriedades desinfetantes e antissépticas Agentes químicos • Iodo – destruição da atividade de proteínas e enzimas essenciais por oxidação. – É um dos desinfetantes mais antigos para aplicação na pele e mucosas. A Tintura de Iodo 2% Ever Care 30ml -antisséptico tópico -evita a contaminação por microorganismo. -Pode ser utilizada para desinfetar feridas e queimaduras superficiais. - Possui e propriedades anti-inflamatórias e bactericidas, Agentes químicos • Glutaraldeídos – Os glutaraldeídos são compostos que apresentam atividade máxima a diferentes valores de pH. – Conseguem ser efetivos contra todos os microrganismos incluindo mesmo o bacilo da tuberculose. – Não funcionam como antissépticos. • Álcoois (etanol, propanóis) – coagulam as proteínas e solubilizam lipídeos de que resulta a destruição das membranas celulares. Agentes químicos • Peróxido de Hidrogénio (água oxigenada) – oxidante que reage com componentes celulares essenciais, como os Lipídeos membranares e DNA. • Sais metálicos e compostos mercuriais (nitrato de prata, mercurocromo, mertiolato): inativação das proteínas celulares. • Detergentes catiónicos (compostos quaternários de amónio - cetrimida): inativam as proteínas e alteram a membrana citoplasmática. Clorexidina: parece ligar-se às superfícies celulares, ocasionando a desorganização estrutural e funcional da membrana. Agentes químicos * a atividade esporicida dos aldeídos necessita de contato prolongado (>3 horas) ** existem dúvidas da atividade do gluteraldeído sobre algumas micobactérias atípicas *** a atividade destes compostos varia com a concentração Agentes físicos • Os agentes físicos mais utilizados na esterilização e desinfecção de ambientes ou objetos são: • calor úmido; • calor seco; • filtração • radiações. Agentes físicos • Calor úmido - Autoclavagem – aquecimento a 121ºC durante 15-20 min a 1.02 atm. Este processo é o mais eficaz, pois o seu poder de penetração é maior. • Numa atmosfera úmida e a uma temperatura elevada os microrganismos morrem quando se dá a coagulação e desnaturação das enzimas e proteínas que fazem parte da sua estrutura. • É um aparelho essencial no laboratório de microbiologia, sendo usado para esterilizar meios de cultura e outros materiais contaminados termoestáveis. Agentes físicos • Pasteurização • LTH (low temperature holding) – aquecimento a 62.8 ºC – 65.6ºC, por 30 minutos. • HTST (high temperature short time) – aquecimento a 71.7ºC, 15 segundos. • UHT (ultra high temperature) – aquecimento a 141ºC, • 3 segundos. Agentes físicos • Ebulição • Consiste no aquecimento a 100ºC durante 5 a 10 minutos. • Destrói todas as formas vegetativas presentes na água e alguns dos endósporos, contudo, alguns esporos resistem a 100ºC por períodos de tempo superiores a uma hora. ex. Bacillus subtilis O que é o endosposro? Endósporo é uma estrutura dormente, dura, e não reprodutiva produzida por um número pequeno de bactérias do grupo Firmicutes. A função primária da maioria dos endósporos é garantir a sobrevivência da bactéria por períodos de estresse ambiental. Agentes físicos Agentes físicos • Tindalização ou esterilização fracionada • Método demorado e custoso • Processo muito antigo, utilizado para esterilização de meios de cultura com açucares e gelatina e soluções nutritivas. • Consiste no aquecimento a 80-100ºC, durante 30-60 min em 3 dias consecutivos ou mais o Este método permite que os esporos de fungos ou bactérias germine entre duas exposições, morrendo o organismo no aquecimento seguinte. Agentes físicos • Calor Seco • Aquecimento em forno ou estufa a 180ºC durante 1-2 horas. Destrói os microrganismos por oxidação dos seus constituintes celulares essenciais e coagulação das suas proteínas. • Este método é usado principalmente na esterilização de material de vidro, metal, de certos produtos nos quais a percentagem de água é muito pequena e não se deixam penetrar pela umidade (ex.: vaselina) Agentes físicos • Incineração • Utilizado em larga escala para resíduos hospitalares. Aquecimento ao rubro – as elevadas temperaturas a que se submetem estesmateriais (fios e ansas de platina e pinças) matam rapidamente os microrganismos presentes por carbonização. Agentes físicos • Radiações • Radiações ionizantes (Raios X e Gama) - São radiações de elevada energia e poder de penetração. • Atuam sobre os constituintes da célula, nomeadamente DNA e proteínas celulares. o É através da ionização da água, que forma radicais hidroxilas altamente reativos. Estes radicais reagem com componentes orgânicos que destroem as pontes de H e dupla ligação) Usam-se para esterilização de material plástico (seringas, placas de Petri, etc) e de borracha. Agentes físicos • Radiações não ionizantes (raios UV [240-280 nm]) • São radiações de fraca energia e fraco poder de penetração. Atuam a nível do DNA, impedindo a sua replicação ou alterando-o. • Usam-se na desinfecção do ar de gabinetes, recintos hospitalares (salas de operação), câmaras de fluxo, etc. • Estas radiações são altamente agressivas para a pele e para os olhos. Agentes físicos • Esterilização por filtração • Utiliza-se sempre que se pretende eliminar as bactérias dos produtos líquidos que se alteram com o calor (termolábeis) ou de gases (ex. Ar atmosférico). • Este processo difere dos outros métodos de esterilização porque não envolve a destruição de microrganismos, mas sim a sua remoção através da passagem por filtros sintéticos, granulares ou fibrosos. • Os filtros são de material diverso tal como: amianto, porcelana, celulose (acetato de celulose, nitrocelulose ou policarbonato). Agentes físicos Filtração por membrana Agentes físicos Agentes físicos Agentes físicos
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