eletroforese - apresentação

Prévia do material em texto

Eletroforese
DANILO MELLE DE PROENÇA
ELETROFORESE
Essas macromoléculas são submetidas a um
campo elétrico, na qual migram para um polo
positivo ou negativo de acordo com a sua carga.
método habitualmente 
usado para separar e 
também purificar 
macromoléculas, 
principalmente ácidos 
nucleicos e proteínas.
Moléculas de menor peso migram mais 
rápido que as de maior peso, formando 
as bandas características que serão 
visualizadas posteriormente.
A migração das 
particulas depende do 
seu tamanho e carga, 
alem da DDP a que 
foram submetidas
ELETROFORESE E 
SUAS APLICAÇÕES
A eletroforese é utilizada em inúmeros
processos de biologia molecular, entre
eles:
• Ciência forense– para comparar o
DNA encontrado no local do crime com o
de possíveis suspeitos.
• Genética– teste de paternidade,
diferenciação de espécies ou linhagens e
engenharia genética.
• Microbiologia– detecção de diferentes
patógenos como vírus, bactérias e fungos.
• Bioquímica– detecção da expressão de
proteínas.
• o resultado é visualizado imediatamente,
dispensando a eletroforese (através de
sondas fluorescentes Às reações de PCR.
PRC EM TEMPO REAL
• Exemplo A medida que o DNA
é amplificado, o nível de
fluorescência cresce
proporcionalmente.
• Permite acompanhar a reação e
a apresentação dos resultados
em tempo real.
• É possível determinar com
precisão a quantidade de DNA-
alvo presente na amostra
original.
• A qPCR pode ser utilizada para
se avaliar a presença de um
patógeno em uma amostra,
podendo ser um teste qualitativo
ou quantitativo.
• Está sujeita a presença de inibidores e contaminação que podem afetar a sua eficiência.
• Os plásticos para qPCR tem um grande impacto sobre os ensaios em tempo real e precisam
receber um tratamento especial para não interferir na reação, principalmente na leitura do
sinal fluorescente.
• Ocasionam assim um resultado errado, com baixa concentração ou mesmo inviabilizando o
processo.