DOENÇAS PARASITÁRIAS: MÉTODOS PARA O DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

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DOENÇAS PARASITÁRIAS: MÉTODOS 
PARA O DIAGNÓSTICO LABORATORIAL 
Parasitologia Médica: envolve o estudo da Protozoologia, Helmintologia (além de abranger 
alguns aspectos de Entomologia e Ectoparasitas). 
As doenças parasitárias estão intimamente relacionadas as condições socioeconômicas do 
indivíduo (destaque a pobreza). 
Muitas das doenças parasitárias estão inclusas no grupo das doenças tropicais 
negligenciadas como: doença de chagas, leishmaniose, oncocercose, esquistossomose, 
teníase/cisticercose, helmintos geofílicos, entre outros. 
DIAGNÓSTICO DAS DOENÇAS PARASITÁRIAS 
Pode ser feito por critérios clínico-epidemiológicos ou por critério laboratorial, que se 
divide em métodos parasitológicos, imunológicos, moleculares. 
Para o diagnóstico laboratorial é preciso dividir os parasitas em 2 grandes grupos: os 
parasitas sanguíneos e teciduais; e os parasitas intestinais. 
ENTEROPARASITOSES 
Os parasitas intestinais pertencem ao grupo dos protozoários e helmintos. 
Cerca de 2 bilhões de pessoas apresentam infecção por algum helminto ou protozoário 
intestinal (WHO, 2007), sendo que possuem uma elevada prevalência na infância, devido 
maior exposição e sistema imune imaturo. 
Enteroparasitoses mais frequentes no Brasil: 
Protozoários: 
• Amebíase (Entamoeba hystolitica) 
• Giardíase (Giardia duodenalis) 
• Criptosporidíase (Cryptosporidium spp.) 
• Ciclosporíase (Cyclospora spp.) 
• Isosporíase (Isospora spp.) 
Helmintos: 
• Esquistossomose (Schistosoma mansoni) 
• Fasciolíase (Fasciola hepática) 
• Teníase/Cisticercose (Taenia spp.) 
• Himenolepíase (Hymenolepis nana) 
• Ascaridíase (Ascaris lumbricoides) 
• Ancilostomose (Necator americanos) 
• Tricuríase (Trichuris trichura) 
• Estrongiloidíase (Strongyloides stercoralis) 
• Enterobíase (Enterobius vermicuralis) 
 
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES 
Propicia o diagnóstico parasitológico da infecção por protozoários e/ou helmintos 
intestinais pela demonstração de formas parasitárias (cistos, oocistos, trofozoítos, ovos, 
larvas, vermes adultos ou fragmentos) eliminadas nas fezes. 
Os enteroparasitas possuem características biológicas distintas, sendo as mais relevantes: 
• Helmintos: podem ser encontrados na forma adulta, larvas e ovos. 
• Protozoários: podem ser encontrados na forma de trofozoíto, cistos e oocistos. 
Obs: cistos são muito diminutos em comparação aos ovos. 
Além disso esses parasitas possuem peculiaridades biológicas como: 
• Larvas como formas de resistência - Strongyloides stercoralis & Estrongiloidíase 
• Fêmeas com ovos na região perianal - Enterobius vermicularis & Enterobíase 
• Proglotes com ovos - Taenia spp. & Teníase 
No EPF a positividade vai depender de diferentes fatores: 
• Estágio da infecção; 
• Eliminação intermitente de formas de resistência; 
• Intensidade do parasitismo; 
• Porção da amostra fecal analisada; 
• Método empregado no processamento e análise. 
Obs: Um resultado negativo em uma única amostra não elimina a possibilidade de uma 
parasitose. 
O EPF é dividido nas fases: coleta de material e conservação, processamento, análise e 
resultado final. 
COLETA DO MATERIAL 
• Orientações e instruções ao paciente. 
• Frasco coletor deve ser limpo, seco, com boca larga, tampa de rosca e 
hermeticamente fechado. 
• Coletar as fezes em qualquer horário do dia em penico, recipiente limpo e seco ou 
papel higiênico e depois transferi-las para o frasco coletor. 
• Evitar contaminação por urina, terra e água. 
• Após a coleta, encaminhar em até duas horas ao laboratório. 
• Caso não seja possível, refrigerar (5 – 10 °C) e encaminhar ao laboratório em até 24 
horas após a coleta. 
PRESERVAÇÃO DO MATERIAL 
Conservantes: preservam a integridade das estruturas parasitárias, o que permite análises 
por um longo período. 
Obs: Muito útil em coletas múltiplas 
Possíveis conservantes: Formol 10%, Solução de Mertiolato-Iodo-Formaldeído (MIF)*, 
Solução de Sódio-Ácido acético-Formaldeído (SAF), Fixador Álcool Polivinílico (APV), 
utilizados na razão 1:3 fezes/conservante. 
PROCESSAMENTO E ANÁLISE 
Questões Norteadoras para o Processamento e Análise 
• Há alguma suspeita clínica? 
• Qual a consistência das fezes? 
• As fezes estão conservadas? 
 
Exame Macroscópico 
• Fezes frescas 
• Odor e cor 
• Presença de sangue ou muco 
• Presença de proglotes ou vermes adultos 
• Consistência das fezes – deve direcionar a rapidez com que as amostras 
devem ser analisadas. 
Exame Microscópico Direto 
• Geralmente possui baixa sensibilidade, porém é recomendado para a pesquisa de 
trofozoítos. 
• Lâmina + solução salina + fezes + lamínula (três vezes). 
• Objetivas de 10X e 40X. 
• Trofozoítos e cistos são indistinguíveis. 
Coloração 
• Útil para diferenciação de cistos, trofozoítos e larvas. 
• Ovos podem ser identificados sem corantes. 
Pode ser: 
• Temporária: solução de iodo, solução de Quensel, solução de azul de metileno 
de Nair. 
• Permanente: Hematoxilina Férrica, Tricômio. 
MÉTODOS DE CONCENTRAÇÃO 
• Melhoram a sensibilidade pela concentração de cistos, oocistos, ovos ou larvas nas 
preparações. 
• Eliminam detritos fecais a fim de facilitar a identificação morfológica. 
• Os métodos mais comuns empregam a diferença de densidades específicas entre as 
formas evolutivas e os detritos fecais. 
• Podem ser classificados em: 
1. Métodos de sedimentação ou centrífugo-sedimentação: mais indicados para ovos 
mais pesados e de maior densidade. 
2. Métodos de flutuação ou centrífugo-flutuação: mais indicados para cistos, ovos 
leves e de baixa densidade. 
SEDIMENTAÇÃO 
 
• Sedimentação por gravidade ou por centrifugação, o que favorece a deposição das 
formas parasitárias. 
• Método de Hoffman, Pons e Janer (HPJ) ou Lutz 
FLUTUAÇÃO 
 
• Empregam reagentes de densidade mais alta que ovos, oocistos e cistos, que por sua 
vez flutuam na superfície das soluções. 
• Possíveis soluções: Cloreto de sódio (1,13 g/mL), Sacarose (1,20 g/mL), Sulfato de 
zinco (1,18 g/mL), Sulfato de magnésio. 
• Método de Willis e Método de Faust. 
MÉTODOS PARA PESQUISA DE LARVAS 
MÉTODO DE BAERMANN-MORAES 
 
• Baseia-se no termotropismo e hidrotropismo positivo de larvas de nematódeos. 
• As fezes precisam estar frescas. 
 
 
 
 
MÉTODO DE RUGAI 
 
• Mesmo embasamento do anterior. 
• As fezes precisam estar frescas. 
 
MÉTODOS DE CONCENTRAÇÃO E QUANTIFICAÇÃO 
MÉTODO KATO-KATZ 
• Permite a quantificação da carga parasitária. 
• Atualmente recomendado pela OMS para o diagnóstico de infecções por helmintos 
transmitidos pelo solo e esquistossomose. 
• Não recomendado para cistos de protozoários. 
• As fezes precisam estar frescas. 
 
MÉTODOS ESPECIAIS 
Método de Graham ou da fita gomada 
• Diagnóstico da enterobíase (Enterobius vermicularis). 
• Coleta ao amanhecer a antes da higiene pessoal. 
 
RESULTADO FINAL - DETECÇÃO MICROSCÓPICA DE FORMAS EVOLUTIVAS 
GIARDIA DUODENALIS - Apresenta delicada membrana destacada do citoplasma. No seu 
interior encontram-se dois ou quatro núcleos, um número variável de fibrilas (axonemas 
de flagelos) e os corpos escuros com forma de meia-lua e situados no polo oposto aos 
núcleos. 
ENTAMOEBA HISTOLYTICA / ENTAMOEBA DÍSPAR - Pequena esfera medindo 8-20 µm de 
diâmetro. No seu interior encontra se de um a quatro núcleos com membrana um pouco 
mais escura e cariossoma central, pode haver vacúolos de glicogênio. 
ENTAMOEBA COLI - Pequena esfera medindo 15-20 µm, contendo até oito núcleos, com 
corpos cromatóides finos, semelhantes a feixes ou agulhas. 
OBS: embora Entamoeba coli seja comensal e não gere patologia, seu achado é um sinal de 
alerta, pois indica exposição do paciente, o qual pode ir a contrair outros parasitas pela 
mesma via da E.coli. 
STRONGYLOIDES STERCORALIS - Apresenta vestíbulo bucal curto, primórdio genital visível 
e cauda pontiaguda. 
ASCARIS LUMBRICOIDES - Grandes com cerca de 50 µm de diâmetro, ovaise com cápsula 
espessa. Apresenta uma membrana externa mamilonada. Internamente apresentam uma 
massa de células germinativas. 
HYMENOLEPIS NANA - Esféricos, transparentes e incolores, medem cerca de 40 µm de 
diâmetro. Apresentam uma membrana externa delgada envolvendo um espaço claro. 
internamente apresentam outra membrana envolvendo a oncosfera. Essa membrana interna 
apresenta dois mamelões claros em posições opostas, dos quais partem alguns filamentos 
longos (sua dupla membrana cria um aspecto de sombreiro mexicano ao ser observado no 
microscópio). 
ANCYLOSTOMA DUODENALIS / NECATOR AMERICANOS - Mede de 56 a 76 µm de comprimento. 
É um ovo elipsóide de casca fina e transparente, de forma ovóide com massa embrionária 
no interior. 
ENTEROBIUS VERMICULARIS - Mede cerca de 50 µm de comprimento por 20 µm de largura. 
Apresenta o aspecto grosseiro de um D, pois um dos lados é sensivelmente achatado e 
o outro é convexo. Possui membrana dupla, lisa e transparente. 
 
APRESENTAÇÃO DOS RESULTADOS 
O laudo final deve conter minimamente: 
• Métodos executados 
• Observação sobre o número de amostras colhidas 
• Aspecto macroscópico das fezes 
• Achados patogênicos e não-patogênicos 
• Formas evolutivas encontradas 
• Nome científico dos parasitos encontrados 
CONSIDERAÇÕES FINAIS 
• A combinação de métodos de concentração aumenta a precisão dos resultados. 
• Recomenda-se minimamente a realização de um método mais geral (HPJ, por 
exemplo) e um método específico para pesquisa de larvas (Rugai, por exemplo). 
• Além disso, o clínico deve solicitar pelo menos três amostras de fezes e a leitura 
deve ser feita em mais de uma lâmina por amostra. 
• A coleta para controle de cura pode ser feita de 1 a 2 semanas após o tratamento.