Bioquimica-e-Biologia-molecular

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Conhecimentos Técnicos Específicos da Área: 
Questões Objetivas (vale 1,0 ponto cada) 
 
 
1ª Questão: O estudo de inibidores é de 
fundamental importância na elucidação de vias 
metabólicas. Dentre as características dos 
diversos tipos de inibidores, qual a única 
alternativa correta? 
A) Os inibidores alostéricos são irreversíveis. 
B) Os inibidores competitivos causam redução da 
Vmax da enzima. 
C) Os inibidores não-competitivos são análogos 
não metabolizáveis de substratos. 
D) A Km e a Vmax são diminuídas pelo inibidor 
incompetitivo. 
E) Os inibidores irreversíveis têm seus efeitos 
compensados pelo excesso de substrato. 
 
 
2ª Questão: Há muito tempo já se tem 
conhecimento de que as atividades de uma 
mesma enzima determinadas em diferentes 
espécies só podem ser devidamente 
comparadas se as suas condições de ensaio 
forem devidamente padronizadas. Qual a 
alternativa abaixo não condiz com 
padronização de ensaio enzimático. 
A) A temperatura ótima de uma enzima é aquela 
na qual a enzima apresenta a sua maior atividade, 
constante por um período de tempo. 
B) A força iônica não interfere na atividade 
enzimática, apenas o tipo de tampão usado. 
C) As atividades enzimáticas devem ser 
determinadas em seu pH ótimo. 
D) Temperaturas superiores à temperatura ótima 
podem causar desnaturação de enzimas. 
E) Se possível, a concentração do substrato usado 
deve ser cerca de 10x o valor de sua Km. 
 
 
3ª Questão: A respeito da velocidade máxima 
(Vmax) e da constante Michaeliana (Km) de 
enzimas, é incorreta a afirmação: 
A) Km corresponde à concentração do substrato 
com a qual a enzima alcança 50% da Vmax . 
B) Vmax é a mais elevada atividade de uma enzima 
determinada em condições padronizadas. 
C) O valor da Km é aumentado pelo inibidor 
competitivo. 
D) O valor da Km não se altera na presença do 
inibidor não-competitivo. 
E) Os valores de Vmax e Km não são alterados pela 
presença de inibidores irreversíveis. 
 
 
 
 
 
 
4ª Questão: São vantagens das enzimas frente 
os catalisadores químicos, com exceção da 
alternativa: 
A) Baixo consumo de energia. 
B) Baixa estabilidade do preparado enzimático. 
C) Alta atividade catalítica em temperatura 
ambiente. 
D) Baixa produção de subprodutos. 
E) Alta especificidade ao(s) substrato(s) da reação. 
 
5ª Questão: São cuidados que precisamos ter na 
extração de RNA, com exceção de: 
A) Sempre que possível, coletar a amostra e 
armazená-la em TRIZOL, sob refrigeração 
adequada. 
B) Usar materiais plásticos descartáveis novos 
(tubos e ponteiras). 
C) Armazenar o extrato final na geladeira a 
aproximadamente 8 
o
C. 
D) Usar micropipetadores automáticos exclusivos 
para este procedimento. 
E) Usar luvas descartáveis de látex. 
 
6ª Questão: São importantes propriedades de 
proteínas que, uma vez conhecidas, contribuem 
para os procedimentos de sua purificação, com 
exceção de: 
A) Tamanho. 
B) Carga elétrica. 
C) Solubilidade. 
D) Velocidade máxima. 
E) Atividade biológica. 
 
7ª Questão: O espectrofotômetro é um 
equipamento de grande utilidade em um 
laboratório de bioquímica. Sobre o uso deste 
equipamento, estão corretas as afirmativas 
abaixo, exceto: 
A) Cubetas de quartzo são de uso obrigatório para 
a “leitura” de analitos que absorvem luz 
ultravioleta. 
B) Para análises fotométricas e varreduras de 
comprimentos de ondas, as amostras devem ser 
“lidas”, prioritariamente, em temperatura 
ambiente. 
C) A varredura tem sempre como objetivo a 
análise quantitativa do analito. 
D) O coeficiente de absortividade molar de um 
analito é geralmente apresentado como M
-1
.cm
-1
. 
E) No caso de análise de analitos preparados em 
solventes, a absortividade deste deve ser sempre 
descontada. 
8ª Questão: A espectrofluorimetria é um 
método muito usado na análise de atividades 
enzimáticas. No emprego deste método só está 
correta a seguinte afirmativa: 
A) A análise da fluorescência deve ser feita 
usando-se cubetas de quartzo com dois lados 
polidos. 
B) A fluorescência é muito influenciada pela 
mudança do pH do meio. 
C) A luz emitida é aquela que atinge a amostra. 
D) A excitação da amostra é feita por um feixe de 
laser. 
E) Através deste método são possíveis apenas 
análises qualitativas. 
 
 
9ª Questão: As diversas técnicas eletroforéticas 
são utilizadas como alternativas favoráveis em 
etapas finais de purificação de proteínas e na 
elucidação de sua massa molecular relativa, 
dentre outras finalidades. A respeito desta 
técnica é incorreto afirmar: 
A) Quando a “corrida” eletroforética é controlada 
pela corrente elétrica empregada, devemos levar 
em consideração o número de géis usados. 
B) A focalização isoelétrica é uma etapa 
fundamental da eletroforese bidimensional. 
C) Dodecil sulfato de sódio e β-mercaptoetanol 
são usados em conjunto para desnaturar as 
proteínas, torná-las negativamente carregadas e 
reduzir as pontes dissulfeto. 
D) A iodoacetamida é usada em separações 
eletroforéticas que visem o sequenciamento de 
proteínas pelo método de degradação de Edman, 
com o objetivo de evitar o bloqueio do N-
terminal. 
E) A eletroforese in natura é geralmente usada 
para localizar uma proteína no gel, com a 
finalidade de determinar sua massa molecular 
relativa. 
 
 
10ª Questão: São vantagens dos sequenciadores 
de proteínas que empregam espectrômetros de 
massas frente àqueles que empregam o método 
de degradação de Edman, exceto: 
A) É muito mais rápido. 
B) Seus resultados são mais fáceis de analisar e 
mais confiáveis. 
C) Sequencia proteína com N-terminal bloqueado. 
D) Não requer padrões de aminoácidos. 
E) Favorece a automatização do processo. 
 
 
 
 
11ª Questão: A respeito da zimografia, apenas é 
correto afirmar: 
A) É uma técnica eletroforética que permite a 
separação e o estudo apenas de zimogênios. 
B) É uma técnica eletroforética que permite a 
separação e a classificação de enzimas. 
C) É uma técnica eletroforética na qual as 
proteínas são reveladas por radioatividade. 
D) É uma técnica eletroforética na qual as 
proteínas são reveladas por prata. 
E) É uma técnica eletroforética na qual as 
proteínas são reveladas através de reagente 
preparado a base de zimogênio. 
 
 
12ª Questão: A respeito do sequenciamento de 
proteínas pelo o método de degradação de 
Edman, é incorreta a afirmação: 
A) Cada aminoácido demora de 30 minutos a uma 
hora para ser elucidado. 
B) A técnica necessita do emprego de padrões de 
aminoácidos. 
C) Cada aminoácido removido do peptídeo ou 
proteína em análise é separado por HPLC. 
D) A análise permite o emprego de amostras 
parcialmente purificadas. 
E) A análise dos resultados é relativamente 
simples e independe de programas especializados. 
 
 
13ª Questão: A respeito da revelação de 
proteínas em gel de poliacrilamida é incorreto 
afirmar: 
A) A revelação por Coomassie Blue é mais fácil e 
barata. 
B) A revelação por prata deve ocorrer no escuro. 
C) A revelação por prata é cerca de 5 a 10 vezes 
mais sensível que por Coomassie Blue. 
D) As revelações por Coomassie Blue e prata são 
reversíveis, embora difíceis de executar. 
E) O excesso de Coomassie Blue é geralmente 
removido por metanol. 
 
 
14ª Questão: São informações fornecidas pela 
elucidação da sequência de aminoácidos de 
uma proteína, exceto: 
A) Informações a cerca de sua estrutura 
tridimensional. 
B) Informações a cerca de sua evolução. 
C) Informações a cerca de seu nível de expressão. 
D) Informações a cerca de sua função. 
E) Informações a cerca de sua localização celular. 
 
 
 
15ª Questão: A respeito da focalização 
isoelétrica em meio líquido, só é correto 
afirmar: 
A) É uma técnica de purificação de proteínas mais 
apropriada para pequenas quantidades de 
amostras. 
B) É uma técnica de purificação de proteínas que 
separa este analito de acordo com a suamassa 
molecular relativa. 
C) É uma focalização isoelétrica feita em cuba de 
eletroforese horizontal. 
D) A proteína migra de um líquido para um gel. 
E) É uma técnica de purificação de proteínas que 
emprega grandes quantidades de amostras. 
 
 
16ª Questão: A respeito da cromatografia de 
afinidade é correto afirmar, exceto: 
A) Em muitos casos, um análogo do substrato da 
enzima é usado para eluí-la da coluna. 
B) Alteração do pH é uma boa opção para eluir o 
analito da coluna. 
C) Inibidores de enzimas geralmente são usados 
para melhorar a especificidade da ligação do 
analito que se quer purificar. 
D) Grandes volumes de amostra podem ser usados 
nesta técnica, desde que não se exceda a 
capacidade de ligação da resina ao analito que se 
queira purificar. 
E) É, provavelmente, a técnica que apresenta a 
maior facilidade e maior eficiência na purificação 
de diversas proteínas. 
 
 
17ª Questão: A respeito da eletroforese capilar é 
apenas correto afirmar: 
A) É uma técnica eletroforética que permite, em 
uma única “corrida”, separar substâncias 
positivas, negativas e neutras. 
B) Nesta técnica, de uma mistura de substâncias 
positivas, negativas e neutras - estas últimas são as 
primeiras a serem eluídas. 
C) Esta técnica requer um volume de amostra 
superior às outras técnicas eletroforéticas. 
D) O fluxo eletroosmótico tem pouca importância 
nesta técnica. 
E) É uma das mais antigas eletroforeses 
conhecidas. 
 
 
 
 
 
 
 
 
18ª Questão: A respeito do uso da 
cromatografia líquida de alta eficiência 
(HPLC) é correto afirmar, exceto: 
A) O emprego de pré-colunas aumenta a 
durabilidade de suas colunas. 
B) A fase reversa consiste do emprego de 
solventes polares para a eluição dos analitos. 
C) A fase móvel deve ser sempre submetida a 
procedimentos que visem à remoção dos gases 
dissolvidos na mesma. 
D) Para evitar a contaminação de suas tubulações, 
deve-se de preferência mantê-las preenchidas com 
metanol durante os médios e longos intervalos de 
uso. 
E) A pressões aplicadas ao seu sistema e colunas 
devem respeitar os respectivos manuais. 
 
 
19ª Questão: Primers universais são aqueles 
que permitem a amplificação de um 
fragmento de DNA presente: 
A) em um único gênero. 
B) em uma única espécie. 
C) em diferentes espécies. 
D) em diferentes gêneros. 
E) nenhuma das alternativas anteriores. 
 
 
20ª Questão: Os PCR como toda técnica 
possui controles. Quando os controles estão 
adequados, o resultado do PCR observado 
apresenta: 
A) produto de amplificação em todos os seus 
controles com o mesmo tamanho do fragmento 
observado nas amostras. 
B) produto da amplificação com tamanho 
esperado presente em apenas um dos controles. 
C) produto da amplificação ausente em todos os 
controles e amostras com produtos de 
amplificação do tamanho esperado. 
D) produto de amplificação de PCR no controle 
negativo e ausência de amplificação no controle 
positivo. 
E) as alternativas “a” e “d” estão corretas. 
 
 
21ª Questão: O resultado de um PCR pode 
ser visualizado por: 
A) SDS-PAGE. 
B) eletroforese 2D. 
C) eletroforese de sistema horizontal ou 
vertical. 
D) DGGE. 
E) PFGE. 
 
 
22ª Questão: Uma reação de sequenciamento 
se difere de uma de PCR principalmente 
por: 
A) utilizar um único iniciador. 
B) apresentar uma concentração maior de 
dNTP. 
C) não utilizar tampão com magnésio. 
D) utilizar didNTP em substituição ao dNTP. 
E) utilizar uma transcriptase. 
 
23ª Questão: No sequenciamento, o resultado 
é apresentado, simultaneamente a leitura das 
amostras, em softwares na forma de: 
A) sequência de aminoácidos. 
B) eletroferograma. 
C) sequência em formato FASTA. 
D) valores de comprimento de onda. 
E) todas as alternativas acima. 
 
24ª Questão: No estudo de proteômica 
podemos empregar: 
A) DGGE e PFGE. 
B) SDS-PAGE e Southern Blotting. 
C) 2D e Northern Blotting. 
D) Westhern Blotting e DGGE. 
E) SDS-PAGE e 2D. 
 
25ª Questão: Qual dos organismos abaixo é 
empregado na técnica de clonagem para 
viabilizar a multiplicação do material de 
interesse? 
A) Aspergillus flavus. 
B) Pseudomonas aeruginosa. 
C) Saccharomyces cerevisae. 
D) Escherichia coli. 
E) Agrobacterium tumefasciens. 
 
26ª Questão: Na clonagem, “células 
competentes” são: 
A) a marca comercial da estirpe empregada. 
B) a fase de crescimento da estirpe. 
C) o processo de eletroporação. 
D) sinônimo de “células transformadas”. 
E) as alternativas “c” e “d” estão corretas. 
 
27ª Questão: Na clonagem, a seleção das 
células transformadas é uma etapa essencial, 
possibilitada pelo emprego de: 
A) vetores. 
B) plasmídeos. 
C) genes repórteres. 
D) antibióticos. 
E) todas as alternativas estão corretas. 
 
Conhecimentos Técnicos Específicos da Área: 
Questões Discursivas (valem no máximo 11 (onze) pontos cada uma) 
- cada questão pode ser desenvolvida na página que é apresentada e em seu verso 
 
28ª Questão: Considerando uma enzima de comportamento Michaeliano, cuja Km seja aproximadamente 100 
µM, proponha um experimento para aferir esta constante cinética. Desenvolva os seguintes passos: 
1- Cite um conjunto de concentrações finais do substrato usado, 
2- Simule um gráfico de Michaelis-Menten com os possíveis resultados dos ensaios com a enzima, 
3 - Simule um gráfico de Lineweaver-Burk (duplos recíprocos) com os possíveis resultados dos ensaios com a 
enzima. Explique como a Km e Vmax podem ser calculadas através deste gráfico. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
29ª Questão: Explique fisicamente como se dão os fenômenos de fluorescência e absorvância e como tais 
fenômenos podem ser utilizados para avaliar os aspectos estruturais de macromoléculas, bem como para 
avaliar o crescimento celular. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
30ª Questão: Relacione todas as etapas desde a submissão de uma amostra à técnica de PCR até o 
sequenciamento da mesma. Descreva sucintamente cada etapa sinalizando sua importância.