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CITOLOGIA BACTERIANA Menores organismos e os mais simples- Grande diversidade metabólica --> heterótrofas e autótrofas - Heterótrofas --> parasitas, decompositoras e as que se associam a outros seres - Autótrofas --> por fotossíntese ou quimiossíntese - Morfologias diversas- --> Procariontes possuem duas linhagens distintas: Eubactéria e Archea CÉLULA BACTERIANA --> dimensões: 0,2 - 2,0 micrômetros de diâmetro e 1,0 - 15 micrômetros de comprimento Nucleóide --> material genético - Ribossomos --> única organela e a atividade que seriam desempenhadas por outras organelas acontecem nas bactérias em sua membrana por enzimas. - Membrana citoplasmática- Parede bacteriana- Cápsula --> carboidrato - --> Elementos: CITOSOL 1. Ribossomo bactérias: 70S --> 30S e 50S- eucariontes: 80S - --> diferente do ribossomo da célula eucarionte --> coeficiente de sedimentação distinto --> Drogas que bloqueiam a atividade do ribossomos --> antimicrobianos --> inibição de síntese proteica agindo seletivamente no ribossomo bacteriano Aminoglicosídeos: atacam a porção 30s --> mudam a conformação espacial da porção 30S e inibe a ligação dos códons - Macrolídeos: atacam a porção 50S --> impede a translocação do ribossomo - Clorofenicol --> ataca a porção 50S --> inibe as pontes peptídicas - Tetraciclinas --> inibe a ligação do RNAt com o complexo formado pelo RNAm e ribossomo - ESTRUTURA DE REVESTIMENTO 1. Parede bacteriana --> Bactéria GRAM + : membrana plasmática + camada peptidoglicano espessa (40 camadas) --> mais resistente com consistência --> Bactéria GRAM - : membrana plasmática interna + camada de peptidoglicano fina (4 a 5 camadas) + membrana externa com presença de LPS COLORAÇÃO DE GRAM Bactérias que assimilam o cristal violeta --> GRAM ( + ) - Iodo para firmar o cristal violeta- Descoloração com álcool das bactérias com a parede fina - Outro corante é usado para distinção visual na lâmina - --> método de coloração onde é usado o corante Cristal violeta --> A bactéria GRAM + por ter várias camadas de o peptidoglicano ele retém melhor o corante cristal violeta e não descora mesmo com o uso de álcool PAREDE BACTERIANA 2 açúcares que se alternam --> ácido N-acetilmurânico e N-acetilglicosamina - Cadeias de açúcares em vários planos que se ligam por ligações glicosídicas que se conectam por pontes de aminoácidos - Lisozima --> enzima presente nos fluidos corporais (lágrima, saliva..) --> atua na ligação glicosídica e fragiliza a parede bacteriana como forma de defesa - --> Peptidoglicano: componente formado de açúcar e aminoácidos enzima responsável é a proteína ligante de penicilina --> alvo das penicilinas do grupo das beta-lactâmicos (benzetacil) que gera dano na bactéria - --> Transpeptidação --> ligação cruzada do peptidoglicano entre as cadeias de açúcares MEMBRANA EXTERNA --> presente das bactérias GRAM ( - ) --> (LPS) Lipopolissacarídeo ou endotoxina --> grande potencial de gerar resposta imune Página 1 de Citologia Bacteriana --> o LPS pode se desprender da membrana e revelar a sua porção inferior --> Lipídio A --> que é ainda mais potente em gerar resposta imunes e em uma infecção avançada pode acarretar choque séptico. Cadeia de ácidos graxos inferiormente --> Lipídio A- 2 açucares fosforilados - A partir de um deles projeta-se uma cadeia de carboidratos --> Core (mesma ordem de resíduos de açúcar independente da linhagem/ cepa da bactéria) - Superiormente há sequências de carboidratos que variam dependendo da cepa da bactéria --> antígeno O - --> Estrutura do LPS OUTROS TIPOS DE BACTÉRIAS Membrana serosa • Bactérias álcool-ácido resistente (BAAR)- Não se descoram facilmente --> álcool e ácido forte para o processo - Método de coloração de Gram não se aplica - Estrutura: camada de peptidoglicano espessa assim como as gram (+) --> acima dela há outros tipo de açucares que fazem uma ponte entre a camada de peptidoglicano e a cama serosa - Camada serosa --> grande quantidade de lipídeos --> em apresentação sólida de cera e inserido dela alguns polipeptídeos --> como o PPD (derivado proteico purificado) - Obs: teste de tuberculina --> usa-se esses polipeptídeos para um teste de sensibilidade , como do tipo PPD, para inocular no paciente e avaliar se ele teve contato com a mycobacterium tuberculosis --> 24h depois ver se houve reação é positivado o teste Método Ziehl-Neelsen coram bactérias serosas --> é preciso aquecer a lâmina de esfregaço para fluidificar a membrana serosa e o corante consegue penetrar até a parede de peptidoglicano --> depois a lâmina é resfriada para que se solidifique a camada serosa e o corante se estabeleça --> ex.: Mycobacterium - Coloração de Kinyoun ( variação do Método Ziehl- Neelsen) --> que foi adapatado para corar Actinomycetos ( Também chamadas de parcialmente álcool-ácido resistentes) - Ausência de peptidoglicano • Ex.: Mycoplasma - Não tem o gene que codificam a produção de peptidoglicano - Tem forma variada devido a ausência da parede bacteriana --> adaptam sua forma ao ambiente que se encontram - Como não tem peptidoglicano qualquer medicação antimicrobiana que vise danificar a parede bacteriana deve ser descartada do tratamento --> ex.: beta lactâmicos e glicopeptídeos - POLISSACARÍDEOS SUPERFICIAIS Cápsula impede a interação das proteínas bacteriana com os receptores do sistema complemento para que haja reconhecimento do antígeno - Cápsula também pode impedir a fagocitose por não permitir a fusão do fagossomo com o lisossomo --> não ocorre digestão - 1. Cápsula --> invólucro compacto e coeso --> proteção formada por carboidratos do própria hospedeiro, oq eu dificulta o mecanismo de defesa de reconhecer a cápsula como organismo exógeno (escape imunológico)--> ex.: streptococcus aureus 2. Glicocálice --> invólucro difuso e frouxo --> ex.: Bacillus subtilis 3. Biofilme --> invólucro ainda mais difuso que reveste mais de uma bactéria, sendo elas da mesma linhagem ou não --> ajuda a se fixar em superfícies --> ex.: placa bacteriana no dente PILI (FÍMBRIA) --> estrutura proteica Adesina --> para se fixar na superfície da pele ou na mucosa - Pili sexual --> bacterias interagem por conjugação - --> Funções: FLAGELOS --> Podem estar em apenas um polo ou difuso pela superfície, único ou múltiplos --> Confere mobilidade à bactéria Ex.: Pseudomonas MARCADORES BACTERIANOS Antígeno O do LPS --> O ○ Antígeno flagelar --> H ○ Antígeno Capsular --> K ○ Na mesma espécie existem bactérias com antígeno O diferentes --> mesma espécie, mas cepas distintas - --> Sorotipagem Importante para identificar sorotipos de bactérias - Página 2 de Citologia Bacteriana Para saber que a cepa da bactéria é ou não patogênica --> pode -se usar a sorotipagem - ESPOROS BACTERIANOS --> apenas 2 gêneros podem formar esporos: Bacillus e Clostridium --> Localização: central, subterminal e terminal Ambientes inóspitos --> pouca água - Forma vegetativa --> capaz de se multiplicar - --> esporulação é uma conversão em forma de resistência 1. Primeiro a bactériaduplica seu material genético 2. Esse material se aloja na extremidade e é revestido por duas camada de revestimento --> esporo precoce 3. Ativação de genes e produção de proteínas com alto peso molecular (queratina)--> vão se depositar no revestimento formando um estrutura coesa --> córtex 4. Ocorre uma desidratação do esporo e calcificação até que se forme o esporo maduro 5. Ele pode permanecer dentro da bactéria ou a bactéria pode se romper e liberar o esporo no ambiente em sua forma basal --> podendo permanecer por anos até que voltem a se germinar FORMAS L --> as bactérias podem perder sua parede de peptidoglicano --> se estiverem em meio isotônico elas consegue sobrevier sem sofrer lise --> tanto bactérias GRAM + (Protoplastos) e - (Esferoplastos) podem se adaptar nesse processo e sobreviver --> e ainda se multiplique --> ex.: um paciente com infecção faz uso de antimicrobiano que ataca a estrutura ou inibe a produção do peptidoglicano --> a bactéria em meio isotônico se mantem em forma L e após o término do tratamento ela volta a se multiplicar e retoma a infecção --> falha terapêutica CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS Características Morfológicas • Isolados - --> Cocos Pares- Cadeias- Cachos- Tétrades- Sarcinas- Curtos- Longos - Pleomórficos - Isolado- Paliçada - --> Bacilos --> Cocobacilos --> Fusiformes --> Vibrião --> Espirilo --> Filamentosa --> Além da forma, elas podem formas arranjos: cachos, estreptococos Aspectos Tintoriais • Análise através da microscopia de campo claro - Usa-se a coloração positiva --> o agente deve ser corado - Gram-positiva○ Gram-negativa○ Gram-variáveis○ BAAR○ Parcialmente Álcool Ácido Resistente ○ Classificação:- Classificação Morfotintorial • Usado para diagnóstico de infecções --> ex.: gonorreia pela análise do corrimento vaginal em esfregaço - Quanto a necessidade de oxigênio: • Aeróbia- Anaeróbia facultativa - Anaeróbia estrita - Microaerófilas --> são capazes de sobreviver até uma determinada quantidade de O2 - OUTRAS ABORDAGENS --> Imunofluorescência --> Microscopia de campo escuro --> pesquisa de treponema pallidum (Sífilis) --> possível ver a presença e o movimento da bactéria Página 3 de Citologia Bacteriana
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