Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
- Capítulo 7 - DNA: Estrutura e replicação Disciplina: Biologia Molecular / 45h Professor: José Williams Discente: Alberto Alexandre 7.1 DNA | O material genetico • Transformação (Frederick Griffith, 1928); • Experimento de Oswald Avery, Colin MacLeod e Maclyn McCarty (1944). Figura 1. Transformação. FONTE: Griffiths, 2015. Figura 2. Experimento utilizando Dnase. FONTE: Griffiths, 2015. • Experimento de Hershey-Chase (1952). Figura 3. Experimento de Hershey-Chase. FONTE: Griffiths, 2015. Experimento de Rosalind Franklin Figura 4. Rosalind Franklin (à esquerda), e o modelo de difração de raios-X. FONTE: Griffiths, 2015. Watson e Crick: Estrutura do DNA • Figura 5. Watson e Crick. FONTE: Griffiths, 2015. O QUE SE SABIA DA ESTRUTURA DO DNA, ANTES DE WATSON E CRICK? • Elementos estruturais do DNA; • Regras de Chargaff da composição de bases; • Analise do DNA por difração de raios X. • Figura 6. Estrutura dos nucleotídeos que compõem o DNA. FONTE: Griffiths, 2015. DNA possui formato helicoidal, e estrutura dupla-hélice • Figura 7. Formato helicoidal e estrutura dupla-hélice do DNA. FONTE: Adaptado de Griffiths, 2015. Sulco maior. Sulco menor Duas ligações de hidrogênio Três ligações de hidrogênio (DNA mais estável) Resumindo ... O DNA é uma dupla- hélice, composta por duas cadeias de nucleotídeos, unidas por meio do pareamento complementar de A com T e de G com C. Figura 8. Esquema demonstrando que o DNA é formado por uma ligação entre uma base púrica e uma base pirimídica. FONTE: Griffiths, 2015. Problemas: • Se o conteudo de GC de uma molécula de DNA é de 62%, quais são as porcentagens das quatro bases (A, T, G e C) nessa molécula? • Se a timina compõe 15% das bases em uma molecula de DNA especifica, qual porcentagem das bases e de citosina? A replicação é um processo semiconservativo! Figura 9. Esquema demonstrando que a replicação do DNA é um processo semiconservativo. FONTE: Griffiths, 2015. Experimento de Meselson-Stahl : Cultivo de E. Coli em meio c/ isótopo pesado de Nitrogênio (15N), e depois em meio c/ isótopo leve de Nitrogênio (14N). Origem da replicação • Regiões ricas em A = T • Bolhas de replicação (Várias em Eucariotos) • Bidirecionalidade Figura 10. Esquema que demonstra a origem da replicação. DISPONÍVEL em: https://www.slideshare.net/JaquelineAlmeid a26/replicaco-do-dna https://www.slideshare.net/JaquelineAlmeida26/replicaco-do-dna A forquilha de replicação Figura 11. Forquilha de replicação. FONTE: Griffiths, 2015. Sentido de deslocamento da forquilha Cadeia leading Cadeia lagging Fragmentos de Okazaki Cadeias parentais Figura 12. Forquilha de replicação. DISPONÍVEL em: https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/2937177/mod_resource/ content/2/BiologiaMolecular_texto02%20final.pdf https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/2937177/mod_resource/content/2/BiologiaMolecular_texto02%20final.pdf Quais as principais enzimas atuantes na replicação? ❑ DNA-pol ❑ Girase (ou topoisomerase) ❑ Helicase ❑ Primase ❑ Ligase ❑ Telomerase DNA-polimerase • Após a formação da forquilha, a DNA-pol atua sintetizando a nova cadeia • Primer: o iniciador (Adicionados pela enzima primase) Figura 13. Ação da DNA-pol, através da inserção de primers. FONTE: Griffiths, 2015. A DNA-polimerase: • Sintetiza uma nova fita de DNA (SEMPRE DE 5’ 3’) • Repara erros (Atividade de exonuclease) Principais tipos: • DNA-pol I: Reparo (Remoção de primers) • DNA-pol II: Reparo (Exonuclease) • DNA-pol III: Síntese de cadeias de DNA (Mais complexa) Figura 14. Atividade da DNA-pol. FONTE: Adaptada de Griffiths, 2015. Cinta deslizante Figura 15. Cinta deslizante. DISPONÍVEL em: http://coral.ufsm.br/blg220/hide/replic7.htm Permite que a DNA polimerase se fixe a fita de DNA, evitando que ela se desprenda. http://coral.ufsm.br/blg220/hide/replic7.htm Topoisomerase e helicase Figura 16. Esquema de replicação do DNA. DISPONÍVEL em: https://pt.wikipedia.org/wiki/Helicase https://pt.wikipedia.org/wiki/Helicase Cadeias leading e lagging, e fragmentos de Okazaki Figura 17. Representação das cadeias leaging e lagging, e dos fragmentos de Okazaki. DISPONÍVEL em: https://geneticavirtual.webnode.com.br/genetica-virtual- home/prefacio/estrutura%20e%20replica%C3%A7%C3%A3o%20do%20dna/sentido% 20da%20replica%C3%A7%C3%A3o/ Essas diferentes cadeias são formadas por conta do sentido da forquilha de replicação. https://geneticavirtual.webnode.com.br/genetica-virtual-home/prefacio/estrutura%20e%20replica%C3%A7%C3%A3o%20do%20dna/sentido%20da%20replica%C3%A7%C3%A3o/ Proteínas SSB Figura 18. Representação das proteínas SSB. DISPONÍVEL em: http://coral.ufsm.br/blg220/hide/replic7.htm Qual a função dessas proteínas? http://coral.ufsm.br/blg220/hide/replic7.htm O grande complexo Figura 19. O complexo envolvido na replicação do DNA. FONTE: Adaptada de Griffiths, 2015. Topoisomerase Movimento da forquilha Helicase Primer Primer Fragmento de Okazaki Proteínas SSB DNA-pol Filamento descontínuo Ligase Fragmento contínuo Exercícios Na duplicação de DNA, uma nova fita é formada a partir de uma fita usada como molde. Para que a síntese de uma nova fita ocorra, é necessário que as duas fitas do DNA parental separem-se. Isso é feito pela enzima: a) DNA polimerase. b) DNA primase. c) DNA topoisomerase. d) DNA helicase. e) DNA isomerase. Durante a formação de uma fita de DNA, nucleotídeos são ligados de modo a formar uma nova molécula. Esses nucleotídeos são adicionados pela ação da: a) DNA polimerase. b) DNA primase. c) DNA topoisomerase. d) DNA helicase. e) DNA isomerase. (UFPA) Em 1953, Watson e Crick decifraram que a estrutura da molécula de DNA (ácido desoxirribonucleico) é uma dupla hélice, responsável pelas características dos organismos. Com os conhecimentos atuais, julgue as afirmativas sobre a molécula de DNA: I- Na autoduplicação da molécula de DNA, cada filamento original serve de molde para a síntese de um novo filamento (duplicação semiconservativa). II- A base nitrogenada adenina emparelha-se com a citosina, enquanto a timina emparelha-se com a guanina. III- As bases nitrogenadas dos dois filamentos estão unidas por ligações denominadas pontes de hidrogênio. Está(ao) correta(s) a(s) afirmativa(s): a) I somente b) II somente c) I e II. d) I e III. e) II e III. Em relação a replicação do DNA, é correto afirmar: I - As proteínas SSB são importantes nesse processo, visto que elas se associam a molécula de DNA, e atuam ligando os fragmentos de Okazaki; II – O filamento leading é formado no mesmo sentido da forquilha de replicação; III – A síntese de um novo filamento a partir de uma fita molde se inicia com a adição de primers, adicionados pela enzima ligase; IV – A topoisomerase tem função de separar as fitas de DNA, para ocorer a replicação. Está(ão) correta(s): a) I e II b) I e III c) II e III d) IV, somente e) II, somente Alberto Alexandre de Sousa Borges Discente do PPGCA – Programa de Pós-graduação em Ciência Animal – UFPI Email: aalexandresb@gmail.com
Compartilhar