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14/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566115&matr_integracao=202001166531 1/6 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): JEFFERSON CARLOS DOS SANTOS COSTA 202001166531 Acertos: 4,0 de 10,0 14/10/2020 Acerto: 0,0 / 1,0 O processo de extração do DNA tem como objetivo isolar os ácidos nucleico dos demais componentes celulares. Baseado neste processo marque a alternativa incorreta. Na etapa de purificação do DNA são utilizadas substâncias que fazem a remoção de carboidratos e proteínas presente nas amostras, isolando apenas o DNA Durante a extração do DNA é necessária fazer a remoção de outros componentes como proteínas, lipídeos e RNA. A primeira etapa da extração é a lise de membranas onde são utilizados substância com ação de um detergente. A precipitação final do DNA pode ser realizada com etanol ou álcool isopropílico. Substâncias com ação de precipitação são utilizadas para remoção dos lipídios da amostra Respondido em 14/10/2020 22:14:20 Explicação: Substâncias com ação de DETERGENTES são utilizadas para remoção dos lipídios da amostra. Acerto: 1,0 / 1,0 A técnica de PCR (reação em cadeia da DNA polimerase) é utilizada com o objetivo de se obter várias cópias (amplificação) de um fragmento específico de DNA. Entretanto, um dos problemas que pode ocorrer durante a PCR é a amplificação inesperada de fragmento(s) inespecífico(s). Dados os fatores que influenciam nesse tipo de problema, I. Sequência de nucleotídeos dos primers. II. Temperatura de anelamento dos primers. III. Concentração do DNA template. IV. Concentração dos primers. Verifica-se que está(ão) correto(s): B) II e III, apenas. C) III e IV, apenas. A) I, apenas. E) I, II, III e IV. Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 14/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566115&matr_integracao=202001166531 2/6 D) I, II e IV, apenas. Respondido em 14/10/2020 22:17:49 Explicação: Todos os fatores influenciam. Acerto: 1,0 / 1,0 (SESAU, RO, 2017) - Técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de acordo com sua massa e carga. Pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. A técnica de separação descrita no texto é denominada: eletroforese; floculação; cromatografia. centrifugação; filtração; Respondido em 14/10/2020 22:32:24 Explicação: As demais técnicas citadas não envolvem a utilização de campo elétrico para a separação das partículas em função de seus respectivos pesos moleculares. Acerto: 1,0 / 1,0 (UFES, 2015): Considere as seguintes afirmações sobre a reação em cadeia da DNA polimerase (PCR): I. Segmentos específicos de DNA podem ser facilmente amplificados a milhões de cópias. II. A PCR pode ser utilizada em medicina forense e diagnósticos clínicos. Produtos da reação de PCR podem ser usados em clonagem. III. A PCR utiliza uma DNA-polimerase termoestável, porque, para cada etapa de amplificação, o DNA de fita dupla deve ser desnaturado pelo calor. É correto o que se afirma em: II apenas; I, II e III. I apenas; II e III apenas; I e II apenas; Respondido em 14/10/2020 22:30:59 Explicação: Todas as afirmativas estão corretas. Questão3 a Questão4 a 14/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566115&matr_integracao=202001166531 3/6 Acerto: 1,0 / 1,0 (UFRJ, 2013): Selecione a opção que contém as etapas necessárias para execução do protocolo de Western blotting: Desnaturação de proteínas; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação. Imobilização em coluna de afinidade, eluição com tampão glicina, neutralização do eluato, dot blot. Transferência de proteínas do gel para membrana; bloqueio da membrana; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação. Cromatografia de afinidade; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação. Transferência do DNA do gel para membrana; incubação com sonda hibridizadora radioativa; revelação. Respondido em 14/10/2020 22:33:19 Explicação: É necessária a transferência das proteínas para uma membrana, onde as reações antígeno x anticorpo se processarão. Colunas de afinidade não são necessárias nesse procedimento. Acerto: 0,0 / 1,0 (Unesp, 2012): A eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante (contendo Dodecil Sulfato de Sódio ou SDS) é uma técnica bastante utilizada em laboratório de biologia molecular para separação de proteínas. Assim, é correto afirmar que, na eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) para separação de proteínas: as proteínas sempre migrarão para o polo negativo quando realizada a pH 8,6; a velocidade da migração dessa proteína no gel não sofre ação da concentração do gel de poliacrilamida; as proteínas sempre migrarão para o polo positivo quando realizada a pH 8,6; quanto maior a carga negativa da proteína mais rápido ocorrerá a migração no gel; as proteínas maiores migrarão mais rápido que as proteínas menores. Respondido em 14/10/2020 22:48:06 Explicação: O SDS é um detergente aniônico que irá conferir carga elétrica negativa às proteínas. Dessa forma, durante a eletroforese, as proteínas migrarão em direção ao polo positivo de acordo com seus respectivos pesos moleculares. Acerto: 0,0 / 1,0 O método de sequenciamento Sanger: c) Requer todas as enzimas necessárias para a replicação de DNA como Helicases, Polimerases, porém, não necessita da Primase pois são adicionados iniciadores artificiais com os nucleotídeos e didesoxinucleotídeos. d) Depende do preparo de géis de acrilamida para separar os diferentes fragmentos de DNA que serão analisados. b) É baseado na incorporação de didesoxinucleotídeos que, ao serem incorporados, impedem a adição de nucleotídeos adicionais. a) É baseado na modificação química do DNA utilizando piperidina e foi, inicialmente, desenvolvido por Allan Maxam e Walter Gilbert e, mais tarde, modificado por Sanger. e) É limitada pela necessidade do uso de isótopos radioativos para a marcação dos fragmentos de DNA Questão5a Questão6 a Questão7 a 14/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566115&matr_integracao=202001166531 4/6 que serão sequenciados. Respondido em 14/10/2020 22:42:57 Explicação: Correta, letra C. Acerto: 0,0 / 1,0 (FIOCRUZ, 2010): Plasmídeos são moléculas circulares de DNA encontrados em bactérias. Elas são utilizadas como vetores para a clonagem de genes e, portanto fundamentais para o estudo de genes. Sobre as características típicas encontradas em plasmídeos utilizados para clonagem, assinale a alternativa incorreta: O plasmídeo precisa ter uma origem de replicação, que permite a multiplicação independente do DNA bacteriano; O plasmídeo precisa ter um marcador de seleção que confere resistência a bactéria a um antibiótico específico; O plasmídeo usualmente tem sítio múltiplo de clonagem que permite a utilização de várias enzimas de restrição durante a clonagem; O plasmídeo precisa ter mais de 10.000 pb de forma que seja estável na bactéria; O plasmídeo usualmente tem um sítio para anelamento de iniciadores de PCR para sequenciamento M13 próximo a sítio de inserção. Respondido em 14/10/2020 22:48:09 Explicação: Os plasmídeos são vetores ideais para insertos de DNA menores. Acerto: 0,0 / 1,0 (FUVEST, SP): "Teste de DNA confirma paternidade de bebê perdido no tsunami. Um casal do Sri Lanka que alegava ser os pais de um bebê encontrado após o tsunami que atingiu a Ásia, em dezembro, obteve a confirmação do fato através de um exame de DNA. O menino, que ficou conhecido como "Bebê 81" por ser o 81º sobrevivente a dar entrada no hospital de Kalmunai, era reivindicado por nove casaisdiferentes." Folha online, 14/02/2005 (adaptado). Algumas regiões do DNA são seqüências curtas de bases nitrogenadas que se repetem no genoma, e o número de repetições dessas regiões varia entre as pessoas. Existem procedimentos que permitem visualizar essa variabilidade, revelando padrões de fragmentos de DNA que são ¿uma impressão digital molecular¿. Não existem duas pessoas com o mesmo padrão de fragmentos com exceção dos gêmeos monozigóticos. Metade dos fragmentos de DNA de uma pessoa é herdada de sua mãe e metade, de seu pai. Com base nos padrões de fragmentos de DNA representados abaixo, qual dos casais pode ser considerado como pais biológicos do Bebê 81? Questão8 a Questão9 a 14/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566115&matr_integracao=202001166531 5/6 Casal B; Casal C; Casal E. Casal D; Casal A; Respondido em 14/10/2020 22:48:16 Explicação: Para todos os outros supostos casais, sempre encontraremos alguma banda no bebê 81 para a qual não haverá correspondência nem materna nem paterna. Acerto: 0,0 / 1,0 (IADES, 2018): Avanços recentes em engenharia genética dão início a uma revolução; cientistas são capazes de manipular DNA humano de forma prática e barata, abrindo portas para uma gama de novos estudos genéticos nas áreas de medicina e de biotecnologia. O sistema CRISPR-Cas9 constitui uma maquinaria celular que é natural em diversos organismos vivos e oferece um enorme potencial, desde a cura de doenças causadas por mutações e danos no DNA até a criação de fármacos com organismos geneticamente modificados, entre outras aplicações em biotecnologia. Em relação ao sistema CRISPR-Cas9, é correto afirmar que: visualiza antígenos nos tecidos ou em suspensões celulares utilizando corantes fluorescentes; identifica e quantifica moléculas de RNA em uma amostra de interesse, para estudo de expressão gênica; amplifica em milhares de vezes uma região específica da molécula de DNA; corresponde a pequenas moléculas de RNA associadas a uma enzima Questão10 a 14/10/2020 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?user_cod=2566115&matr_integracao=202001166531 6/6 de restrição, com capacidade de reconhecer e clivar sequências específicas de DNA exógeno. isola genes individuais do DNA humano e os insere em DNA plasmidial; Respondido em 14/10/2020 22:47:39 Explicação: A técnica de CRISPR-Cas9 isoladamente não é capaz de quantificar ou amplificar moléculas de ácido nucleico. Além disso, não é utilizada para fins de DNA recombinante ou ensaios baseados em detecção de proteínas. javascript:abre_colabore('38403','209626863','4196719568');
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