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31/10/2019 1 LEUCÓCITOS E A INTERPRETAÇÃO DO LEUCOGRAMA Profa. Dra Maria Angela Machado Fernandes PATOLOGIA CLÍNICA VETERINÁRIA UNISEP/ Dois Vizinhos-PR 2019 2 HEMOGRAMA COMPLETO 3 Granulócitos Linfócito Monócitos Neutrófilo Eosinófilo Basófilo Linfócito T Linfócito B Macrófagos Agranulócitos (menor n° de grânulos) FUNÇÃO? LOCAL DE PRODUÇÃO X CIRCULAÇÃO X TECIDOS Polimorfonucleares ou granulócitos e mononucleares ou agranulócitos LEUCÓCITOS/ GLÓBULOS BRANCOS neutrófilo eosinófilo Linfócito monócito macrófago basófilo TIPOS DE LEUCÓCITOS CFU-GM CFU-L Leucopoiese 5 Proliferação e maturação Produção Maturação As etapas são comuns aos granulócitos 6 31/10/2019 2 7 8 9 10 - Liberação do compartimento de reserva : horas (mais eficiente em carnívoros*) - Aumento da produção: 2 a 4 dias - Aparecimento de novas células no sangue: 5d 11 INTERPRETAÇÃO DO LEUCOGRAMA 31/10/2019 3 CONTAGEM DE LEUCÓCITOS TOTAIS - Manual - Líquido de Turk/ hemocitômetro - Automatizada 13 LEUCOGRAMA DIFERENCIAL DE LEUCÓCITOS - Contar 100 leucócitos - Avaliação morfológica 14 LEUCOGRAMA/ DIFERENCIAL 15 FILIA - Neutrofilia - Eosinofilia - Basofilia PENIA - Leucopenia - Neutropenia - Linfopenia - Eosinopenia CITOSE - Leucocitose - Linfocitose - Monocitose LEUCOGRAMA: CONCEITOS 16 17 18 31/10/2019 4 19 20 FATORES FISIOLÓGICOS QUE INFLUENCIAM NA RESPOSTA LEUCOCITÁRIA IDADE: - maiores contagens nos filhotes • Valor mínimo de linfócitos no cão: 2.000 (3 – 6m) 1.500 (8- 24m) 1000 (> 2 anos) VARIAÇÃO CIRCADIANA - Neutrófilos e linfócitos - Avaliar preferencialmente no início da manhã Leucócitos mais abundantes no sangue periférico: * 1ª linha de defesa Núcleo denso característico 2 a 5 lóbulos Citoplasma pálido com contorno irregular e com grânulos Estímulo 2 a 3 dias Tempo de circulação 6 a 10h Não recirculam 21 1. NEUTRÓFILOS 22 fagocitose e destruição de microrganismos Desgranulação: Liberação de enzimas líticas dos grânulos intracelulares Inflamação e infecção bacteriana Produção dos Neutrófilos na medula óssea sangue: MB (mieloblasto), PM (pró-mielócito), M (mielócito), MM (metamielócito), BT (bastonete), SG (segmentado). MB e PM circulação em infecções agudas muito graves 23 RELAÇÃO Cão: 1: 1 Gato: 3: 1 ( pós-mitótico) Compartimentos e migração de neutrófilos LEUCOGRAMA DE STRESS (1. adrenalina) GATOS!!!! ( 2. cortisol) 24 31/10/2019 5 25 Neutrófilo Compartimentos de reserva nas diferentes espécies Desvio à esquerda Intermediário Suprimento por até 4-8 diasCaninos Felinos e equinos Ruminantes 26 A) FISIOLÓGICA – epinefrina, corticóides B) REATIVA – LEUCOGRAMA INFLAMATÓRIO - Infecções/inflamações locais ou sistêmicas - Necrose tecidual - Doenças imunomediadas - Neoplasias C) DESORDEM PROLIFERATIVA - Leucemias mielóides NEUTRÓFILIA 27 DESVIO À ESQUERDA DESVIO À DIREITA NEUTROFILIA COM DESVIO À ESQUERDA E DIREITA 28 QUANTO A INTENSIDADE • Leve (até bastonetes) • Moderado (até metamielócitos) • Intenso (mielócitos) QUANTO A GRAVIDADE/PROPORÇÃO DA RESPOSTA • Regenerativo • Degenerativo NEUTROFILIA COM DESVIO À ESQUERDA DESVIO À ESQUERDA Regenerativo DEGENERATIVO 29 Associado a leucócitos normais ou leucopênico • Predomínio de formas jovens • Resposta inadequada à inflamação • Depleção da medula óssea *Bovino: normal na resposta aguda • Exaustão da medula óssea • Mau prognóstico Associado a Leucocitose com neutrofilia • Predomínio de formas maduras • Resposta adequada à inflamação • Infecções bacterianas supurativas 30 31/10/2019 6 Mobilização dos compartimentos Demanda imediata de células Pool marginal Circulante Reserva MO Aumento granulopoese Liberação acelerada (desvio à esq.) 31 CONCENTRAÇÕES ANORMAIS DE LEUCÓCITOS Desvio à esquerda (presença de células jovens) • Regenerativo Leucocitose N. Segmentados ↑↑ Células imaturas ↑ Resposta apropriada Demanda X Liberação da MO Geralmente acima de 300/µL 32 CONCENTRAÇÕES ANORMAIS DE LEUCÓCITOS Desvio à esquerda • Degenerativo (resposta aguda em bovinos comum) Leucócitos: Normais, elevados ou diminuídos N. Segmentados ↑ Células imaturas ↑↑ N. Segmentados ↓ neutropenia Células imaturas ↑ Células imaturas excedendo as formas maduras Resposta inapropriada Produção X Liberação da MO Demanda tecidual aumentada 33 CONCENTRAÇÕES ANORMAIS DE LEUCÓCITOS Desvio à direita (neutrófilos hipersegmentados) Mais de 5 lobulações Glicocorticoide endógeno e exógeno Diminuíção da diapedese 34 35 A) DEMANDA/CONSUMO EXCESSIVO - Inflamação / Infecção aguda muito grave B) DIMINUIÇÃO DA PRODUÇÃO - EXAUSTÃO - Infecções bacterianas graves persistentes - Hipoplasia medular - Reversível ou irreversível - Leucemias C) PRODUÇÃO INEFICIENTE - Leucemias, FeLV NEUTROPENIA 2 a 5% dos leucócitos circulantes ausência de Pool marginal Núcleo segmentado (bi) e granulações em tom róseo Meia vida circulação 30 – 60 min Meia vida nos tecidos 12 dias Locais subendoteliais pele, trato respiratório, GI e GU 36 2. EOSINÓFILOS 31/10/2019 7 Regulação da resposta alérgica e inflamatória Inibe liberação de histamina ( ) e inativam a histamina livre Regulam a formação do edema inibem mediadores Ligação à IgE em complexos Ag - Ac Ação antiparasitária (helmintos) Desgranulação ( marcação por anticorpos e complemento) Fagocitose e atividade bactericida pouco efetivo 37 FUNÇÃO DOS EOSINÓFILOS - Pele, trato gastrintestinal, serosas, útero e pulmão Parasitismo – fase tecidual Hipersensibilidade – alergias Granuloma/Gastroenterite eosinofílica Ausência de eosinofilia não exclui suas causas 38 EOSINOFILIA EOSINOPENIA: NÃO APRESENTA SIGNIFICADO CLÍNICO • Corticóides • Inflamação aguda • Hipoplasia ou aplasia medular • Pouco significado diagnóstico • O retorno à normalidade indica melhora clínica 39 EOSINOPENIA Raros no sangue Apresentam grandes grânulos citoplasmáticos ricos em heparina e histamina. 40 3. BASOFILOS • Reações alérgicas • Parasitismo • Acompanhada de eosinofilia • Leucemia basofílica 41 BASOFILIA BASOPENIA??? No sangue (8 a 72 horas) tecidos (por diapedese) Maior célula no sangue periférico – morfologia variável Citoplasma azulado; núcleo irregular por vezes lobulado Fagocitose de Patógenos e debris celulares monócito macrófago 42 4. MONÓCITOS 31/10/2019 8 Reativa: Inflamação /Infecção - Produção aumentada estimulada por citocinas - Necessidade de macrófagos nos tecidos - Processos com necrose, hemorragia interna, doenças granulomatosas - Hemólise Corticóides: Demarginação → Principalmente cão Leucemia monocítica - rara 43 MONOCITOSE MONOCITOPENIA: NÃO APRESENTA SIGNIFICADO CLÍNICO Grupo heterogêneo de células (T*, B e NK): imunidade humoral e celular Núcleo redondo e quase ocupa todo o citoplasma Tempo de vida - Poucas horas (B) até semanas - Células T e B de memória vida longa (anos) 44 5. LINFÓCITOS 45 A) LINFOCITOSE FISIOLÓGICA LM → LC (ação de catecolaminas) ↑fluxo e ↓adesão *Linfocitose transitória LINFOCITOSE 46 B) REATIVA: - Infecção/inflamação crônica: - Estimulação antigênica crônica - Leishmaniose, erliquiose, brucelose, leucose bovina - Pós-vacinal C) ANIMAIS JOVENS D) NEOPLASIA LINFÓIDE - >12.000 cão e > 20.000 gato - Linfoma, leucemia linfóide LINFOCITOSE 47 A) LINFOPENIA DE ESTRESSE (cortisol endógeno ou exógeno) Alteração na cinética dos linfócitos • ↓ saída de linfócitos dos linfonodos • Redistribuição para medula • ↓ Linfopoiese LINFOPENIA 48 LINFOPENIA B) REATIVA: - Fase aguda de infecções virais - Processos infecciosos graves: endotoxemia, septicemia C) DROGAS IMUNOSSUPRESSORAS OU RADIAÇÃO D) PERDA DE LINFA 31/10/2019 9 Leucócitos Presentes no Sangue Periférico- Morfologia 49 CONDIÇÕES ESPECIAIS QUE ALTERAM O LEUCOGRAMA LEUCOCITOSE INDUZIDA POR ADRENALINA • Estresse agudo - categolaminas • Fisiológica e imediata: excitação/medo; exercício físico • Leucocitose – variável e leve • Neutrofilia: demarginação de neutrófilos maduros • Linfocitose – felinos e equinos • Animais jovens 51 LEUCOGRAMA DO ESTRESSE • Corticóides – após 30 minutos, no mínimo • Estresse (fisiológico, doença); Hiperadrenocorticismo ou Exógeno • Leucocitose 52 • NEUTROFILIA: -Demarginação de neutrófilos - Diminuição da diapedese - hipersegmentados -Mobilização da medula: desvio esquerda leve • MONOCITOSE – demarginação e mobilização da medula (cão) • LINFOPENIA – lise e sequestro, menor produção • EOSINOPENIA – menor liberação pela medula e lise 53 • Clínica • Evolução – exames seriados • Alteração leucocitária não é diagnóstico • Diferenças de espécie e idade • Analisar os resultados com atenção 54 CONSIDERAÇÕES IMPORTANTES 31/10/2019 10 ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS NOS LEUCÓCITOS ALTERAÇÕES TÓXICAS EM NEUTRÓFILOS Defeitos na maturação resposta a estímulos inflamatórios Produção intensamente acelerada de neutrófilos - Basofilia citoplasmática - Grânulos tóxicos - Corpúsculo de Döhle Vacuolização citoplasmática * Resposta medular acelerada e processos supurativos - purulentos 56 ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS DOS LEUCÓCITOS Neutrófilos com grânulos tóxicos produção alterada na MO Continuo estímulo à granulopoiese duração de um processo inflam. Produção acelerada células jovens (↓ tempo maturação) Persistência de grânulos primários (basofília) Sugere a duração e gravidade de um processo inflamatório (acompanhada de alterações quantitativas) Alterações morfológicas nos leucócitos 57 58 Basofilia citoplasmática: Presença de ribossomos ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS DOS LEUCÓCITOS Pela exocitose de material fagocitado e do conteúdo de conglomerados de lisossomos. São frequentes em infecções. A conservação in vitro com EDTA pode causar vacuolização. Vacuolização Citoplasmática Alterações morfológicas nos leucócitos 59 São áreas, na periferia dos neutrófilos, nas quais houve danos do retículo endoplasmático. São de rara ocorrência, mas possuem interesse diagnóstico por refletirem infecções graves e/ou sistêmicas Corpúsculos de Döhle Alterações morfológicas nos leucócitos 60 31/10/2019 11 Neutrófilos multisegmentadosmais de 5 lóbulos nucleares Aumento da permanência na circulação (desvio) Causas Corticóides Amostras mal conservadas/envelhecidas Síndromes mieloproliferativas Redução de vit. B12 Alterações morfológicas nos leucócitos 61 Alterações morfológicas nos leucócitos Linfócitos ativados Resposta apropriada à estimulação Morfologia altamente variável Maiores, nucléolos podem ser visíveis, citoplasma abundante azul claro a intenso, zonas claras perinucleares Linfócitos atípicos Achados anormais Doenças infecciosas e neoplásicas Células grandes, núcleo fendido Grânulos citoplasmáticos grandes 62 63 64 • Inclusões e parasitas em leucócitos são achados menos frequentes que em eritrócitos • Ehrlichia canis • Hepatozoom sp • Rangelia vitalii • Corpúsculo de Lentz Inclusões leucocitárias e hemoparasitas
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