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FACULDADE ESTÁCIO UNISEB-RIBEIRÃO PRETO- BIOMEDICINA Prof.ª Mestre Camila dos Santos Alvim Francielly Camilly da Silva Tornici 202002219361 Relatório sobre Ácidos Nucleicos-Extração do DNA do Morango Ribeirão Preto, 14 de novembro de 2020 Ácidos Nucleicos-Extração do DNA do Morango Introdução O material genético dos seres vivos é formado por grandes cadeias orgânicas, basicamente constituídas de um açúcar com cinco carbonos (pentose), um íon fosfato e uma base nitrogenada. Esses três constituintes formam os chamados nucleotídeos presentes em toda molécula de DNA. O DNA, ou ácido desoxirribonucleico, é um tipo de ácido nucleico formado por uma dupla hélice de nucleotídeos unidos por pontes de hidrogênio através das bases nitrogenadas. Um outro tipo de ácido nucleico é o RNA, ou ácido ribonucleico. A diferença básica entre essas moléculas é que na molécula de DNA existem duas longas fitas de nucleotídeos enroladas em forma de dupla hélice, enquanto na molécula de RNA existe apenas uma única fita, sintetizada pelo próprio DNA. Funcionalmente, o DNA é responsável por armazenar e transmitir toda a informação genética de cada ser vivo. Já a molécula de RNA atua na síntese proteica. Além disso, as células vegetais e animais são bastante parecidas, com algumas diferenças como as paredes celulares e presença de cloroplastos. As frutas são constituídas basicamente de semente e pericarpo (três partes: casca, parte comestível e membrana que envolve a semente), como por exemplo, o abacate, o coco e o morango. O DNA dessas frutas pode ser extraído de modos muito similares. Para a extração do DNA do morango é necessário o uso de detergente, cloreto de sódio (Na Cl) e o etanol no processo. O cloreto de sódio aumenta a força iônica da solução com a ionização dos íons Na+ e Cl-. Isso proporcionará um ambiente favorável para a extração do DNA, visto que os grupos fosfatos serão neutralizados pelo sal. O laurel éter sulfato de sódio, molécula presente no detergente, tem a função de desestruturar os lipídios localizados nas membranas, promovendo a ruptura de todo o conteúdo celular, inclusive o DNA, que ficará disperso na solução. Em etanol há formação de aglomerados de DNA, pois o álcool desidrata essas moléculas, de forma que este não mais fica dissolvido no meio aquoso. Como o DNA tem menor densidade que os outros constituintes celulares, ele surge na superfície do extrato, podendo ser coletado com um palito. Além disso, quanto mais gelado o álcool, menos solúvel será o DNA. Objetivo O objetivo dessa experiência é compreender os conceitos de genética básica e demonstrar como podemos identificar e extrair o DNA do morango como um bom modelo para esse tipo de estudo e atividade prática. A partir desses conceitos básicos da genética podendo nos aprofundar mais nesse assunto e descobrir mais temas ligados a ela. Material Utilizado 1. Jaleco 2. Luvas 3. Óculos 4. Morangos 5. Saco Plástico 6. Pistilo 7. Pisseta com Água morna 8. Pisseta com Detergente 9. Cloreto de Sódio 10. Béquer de 250ml 11. Béquer de 600ml 12. 2 Bastão de Vidro 13. Etanol resfriado 14. Placa de Petri Metodologia Cortar os morangos em cubos, coloca-los dentro de um saco plástico, pegue o pestilo e amasse os morangos. Depois de amassados coloque todo o conteúdo do saco plástico no béquer de 250ml feito isso, adicione o cloreto de sódio, detergente e a água morna no sódio, detergente ter adicionados todos os componentes no béquer deve se homogeneizar todo o conteúdo. Use um dos bastões de vidro para homogeneizar o conteúdo, durante a homogeneização use um cronometro para obter resultado após um determinado tempo. Feito isso filtre o conteúdo do béquer 1. Após a filtragem coloque todo o conteúdo no béquer de 600ml, depois disso acrescente o etanol resfriado faça o mesmo procedimento utilizando o béquer que, depois de ter feito o todo processo você já obterá o DNA do morango. Com um outro bastão de vidro colete o DNA que esta acima e coloque em uma placa de Petri. Pronto você já obteve o resultado do DNA Resultados A extração da fita de DNA do morango, somente é obtida quando é adicionado o álcool bem gelado, pois somente assim ocorre a precipitação de uma grande quantidade de fita de DNA do morango, o que nos possibilita a concluir que o processo de extração do DNA do morango é simples, pois não requer métodos, substâncias ou materiais sofisticados, no entanto requer muita atenção e várias tentativas para se obter o resultado desejado. Respostas 1. Por qual motivo os morangos devem ser macerados neste experimento? R: O morango precisa ser macerado para que os produtos químicos utilizados para a extração cheguem mais facilmente em todas as suas células. 2. Qual a função da água morna no processo de extração do DNA do morango? R: O aumento da temperatura promove uma maior agitação molecular, o que ajuda a desestabilizar as membranas lipídicas. Além disso, a alta temperatura inativa enzimas que podem degradar o DNA 3. Qual a função do cloreto de sódio no processo de extração do DNA do morango? R:O Na Cl (cloreto de sódio) fornece íons que são necessários para a fase de precipitação do DNA. 4. Qual a função do detergente no processo de extração do DNA do morango? R: O detergente permite a desestruturação das moléculas de lipídios das membranas. Com a ruptura das membranas o conteúdo celular, incluindo as proteínas e o DNA, soltam-se e dispersam-se na solução. 5. Qual a função do álcool no processo de extração do DNA do morango? Por qual motivo o álcool utilizado deve ser gelado? R: O álcool desidrata o DNA, de forma que este não fica mais dissolvido em meio aquoso. Além disso, quando as moléculas são solúveis em um dado solvente, elas se dispersam neste solvente e não aquoso. Além outro lado, quando as moléculas são insolúveis em um dado solvente, elas se agrupam, tornando-se visíveis e essa é a razão de usar o álcool, pois o DNA tende a não ser solúvel nesse solvente. Quanto mais gelado estiver o álcool, menos solúvel o DNA vai estar. 6. O material precipitado coletado do béquer e transferido para o béquer é o DNA do morango? Do que este material é composto? R: No momento não, ainda precisa fazer o ultimo procedimento, ele é composto por uma membrana. 7. Qual seria a ação necessária para que apenas o DNA fosse coletado? R: Colocar o álcool, misturar e cronometrar, depois com o bastão de vidro pegar um tipo de gosma branca, o que seria o DNA e colocar na placa de petri. Conclusão O DNA consiste de dois filamentos paralelos de nucleotídeos que se enrolam um em torno do outro, formando uma dupla hélice, esta por sua vez, se ligaria por pontes de hidrogênio entre as bases. Tal estrutura foi descoberta baseando-se em estudos de raios-X. O DNA constitui os genes de todos os seres vivos, ele é um polímero constituído por macromoléculas que carregam as informações necessárias para a síntese de proteínas. A adição do sal (Na Cl) proporciona ao DNA um ambiente adequado. O sal contribui com íons positivos que neutralizam a carga negativa do DNA. Numerosas moléculas de DNA podem coexistir nessa solução. O detergente afeta as membranas porque elas são formadas por lipídeos. Com a ruptura das membranas o conteúdo celular, incluindo as proteínas e o DNA, soltam-se e dispersam-se na solução. A função de algumas dessas proteínas é manter o DNA enrolado numa espiral muito apertada. Ao colocar o álcool 70 bem gelado na solução de extração misturada com o morango macerado, foi possível observar a precipitação da fita de DNA, isso ocorreu devido ao fato de a proteína DNA ser insolúvel em álcool 70, ou seja, ela não se dissolve no álcool 70, tornando possível sua visualização. O DNA é menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares. Bibliografia Consultada https://www.passeidireto.com/arquivo/27093227/relatorio-da-extracao-do-dna-do-morangohttps://www.passeidireto.com/arquivo/27093227/relatorio-da-extracao-do-dna-do-morango https://upload.wikimedia.org/wikiversity/pt/d/de/Extracao_DNA_Morango_web.pdf https://www.docsity.com/pt/extracao-do-morango-relatorio-escrito/5176967/ https://www.passeidireto.com/arquivo/63490423/relatorio-extracao-dna-morango-3 https://www.virtuaslab.net/ualabs/ualab/307/5fb058c2dfbac.html https://www.virtuaslab.net/ualabs/ualab/307/5fb058c2dfbac.html https://upload.wikimedia.org/wikiversity/pt/d/de/Extracao_DNA_Morango_web.pdf https://www.docsity.com/pt/extracao-do-morango-relatorio-escrito/5176967/ https://www.passeidireto.com/arquivo/63490423/relatorio-extracao-dna-morango-3 https://www.virtuaslab.net/ualabs/ualab/307/5fb058c2dfbac.html https://www.virtuaslab.net/ualabs/ualab/307/5fb058c2dfbac.html
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