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DIAGNÓSTICO MOLECULAR E SOROLÓGICO DAS INFECÇÕES FACULDADE DE CIÊNCIAS BIOMÉDICAS DO ESPIRITO SANTO-PIO XII JULIA FERREIRA LOPES KAMILA GONÇALVES LAILA DUARTE FORTUNATO MARIANI TONIATO FIOROTTI FARDIN RUBIANA PAULA DE CARVALHO TREICY DIANA RODRIGUES Prof. Rodrigo Moraes MICROBIOLOGIA CLÍNICA INTRODUÇÃO DIAGNÓSTICO? DEPENDE DA QUALIDADE DA AMOSTRA • MICROSCOPIA • CULTIVO • SOROLOGIA • BIOLOGIA MOLECULAR DIAGNÓSTICO DEFINIDO ANTIBIOGRAMA TRATAMENTO DIAGNÓSTICO MOLECULAR O que é? Para que serve? Como é feito? PRINCIPAIS TÉCNICAS MOLECULARES As técnicas moleculares, tem como principal objetivo a obtenção, identificação e caracterização do material genético. Dessa forma as principais técnicas são: PCR Eletroforese em gel Clonagem molecular DIAGNÓSTICO MOLECULAR DA INFECÇÃO PELA CHLAMYDIA TRACHOMATIS Independentemente do método de detecção direta em amostra clínica utilizado, a coleta adequada é essencial e se relaciona diretamente com a sensibilidade e a especificidade do teste diagnóstico ; A técnica que está sendo utilizada há mais tempo é a PCR. PRINCIPAIS TESTES DISPONÍVEIS INFECÇÕES BACTERIANAS INFECÇÕES VIRAIS PCR PARA INFLUENZA H1N1; PCR PARA PARVOVIRUS; CARGA VIRAL HIV. PCR PARA MENINGOCOCO, PNEUMOCOCO E HAEMOPHILUS; PCR PARA CLAMÍDEA. APLICAÇÕES DO DIAGNÓSTICO MOLECULAR O Diagnóstico molecular pode ser utilizado para vários fins, como: • A IMPORTÂNCIA DOS TESTES SOROLÓGICOS • MÉTODOS SOROLÓGICOS DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO A IMPORTÂNCIA DOS TESTES SOROLÓGICOS • Os testes sorológicos foram desempenhados para auxiliar o diagnóstico em uma suspeita clínica; • Analise da estrutura dos microrganismos levou a identificação de antígenos clinicamente confundíveis; • A detecção de diferentes classes das imunoglobulinas na circulação sanguínea relata a fase da infecção; • São capazes de detectar erradicação e reinfecção da doença; • Os métodos sorológicos, como qualquer outro teste está sujeito a erros: a presença de anticorpos podem confundir o diagnóstico; MÉTODOS SOROLÓGICOS Para cada tipo de doença, existe um método a ser utilizado; Novas tecnologias estão sendo utilizadas para o aperfeiçoamento dos métodos: sensibilidade e confiabilidade dos resultados, rápidos e simples, baixo custo operacional; Para eliminar erros sistemáticos as técnicas devem ser padronizadas: concentração de antígeno e anticorpo, conjugado envolvido, tempo, temperatura, exatidão e precisão. DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO Novas tecnologias estão sendo utilizadas para o aperfeiçoamento dos métodos: sensibilidade e confiabilidade dos resultados, rápidos e simples, baixo custo operacional; Para eliminar erros sistemáticos as técnicas devem ser padronizadas: concentração de antígeno e anticorpo, conjugado envolvido, tempo, temperatura, exatidão e precisão. APLICAÇÃO DO DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO Principais aplicações Dengue Toxoplasmose HIV Hepatite Herpes Sífilis TÉCNICAS DO DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO Identificar a presença de antígenos pertencentes a vários microrganismos e de anticorpos que são desenvolvidos como resposta à presença destes agentes infecciosos no sangue do paciente. TÉCNICAS DO DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO Teste Elisa → HIV, Doenças virais em geral, Doenças Auto-imunes TÉCNICAS DO DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO Aglutinação → Leptospirose, toxoplasmose e Tripanossomíase. CONCLUSÃO Técnicas sorológicas e moleculares são importantes para diagnóstico das infecções; Ambas possuem vantagens e desvantagens; REFERÊNCIAS FARINA, Claudete. Diagnóstico laboratorial da infecção pela Chlamydia trachomatis: vantagens e desvantagens das técnicas: Jornal brasileiro de patologia e medicina. Rio de Janeiro, 2002. Disponível em: https://www.scielo.br/scielo.php?pid=S1676- 24442002000200009&script=sci_arttext&tlng=pt. Acesso em: 06 de junho de 2020. Disponível em: https://www.infoescola.com/biologia/biologia-molecular/ Acesso em: 06 de junho de 2020. Introdução ao diagnostico laboratorial. Disponível em: http://www.icb.usp.br/bmm/mariojac/arquivos/Aulas/Diagnostico%20laboratorial.pdf. Acesso em: 06 de junho de 2020. Diagnostico microbiológico. Disponível em: http://www.ufjf.br/microbiologia/files/2013/05/Diagn%C3%B3stico-microbiol%C3%B3gico- Farm%C3%A1cia-1-de-2019-Modo-de-Compatibilidade.pdf. Acesso em: 06 de junho de 2020.
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