Aula 3 - cocos gram negativos neisseria spp

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Cocos gram 
negativos
Neisseria spp.
Neisseria gonorrhoea
Neisseria meningitidis 
Introdução
• Maioria das espécies humanas habitam o trato respiratório superior
humano e não são patogênicas;
• Neisseria gonorrhoeae é considerada como patógeno independente do local
onde é encontrado;
• Neisseria meningitidis (meningococo), pode colonizar a nasofaringe sem causar
doença (5 a 15% dos adultos), mas pode ser extremamente patogênica em
determinadas condições;
• São consideradas aeróbias, mas crescem em condições anaeróbias.
Introdução
• Características gerais:
• Requer umidade;
• Amostras devem ser inoculadas imediatamente em meio apropriado;
• Crescimento ideal em temperaturas de 35 a 37oC;
• As amostras requerem uma certa quantidade de CO2 (3 a 7%) - capnofílicos
• Colônias típicas surgem em 24 a 48 horas.
Neisseria gonorrhoeae
• Diplococos Gram-negativos, riniformes, com fases côncavas adjacentes;
• aeróbios, anaeróbio facultativo;
• Possuem pili (adere a superfície de células epiteliais);
• com requerimento de crescimento fastidioso;
• Intracelulares;
• Não flagelado, não formador de esporos, encapsulado;
• Cresce melhor de 35° a 37°C, em atmosfera úmida, suplementada com CO2 ;
• Oxidase e catalase - positiva (oxidam glicose como fonte de energia);
• Sensíveis à penicilina, existem cepas resistentes;
• Não crescem na ausência de cisteína.
Infecção
• Sempre considerada patogênica, 
• Transmissão sexual ou pelo parto e indicativa de tratamento. 
• No homem causa uretrite, sendo até 50% assintomática e está relacionada a complicações 
como epididimite, prostatite e estenose uretral. 
• Na mulher causa corrimento vaginal, endocervicite, uretrite, abscesso vestibular, 
salpingooforite e doença inflamatória pélvica. 
• Pode ser isolada também na mucosa oral e anal, e em recém-nascidos pode causar uma 
conjuntivite denominada Oftalmia neonatorum. 
• A doença sistêmica disseminada pode ocorrer em 1 a 3% dos pacientes infectados, 
principalmente em assintomáticos e caracterizada por febre, tremores, lesões cutâneas, 
artrite de extremidades. 
• As lesões cutâneas são do tipo máculopustulares ou hemorrágicas, com centro de necrose. 
• Pode ocorrer meningite e endocardite.
Disponíveis em 
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&p
id=S0037-86822000000500007
Gonorreia
Gonorreia
Manifestação da gonorreia do redor da boca Secreção purulenta na região ocular
Oftalmia neonatorum. 
Disponível em https://compendiomicrobiologia.wordpress.com/tag/gonococo/ 
Diagnóstico
• Homens
• Esfregaço de secreção uretral e coloração de Gram;
• Análise de diplococos gram negativos associados a leucócitos polimorfonucleares;
• Mulheres:
• Esfregaço de amostra endocervicais e coloração por Gram;
Esfregaço de secreção uretral 
de homem com uretrite 
gonocócica
• Relatar a bacterioscopia de modo a quantificar no material analisado a presença ou ausência de 
diplococos Gram negativos com características de Neisserias em: 
-raros (+); poucos (++); Moderados (+++); muitos (++++) .
• Descrever se os microrganismos são extracelulares ou intracelulares e a quantidade de neutrófilos e de células 
epiteliais. 
Diagnóstico
• Utilização de meios de transporte quando necessários. 
• Não seletivos – Stuart ou Amies;
• Seletivos – meios Gono-Pak .
Inoculação em meio de cultura 
Não seletivos
• Ágar chocolate (hemina, NAD e hematina)
Seletivos
• Thayer Martin modificado.
• Martin Lewis
• Meio GC-Lect, (glutamina e cocarboxilase )
Os meios contem agentes antimicrobianos para inibição de outros microrganismos
TM: Antibióticos adicionados: Vancomicina (inibe bactérias Gram +) Colistina (inibe bactérias 
Gram -) e Nistatina (inibe leveduras). 
Diagnóstico
Diagnóstico
• Incubação em estufa de CO2 com nível de CO2 de 3 a 7%;
• Manter o ambiente úmido;
• Analisar as placas em 24, 48 e 72 horas;
• Submeter as colônias ao Teste de Gram, prova da catalase+ e prova de 
oxidase+;
• Teste confirmatórios podem ser utilizados como teste de utilização de 
carboidratos, testes imunológicos, testes de aglutinação em látex e 
amplificação de ácidos nucleicos (PCR). 
Neisseria gonorrhoeae em ágar Martin Lewis
Disponível em https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/product/e39-martin-lewis-with-lincomycin-for-ineisseria-gonorrhoeaei-15x100mm-plate-order-by-the-package-of-10-by-hardy-
diagnostics-media-prepared
O GonoGen II usa uma solução para 
degradação da parede celular da 
bactéria, expondo as proteínas da 
membrana externa que contém antígenos 
específicos da espécie. 
Um conjunto de anticorpos monoclonais 
ligados a um carreador é usado para 
detectar os antígenos específicos para 
Neisseria gonorrhoeae . 
O teste utiliza a colonia bacteriana 
Neisseria meningitidis
• Meningite: Infecção purulenta das meninges associadas a cefaleia, sinais 
meníngeos e febre; 
• Meningococcemia: Infecção disseminada caracterizada por trombose dos 
pequenos vasos sanguíneos e envolvimento de múltiplos órgãos; 
• Pneumonia: Forma mais branda de doença meningocócica caracterizada por 
broncopneumonia em pacientes com doença pulmonar subjacente.
Neisseria meningitidis
• Pode causar meningite, infecção sistêmica grave 
com coagulação intravascular disseminada (CIVD) 
e elevada mortalidade, podendo causar em 
associação outras infecções (conjuntivite, artrite, 
sinusite e pneumonia). 
• Em mucosas pode ser isolada em portadores sãos 
em 5 a 15 % dos indivíduos e por períodos de 
semanas a meses. 
• A transmissão se faz por vias aérea.
Neisseria meningitidis
• Microrganismo de nível 2 de biossegurança;
• Coleta de amostra de LCR, sangue e ocasionalmente escarro e swab naso e 
orofaríngeo;
• As amostras deverão ser inoculadas em meios não seletivos e seletivos;
• Meios não seletivos (LCR e sangue)
• Ágar chocolate
• Ágar sangue de carneiro
• Meios seletivos
• Thayer Martin modificado
• Martin Lewis
• NYC
NYC ágar
Diagnóstico
• Incubação em estufa de CO2 com nível de CO2 de 3 a 7%;
• Manter o ambiente úmido;
• Analisar as placas em 24, 48 e 72 horas;
• Submeter as colônias ao Teste de Gram, prova da catalase (+) e prova de 
oxidase (+).
• Teste confirmatórios podem ser utilizados como teste de utilização de 
carboidratos (oxidação de glicose e maltose), testes imunológicos, testes de 
aglutinação em látex e amplificação de ácidos nucleicos 
http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/microbiologia/mod_5_2004.pdf
Cystine Tryptic Agar
Ingredients Gm/L
Pancreatic Digest of Casein 20.0gm
Sodium Chloride 5.0gm
L-Cystine 0.5gm
Sodium Sulfite 0.5gm
Phenol Red 17.0mg
Agar 3.5gm
Final pH 7.5 +/- 0.2 at 25ºC.
Note: Additionally, CTA Media with
carbohydrate contain 10.0gm of the specified
carbohydrate.
Cystine Tryptic Agar