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MÉTODOS EM BIOQUÍMICA CLÍNICA Espectrofotometria Luz absorvida (ou transmitida) por uma substância em determinado comprimento de onda (metodologia óptica). Lei de Lambert-Beer: A quantidade de luz absorvida é diretamente proporcional à concentração do cromóforo na amostra. *Quanto mais concentrada, mais absorção, mais substância, mais escuro* Colorímetro: Espectrofotômetro com cor - Reações coloridas Tubo Branco ● É usado para zerar a máquina, não é água; ● Não tem amostra, mas tem todos os reagentes; ● Pode ser utilizado água em exceções, mas o contraste vai ser maior; ● É o primeiro a ser colocado na cubeta Solução Padrão ● Geralmente vem no kit; ● Pode ser preparado mas com MUITO cuidado e critério; ● É único para cada dosagem; ● Solução pura da substância analisada. Fator de calibração F= Concentração PADRÃO Absorbância PADRÃO *Absorbância - Resultado* COMO USAR A ESPECTROFOTOMETRIA - Uso de corante: um corante específico, que só se liga à molécula, a cor é proporcional à quantidade de soluto. - Uso de enzima: enzima específica para a substância que se quer fazer a dosagem. PRODUTO DA GLICOSE + ENZIMA = OLHAR ABSORBÂNCIA
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