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Objetivos: Citar as características gerais; Citar as formas dos fungos; Classificar as infecções fúngicas de acordo com a área do corpo afetada; Citar os métodos laboratoriais de diagnostico; Descrever a resposta imune contra fungos. Fungos - características ➢ Organismo eucarioto de parede celular; ➢ Eucariotas unicelulares ou pluricelulares; ➢ Morfologicamente diversos (leveduras, filamentos, cogumelos); ➢ Heterotróficos – não produz seu próprio alimento; ➢ Saprófitos (solo, água, pele, vegetais); ➢ Mutualistas – harmônica - ou parasitas – desarmônica; ➢ Crescem em pH mais baixo que as bactérias; ➢ Parede celular composta de quitina; ➢ Patógenos; ➢ Faz parte do reino Fungi; ➢ Não armazena amido pela parede celular; ➢ Núcleo delimitado; ➢ Bastante presença de organelas. Diferentes Filos ✓ Zygomycotas ✓ Imperfeitos – reprodução pouco definida ✓ Ascomycota – agrupa fungos com potencial patogênico. o Aspergilus o Sporothrix ✓ Basidiomycota o Decompositores Forma e estrutura dos fungos Filamentos ou bolores (pluricelulares): ✓ Crescimento ramificado (hifas (podem ser septadas ou não) – micélio); ✓ Divisão por septo; ✓ Crescimento apical (para fora do meio). Leveduras (unicelulares): ✓ Divisão por brotamento ou binária; ✓ Em ágar formando colônias; ✓ Podem ter pseudohifas – brotamento ramificado; ✓ Algumas apresentam cápsulas de polissacarídeo. Direita: levedura – Candida; mais alongados – pseudohifa. Podem formar colônias ✓ Leveduriformes – Leveduras ✓ Filamentosas – Bolores ou mofos Fungos dimórficos – possui as duas formas de crescimento Apresentam duas formas de crescimento ➢ Na forma filamentosa produzem hifas aéreas e vegetativas; ➢ Na forma de leveduras se produzem por brotamento. ✓ Fungo patogênico ✓ Influência ambiental o Temperatura: o Se 37º C – levedura; o Se 25º C – filamentoso. o CO2. Dimorfismo e crescimento ✓ Forma de levedura e de bolor; ✓ Mudança reversível; ✓ Ocorre geralmente quando um fungo de vida livre se trona patogênico; ✓ Condições ambientais influenciam. Histoplasma capsulatum no formato de levedura. Histoplasma capsulatum no formato filamentoso. Paracoccidioides brasiliensis no formato de levedura. Paracoccidioides brasiliensis no formato filamentoso. Exceção: Candida apresenta pseudohifa. Estrutura dos fungos Hifas – quando são filamentosos ✓ Filamentos de células que aglomeradas formam o micélio dos fungos; ✓ Tem função de fixação, dgestão e reprodução; Diferentes tipos de hifas Continuas ou cenocíticas – não apresentam separação entre um núcleo e outro (da pra ver no microscópio); Exemplo: Zygomycotas. Septadas – apresentam separação entre um núcleo e outro. Exemplo: Ascomycotas; Basidiomycota; Deuteromycota. Vegetativas Reprodutiva Reprodução dos fungos ✓ Pode ser assexuada e sexuada Assexuada ✓ Fragmentação de artoconídios; ✓ Fissão de células somáticas; ✓ Brotamento ou gemulação do blastoconídio mãe; ✓ Produção de esporo. Atenção: reprodução de bolor ✓ Pode ser tanto assexuada ou sexuada; ✓ Sendo da mesma espécie ou espécies diferentes; ✓ Reprodução assexuada – variabilidade; Esporos ✓ Pode germinar e formas esporângio ou fusão de citoplasma. ✓ Sexuais; ✓ Fusão de núcleos seguida por meiose Assexuais ✓ Produto da mitose; ✓ Estrutura reprodutiva; ✓ Esporangiosporo; ✓ Se originam de esporângio; ✓ Ligado ao esporangióforo (hifa); ✓ Núcleos haplóides ✓ Reprodução assexuada Conídios ✓ Frutos de reprodução assexuada; ✓ Esporos livres e externos; ✓ Encontrados nas extremidades de hifas especializadas chamadas conidióforos; ✓ Podem aparecer no formato: Artrosporo; • Clasmidosporo; • Bastosporo; • Fialósporo; • Microconídio e macraconídio; • Porosporo. Diferentes morfologias: esporo assexuado Esporos sexuados - variabilidade ✓ Importante para a diversidade genética; ✓ Combinação de material genético; ✓ Formação de zigoto; ✓ Núcleos haploides se originam por meiose – recombinação genética; Tipos de espororos: ✓ Zigosporos; ✓ Ascosporos: o Internos (ascos). ✓ Basidiosporos: o Externo Outra estrutura reprodutiva: ✓ Ascosporos Reprodução de leveduras ✓ Assexuada; ✓ Brotamento ou gemulação; ✓ Fissão binária Obs: leveduras também podem formar ascósporos e basidiósporos – sexual. Exemplo de estrutura de reprodução assexuada do filamentoso: ✓ Macroconídio. Brotamento Reprodução assexuada que ocorre nas leveduras. Reprodução binária Duplicação de material genético para formar uma célula idêntica e separar de forma harmoniosa. Aspectos morfológicos dos fungos FILAMENTOS LEVEDURA FILAMENTOSO SEPTADO Fungo perfeito Tem reprodução sexuada e assexuada (só depende do ambiente) Exemplos: ✓ Zygomycota; ✓ Ascomycota; ✓ Basidiomycota Formas sexuadas ✓ Ocorre recombinação gênica; ✓ Formas assexuadas Conídeos ✓ Não tem recombinação. Fungos imperfeitos Se reproduzem apenas por esporos assexuados Exemplo: Deuteromycota. Pé de atleta. Trichophyton sp. Classificação das infecções fúngicas ➢ Micoses: • Superficiais (camada mais externa); • Cutâneas (epiderme, cabelos e unhas – tecidos queratinizados); • Subcutâneas (derme hipoderme, sebcutâneo, fáscia, músculo.); • Sistêmicas (vários órgãos). Métodos laboratoriais para diagnóstico de doenças fúngicas Métodos microbiológicos convencionais: ✓ Microscopia direta – utilização do microscópio para visualizar a estrutura da célula fúngica (coloração de Gram, Giemsa e calcoflúor) Visualização: ✓ Cultura – determinar a espécie do fungo; ✓ Identificação; ✓ Teste de susceptibilidade. Lâmina De Wood Métodos histopatológicos - biópsia: ✓ H&E ✓ GMS, PAS, Mucicarmim; ✓ Imunofluorescência direta; ✓ Hibridização in situ; Métodos imunológicos: ✓ Imunoensaios. Métodos moleculares: ✓ PCR – método direto. Métodos bioquímicos: ✓ Metabólitos; ✓ Componentes de parede celular; ✓ Enzimas Resposta imune aos agentes fúngico Resposta imune celular – ativação de macrófagos/fagocitose – mais eficiente que a humoral (produção de anticorpos: IGA, IGM, IGG IGE, etc. Sporotricose – subcutânea Criptococose Candidíase Ptiríase – superficial Resposta imune e polimorfonucleares Necessita de células com funções Granulócitos: produção de grânulos no citoplasma – resposta imune. Basófilos e mastócitos: ✓ Liberam mediadores que atraem leucócitos para o sítio de agressão; ✓ Contribuem para a passagem dessas células dos vasos para os tecidos. Eosinófilos: ativação da atividade fagocítica – especialmente quando se trato de organismos como vermes. ✓ Podem destruir microrganismos por meio da liberação de proteínas com atividade microbicida, tais como a proteína básica principal e a proteína catiônica eosinofílica. Neutrófilos ✓ Fagocitose – resposta imune inata; ✓ Bastonetes e segmentados; ✓ Produção de NO e do peróxido de hidrogênio; ✓ Vida curta tanto no sangue como nos tecidos; ✓ Encontrados nos tecidos inflamados. Agranulócito: linfócitos do tipo T (resposta celular – ativar a fagocitose) e B (responsável pela reposta umoral – se diferencia em plasmócito para secretar anticorpos) Monócitos: circulam como monócito, se ocorre lesão tecidual ele migra pra aquela região e se diferencia em macrófago pra fazer fagocitose.
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