Prática Hemólise

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Centro de Ciências Fisiológicas – Departamento de Ciências Fisiológicas
Biomedicina – Integral, Turma IX
Prática: Hemólise Osmótica
Discentes: RA:
Bruna Serra 
Laís Stella Perassoli Nicchio
Maria E. Gobara 
Maria A. Polonio 
Matheus E. V. Amaro 
Maringá-Pr
 Setembro de 2020
1. Materiais:
· Frascos contendo água deionizada, soluções de NaCl e de ureia;
· Centrífuga;
· Tubos de ensaio 10 x 1,5 cm; 
· Pipetas graduadas de 5 mL; 
· Pipeta automática (50 µL);
· Sangue animal (rato);
· Papel Alumínio.
2. Procedimentos:
Ver no matéria enviado “AULA-PRÁTICA: HEMÓLISE OSMÓTICA”.
3. Discussões:
a) Observando o aspecto de cada uma das misturas de sangue + solução antes da centrifugação, qual a diferença entre os tubos? Como se explica tal diferença? É possível, a partir desta observação, concluir algo sobre o comportamento celular nas diferentes soluções?
R: Observando a coloração dos tubos a olho nu notou-se que alguns são vermelhos opacos e outros são translúcidos, essa diferença se dá pelo acréscimo de NaCl nos tubos 2, 3, 4, 5 e 7 fazendo com que estes fiquem com aspecto opaco. Com a adição de soluto nas soluções podemos dizer que é um meio hipertônico, deste modo as células sanguíneas perder volume e a solução fica vermelho opaco, já nos tubos translúcidos interpreta-se que é um meio hipotônico e ocorre a liberação de hemoglobina decorrente da ruptura da membrana celular das hemácias.
b) Após a centrifugação, o que pode se concluir a partir dos aspectos dos sobrenadantes? E a partir dos aspectos dos "pellets" (depósitos)?
R: Pode se concluir a partir dos aspectos dos sobrenadantes que nos tubos 1, 2 e 6 ouve hemólise, dando aos tubos uma coloração avermelhada graças ao pigmento vermelho da hemoglobina disperso no líquido. Os demais tubos ficaram incolor, portanto, não houve hemólise, ou se houve, não foi uma quantia significante.
A partir dos “pellets”, é possível concluir a tonicidade das soluções. Como por exemplo o tubo quatro, onde vemos as hemácias com sua forma preservada no botão formado ao fundo.
c) A foto abaixo apresenta os tubos: 3, 5 e 7. Pelo tamanho do depósito(pellet) de hemácias é possível definir qual seria o tubo da esquerda, do centro e da direita? Explique:
R: Ao analisar o sobrenadante da amostra exposta a ureia, sabe-se que ocorreu hemólise pois a ureia é um soluto permeante, fazendo que na sua presença ocorra um influxo de ureia e consequentemente um influxo de água, ao mesmo tempo há o NaCl que é não permeante e garante esse equilíbrio, por isso a solução 7 é a do meio.
A solução com cloreto de sódio com 0,3M é hiperosmótica em relação a hemácia e acaba fazendo com que ela perca muita água e murche, deixando um pellet maior na amostra, por isso o tubo que a representa é o da direita. Enquanto o NaCl a 0,1M está próximo a condição isosmótica do LIC, e gera um pequeno influxo de água que não chega a levar as células estourar, consequentemente não há tanto pellet, sendo o tubo da esquerda.
d) Considerando os resultados observados, discuta os termos HOMEOSTASE e MEIO INTERNO.
R: A homeostase é caracterizada por manter as condições estáveis no meio interno, o qual é definido pelo líquido extracelular que banha as células. Um organismo está em homeostase quando seu meio interno apresenta a concentração apropriada de cada elemento e cada substância química, além de temperatura e pressão adequadas. No entanto, quando ocorrem adversidades físicas ou químicas impostas pelo ambiente, alterando a homeostase, alguns sistemas deixam de funcionar corretamente, resultando prejuízos sérios ao corpo e, se não for restabelecida, poderá resultar em morte. Entretanto, o corpo apresenta vários mecanismos para a regulação da homeostase que podem trazer equilíbrio ao meio interno.
e) PROBLEMA: Soluções de glicose 5% e salina normal (NaCl 0,9%) são normalmente utilizadas na clínica através de infusões intravenosas. Calcule a molaridade e a osmolaridade destas duas soluções e classifique-as quanto a sua osmolaridade e tonicidade.
R: NaCl:
Molaridade:
 NaCl NaCl 0,9% 9g/L
 35,5 x 1 = 35,5 M= = 0,154 mol/L 
 23 x 1 = 23 
 
 Total: 58,5 
Osmolaridade:
*Cada molécula de NaCl é igual a 2 osmóis.
 
 Osm= 0,154 mol/L x 2 = 308 mOsm/L
C6H12O6:
Molaridade:
C6H12O6 C6H12O6 5% 50g/L
 16 x 6 = 72
 1 x 12 = 12 M= = 0,277 mol/L 
 12 x 6 = 96 
 
 Total: 180 
Osmolaridade:
*Cada molécula de C6H12O6 é igual a 1 osmol.
 
 Osm= 0,277 mol/L x 1 = 277 mOsm/L
 
As duas soluções são isosmóticas e isotônicas.