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MICROSCOPIA ÓPTICA MICROSCÓPIO ÓPTICO COMO PREPARAR O MATERIAL 1. Obtenção da amostra 2. Fixação: ➢ Física: congelamento ➢ Química: formol Pra que fixar? Para interromper as reações bioquímicas e impedir a auto degradação; aumento da rigidez do tecido; preservar de microrganismos; manter a estrutura 3. Desidratação: substituir a água por álcool 4. Clarificação: torna a amostra semi transparente para permitir a passagem de luz do microscópio. Utiliza Xilol OBS: O processo de clarificação é importante porque a parafina não é solúvel no álcool, mas sim no xilol. 5. Inclusão: a amostra é colocada em um bloco de parafina 6. Microtomia: corte muito fino das amostras do bloco de parafina (1 a 10uM) 7. Coloração É possível fazer a combinação de corantes com afinidade diferente de acordo com a natureza do componente celular. Exemplo: eosina (corante ácido com afinidade por componentes básicos; cora citoplasma e proteínas) e hematoxilina (corante básico com afinidade por ácidos; cora o núcleo por causa dos ácidos nucleicos) 8. Montagem da lâmina A microscopia óptica permite acompanhar células vivas com o auxílio de câmeras digitais associadas ao microscópio
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