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Transcrição do DNA Profª Júlia Helena Ortiz juliaortiz@uni9.pro.br Relembrando • Replicação: ▫ DNA polimerase III; ▫ Helicase; ▫ Topoisomerase; ▫ DNA polimerase I; ▫ DNA ligase. Replicação Transcrição ESTRUTURA DO RNA ❑Bases Nitrogenadas ➢ Adenina (A); ➢ Citosina ( C); ➢ Guanina (G); ➢ Uracila (U); ❑Pareamento das Bases ➢ A -- U ➢ C -- G Transcrição • Primeira etapa de expressão do GENE; • Cópia da informação do DNA; • Produção de uma molécula de RNA; • Ocorre dentro do núcleo. RNA polimerase • Enzima que liga os nucleotídeos para produzir uma cadeia de RNA; • Três estágios: iniciação, alongamento e término. • Sentido da vida – 5’ para 3’; • Realizada para cada gene. Sentido da RNA polimerase – 5’ para 3’ Comparações Replicação Transcrição • DNA polimerase III; • Dupla fita; • Abertura e cópia total da fita. • RNA polimerase; • Fita simples; • Abertura só no local do gene e cópia só da informação gênica. Etapas da transcrição • Iniciação: ▫ RNA polimerase se liga no DNA na região chamada de PROMOTOR; ▫ É encontrada próximo ao início do gene; ▫ Uma vez ligada, haverá a separação das fitas de DNA. ▫ DNA helicase quebra as ligações de hidrogênio. Promotora ❑ Promotores ❑ Sequências de nucleotídeos específicos importantes para o início da transcrição; ❑ TATA box (sequências de Adeninas e Timinas) ❑ Sequência de 25 nucleotídeos antes do local de início da transcrição ❑ CAAT box ❑ Sequência de 80 nucleotídeos ❑ GC box ❑ Sequência de 100 nucleotídeos PROTEÍNAS • Os fatores de transcrição TF´s • Os fatores de iniciação Reguladores ❑ Determina quando o gene deve ser transcrito e quantas vezes isso deve ser feito; ❑ Tipos: ❑ Amplificadores: ❑ Mais estudado ❑ Velocidade da transcrição. ❑ Inibidores; Alongamento • Fita molde – RNA polimerase se liga; • RNA polimerase adiciona os nucleotídeos; • O transcrito possui a mesma informação da fita não- molde (codificador). • No lugar da TIMINA será a URACILA. • Para alongar o RNA, a polimerase se liga ao SII e SIII (Fatores de alongamento); Término • Sequências gênicas que sinalizam o término do gene; • Chamados de finalizadores; • Este transcrito libera a RNA polimerase. • Extremidade 3’(AATAAA) CAP ❑ Capeamento do RNA Primário: ❑ Adição de guanina com um grupo metila (CH3) na extremidade 5’ do transcrito; PROCESSAMENTO DO RNA PRIMÁRIO ❑ Poliadenilação ❑ Corte (clivagem) do RNA em uma sequência particular de nucleotídeos; ❑ Adição de uma série repetitiva de nucleotídeos adenina (cauda Poli-A) sobre a extremidade clivada ❑ Formação do RNA maduro Splicing • Retirada de fragmentos genético copiados dentro de um gene; • Fragmentos que não possuem interesse na expressão – produção de proteínas; • Chamados de: ▫ Intergênicas – íntrons; ▫ Gênicas - éxons TRANSCRIÇÃO DO RNA❑ Finalização ❑ Os íntrons removidos pelo splicing são degradados no núcleo e suas unidades de construção são reutilizadas em outra transcrição; ❑ O RNA maduro está pronto para sair do núcleo através nos poros da membrana nuclear e atingir o citoplasma para iniciar a tradução Genes individuais • Conforme a necessidade haverá a expressão; RNA polimerase • RNA polimerase I – Localizada no nucléolo e responsável pela síntese do RNA ribossômico 45S; • RNA polimerase II – localizada no nucleoplasma e responsável pela síntese do RNA mensageiro e RNAmi (20 a 25 nucleotídeos); • RNA polimerase III – localizada no nucleoplasma e responsável pela síntese do RNA transportador e RNAr 5S. RNA polimerase II é sensível a amanitina RNA mensageiro (RNAm) • Responsável por levar a informação do DNA para o citoplasma; • É no citoplasma que será produzida a proteína; • Possui códons (trincas) de base nitrogenadas; • A partir de cada códon define um aminoácido. RNA transportador (RNAt) • Responsável por transportar aminoácidos; • Carrega até os ribossomos que fará a síntese de proteínas; RNA ribossômico (RNA r) • Chamado também de RNA ribossomial; • Faz parte da constituição dos ribossomos; • É nele que a informação do RNA mensageiro será interpretada e será produzida a proteína.
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