Atividade 2 - Determinação da Glicemia

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Simulação Avaliação da Glicemia
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1- Para determinação da glicemia casual do paciente X, masculino, 55 anos, foi utilizado um Kit diagnóstico baseado em num sistema enzimático para determinação da glicose sanguínea, por método de ponto final. O paciente informou que faz uso contínuo de Captopril e por orientação médica tem tomado diariamente vitamina C. Considere que a Absorbância (medida a 505 nm) do teste foi de 0,420 e a Absorbância do padrão foi de 0,360, o valor da glicose em mg/dL foi determinado. (VR 65 a 99 mg/dL), julgue os itens abaixo. Está(ão) correta(s) a(s) afirmação(ões):
·  I. No método analítico empregado, segundo o procedimento, há formação de um produto cuja concentração chega a um ponto máximo, permanecendo inalterada por determinado tempo em função da estabilidade do produto. De acordo com o produto formado é possível afirmar que se trata de uma reação ultravioleta.
·  II. Em relação as influências pré-analíticas devem-se considerar que: o uso contínuo de vitamina C, poderá interferir na determinação, gerando resultados falsamente aumentados e a ingestão aguda de álcool, poderá diminuir significativamente a glicemia.
·  III. Em relação as influências analíticas devem-se considerar a concentração de bilirrubina, de hemoglobina e de triglicerídeos.
·  IV. Considerando o resultado da determinação da glicemia pode-se afirmar que o paciente é diabético.
2- Em relação à finalidade do método, a bula do kit para determinação da glicemia informa tratar-se de um sistema enzimático para a determinação da glicose por método cinético ou de ponto final. Como podemos definir uma reação por método cinético?
Geralmente utilizado em reações em que o analito é uma enzima. A atividade da enzima é analisada por meio da reação dela com um composto químico denominado substrato. Essa reação gera um produto. Em geral, a reação é acoplada a uma reação colorimétrica: à medida que a conversão enzimática se processa e o produto é gerado, há mudança de cor que deve ser observada em espectrofotômetro. Leituras sucessivas em intervalos de tempos iguais devem ser feitas. Aos valores obtidos na leitura espectrofotométrica deve-se aplicar fatores de correção que variam de acordo com o exame a ser realizado. 
3- Na descrição do princípio da reação a bula menciona tratar-se uma reação com formação de um produto (antipirilquinonimina) de coloração vermelha, cuja intensidade de cor é proporcional à concentração da glicose na amostra. Considerando a reação segundo o produto formado, podemos afirmar que a reação pode ser classificada como de:
·  a) Aglutinação
·  b) Precipitação
·  c) Colorimétrica
·  d) Ultra Violeta
4- Cite quais os fatores pré-analíticos que podem interferir na determinação da glicemia, utilizando a metodologia enzimática proposta, ou seja, utilizando as enzimas Glicose oxidase (GOD) e a Peroxidase (POD). No caso da interferência provocada pelo ácido ascórbico (vitamina C), qual método enzimático poderia ser empregado para evitar resultados falsamente diminuídos?
Uso de Ácido Ascórbico que deve ser interrompido 24h antes da realização do exame pois provocam resultados falsamente diminuídos. A ingestão aguda de álcool que provoca redução significativa na glicemia. Jejum prolongado ou pessoas obesas tratadas com dietas de baixo valor calórico também podem provocar reduções nos níveis glicêmicos. Pacientes diabéticos em uso continuado de clorpropamida podem desenvolver hipoglicemias importantes que são muito difíceis de corrigir. Teste UV enzimático utilizando hexoquinase.
5- Quais as interferências analíticas que precisam ser avaliadas para que o método baseado em reação de ponto final possa ser utilizado, sem alteração do resultado da glicemia do paciente?
Concentrações de bilirrubina até 2,5 mg/dL e hemoglobina até 200 mg/dL não produzem interferências significativas. Concentrações de bilirrubina maiores que 2,5 mg/dL produzem interferências negativas. Concentrações de triglicérides até 1000 mg/dL não produzem interferência significativa quando se utiliza branco de amostra.
6- A metodologia analítica indica uma amostra de escolha para a determinação da glicemia. Qual a amostra e o anticoagulante indicado (se for o caso) para uso, considerando o procedimento analítico proposto?
Plasma ou soro. um anticoagulante contendo um inibidor da glicólise.
7- Na descrição do princípio da reação a bula menciona tratar-se uma reação com formação de um produto (antipirilquinonimina) de coloração vermelha, cuja intensidade de cor é proporcional à concentração da glicose na amostra. Considerando hipoteticamente que o resultado da glicemia de um paciente, utilizando o Kit da Labtest em discussão, foi de 700 mg/dL, e considerando a linearidade do método empregado, na sua análise o resultado da glicemia obtido poderia ser liberado? Justifique
Não, pois o resultado da medição é linear até 500 mg/dL. Quando for obtido valor igual ou maior que 500 mg/dL, diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L, realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição. Ou repetir a dosagem observando possíveis erros/ contaminação da amostra.
8- No laboratório clínico, a performance dos métodos analíticos pode ser monitorada por meio do ensaio de amostras-controle com valores conhecidos, juntamente com os ensaios das amostras dos pacientes. Os resultados dos controles são plotados em um gráfico e comparados com os limites aceitáveis de erros (LAE) para aquele analito. O gráfico de Levey-Jennings, a seguir, apresenta os resultados da dosagem da glicose, no âmbito do controle interno, em um laboratório, durante 30 dias. Considerando que o limite de erro aceitável (LAE) para liberação dos resultados é de mais ou menos 2 desvios padrão, a partir da análise dos resultados indicados nos gráficos, responda: a) Todos os resultados obtidos no período de 30 dias podem ser liberados? b) Informe qual o tipo de erro percebido no dia 8 e no intervalo compreendido entre os dias 14 e 19 deste mês. c) Qual(is) a(s) causa(s) que poderia(m) ter contribuído para o aparecimento desses erros?
Nem todos os resultados podem ser liberados. Dia 8: Perda de precisão (pipetagem, agitação, material sujo, controle incorreto de temperatura...); Dias 14 a 19: Tendência (padrão/ reagentes deteriorados, equipamento com defeito).
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