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Histologia e Seus Métodos de Estudos Histologia é o estudo de tecidos e do corpo e de como estes tecidos se organizam para constituir órgãos . são reconhecidos quatro tipos de tecidos fundamentais : tecido epitelial , tecido conjuntivo, tecido muscular e tecido nervoso. Preparação de tecidos para exame microscópio O procedimento mais usado no estudo de tecidos é a preparação de cortes histológicos que podem ser estudados com a ajuda do microscópio. estes tecidos passam por um conjunto de ações até chegar de fato a parte que será estudada . São elas : 1. Fixação A fixação é o tratamento do tecido com agentes que mantêm a sua arquitetura normal. O formol e o líquido de Bouin são os agentes fixadores mais utilizados em microscopia óptica, pois mantém uma imagem do tecido semelhante à in vivo, através das ligações transversais entre as proteínas. obs : É feito assim para evitar a digestão dos tecidos por enzimas presentes no interior das células ou por bactérias . obs : na microscopia de luz é usado o formaldeído a 4 % e glutaraldeído. Na microscopia eletrônica ( cuidado) é o glutaraldeído tamponado e em seguida o tetróxido de ósmio 2. Inclusão Após a fixação os tecidos precisam ser infiltrados em substâncias que lhe darão uma certa rigidez( consistência rígida). Para que ocorra essa rigidez são usados a Parafina e algumas resinas de plástico . 3. Desidratação e Diafanização A maioria dos tecidos é composta por água, por isso são necessários banhos de álcool ( 70% e 100 % ) em concentrações crescentes a fim de obter a desidratação. Após a desidratação, há o tratamento dos tecidos com xilol, para que os tecidos tornam-se transparentes, processo conhecido como diafanização. 4. Microtomia A microtomia é realizada após ter sido removido o excesso em material de inclusão. A mesma é efetuada com a utilização de um micrótomo, um aparelho que faz cortes microscópicos, variando geralmente de 5 à 10 µm (micrômetros) de espessura, em pequenas amostras de material biológico (geralmente tecidos) em blocos de resina específica (parafina) para análise em microscópio óptico. OBS : após seccionados os cortes são colocados sobre uma superfície de água aquecida, sobre lâminas de vidro onde aderem para assim serem corados . 5. Coloração Para serem estudados no microscópio, a maioria dos cortes histológicos devem ser corados , isto porque a maioria dos tecidos é incolor . A coloração também usado para fazer a distinção de cada parte do tecido. A maioria dos corantes se comportam como ácidos e básicos e tende a formar ligações eletrostáticas (salinas ) com radicais ionizantes dos tecidos . Basófilos : os componentes dos tecidos que se coram com corantes básicos . Acidófilos : os componentes dos tecidos que se coram com corantes ácidos . Tipos de Corantes Básicos : azul de toluidina e azul de metileno e hematoxilina . Ácidos : orange G, eosina,fucsina ácida. Tricrômicos : mallory e masson Obs: dentre todos os corantes ,a combinação mais usada é o de Hematoxilina e Eosina(HE) . A hematoxilina cora em azul ou violeta (núcleo e outras estruturas ácidas ) , A eosina cora o citoplasma e o colágeno em cor-de-rosa .
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