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GENÉTICA BACTERIANA GENOMA BACTERIANO --> Nucleóide: cromossomo bacteriano --> novelo de DNA fita dupla circular que está disperso no citosol da bactéria --> Plasmídeo ( nem todas bactérias apresentam) --> material genético extracromossômico --> também pode estar integrado ao cromossomo --> Elementos de transposição ( nem todas bactérias apresentam) NUCLEÓIDE --> Haploide --> para gene um único alelo, exceto quando a bactéria capta material genético externo 4 famílias de Histone-like proteins : HU, IHF, HNS, FIS- --> a estrutura do nucleóide é mantida --> Proteínas histonas Não possuem íntrons --> não realizam splicing - --> Eubactérias Obs.: Arqueobactérias possuem íntrons e realizam splicing ELEMENTOS DE TRANSPOSIÇÃO --> Sequências de inserção (IS) --> são pequenas sequências de bases presentes no genoma de organismos --> variabilidade genética das bactérias que possuem a sequência Duas partes do genoma se aproximam por influência da enzima codificada - A enzima transloca uma sequência para outra região do cromossomo - Esse processo pode ocorre internamente entre pontos distintos do cromossomo ou entre sequências do cromossomo e do plasmídeo - --> Transposons --> sequências maiores que as IS --> capazes de codificar 1 ou 2 genes que são responsáveis pelo processo de transposição --> codificam enzimas que irão executar o processo --> Vírus especiais --> ex.: Fago Mu --> vírus bacteriófago que pode atuar como elemento de transposição REPLICAÇÃO DO DNA Pol-I, Pol-II, Pol- III, Pol-IV e Pol-V - Mecanismos de correção --> baixa taxa de erro, logo ocorre pouca mutação espontânea - --> DNA Polimerase --> Primase --> Helicase --> DNA-girase Ponto de origem - Local com uma sequência de bases que representa o início da polimerização --> local de acoplamento das enzimas envolvidas no processo - --> OriC --> Após a polimerização os "dois anéis" de DNA precisam ser separados pela enzimas Topoisomerase IIA TOPOISOMERASE IIA DNA-girase --> na replicação a helicase abe as fitas e a frente o DNA se torce --> a DNA-girase corta uma das fitas de DNA para desenrolar e posteriormente ela une novamente a fita - Topoisomerase IV --> atua no processo final da replicação separando os " anéis" de DNA - --> 2 subtipos: --> DNA-girase é um componente bacteriano específico e por isso é um alo farmacológico das drogas antimicrobianas --> quinolonas --> fármacos que agem nos 2 subtipos de topoisomerase EXPRESSÃO GÊNICA Transcrição de RNAm • Apenas 1 tipo de enzima (diferente das células eucariontes que tem tipos distintos) - RNA-polimerase DNA-dependente --> vai transcrever uma fita de RNA a partir de uma de DNA - Estrutura na Holoenzima --> Fator sigma + enzima- Fator sigma --> proteína localizada próxima do material genético - --> RNA-polimerase: Obs.: Rifampicina --> antimicrobiano que age seletivamente atacando a enzima RNA polimerase bacteriana --> usada no tratamento da tuberculose Sequência consenso • O fator sigma vai se ligar na região promotora e identificar uma sequência consenso --> se essa sequência estiver ativada --> o fator sigma se acopla e a RNA polimerase pode também se acoplar para iniciar a transcrição - Após o início da atividade da RNA polimerase o fator sigma pode se desprender sem prejuízo ao processo - Crescimento da fita 5' --> 3'- Não requer prime para o processo - Página 1 de Genética Bacteriana Vários transcritos • O processo de transcrição e tradução são praticamente simultâneos uma vez que não há membrana nuclear dividindo o local dos dois processo, como ocorre na célula eucarionte - RNAm• Presença da sequência Shine-Dalgardo --> códon de iniciação das bactérias - Códon• Tabela universal, mas possui variação para as bactérias - Na tabela alguns códons que seriam de parada para as certas bactérias e algumas organelas são codificadores de aminoácidos - Mitocôndria ○ Cloroplastos○ Mycoplasma○ Paramecium ○ Ex.: UGA (códon de parada) --> triptofano - Selenocisteína (21º aminoácido) --> pode ser codificada por um códon de para (UGA) até nos seres humanos em situações específicas - ORGANIZAÇÃO DOS GENES BACTERIANOS --> genes são agrupados em uma unidade denominada de Operum --> Em uma organização policistrônica RNAm policistrônico --> ele contém todos os genes do metabolismo da lactose e são traduzidos de uma vez só - 1 RNAM --> gera mais de uma proteína que fazem parte de um mesmo metabolismo da bactéria - --> EX.: Operon da lactose OPERON DA LACTOSE --> Possui uma região controladora (promotor + operador) e mais para frente os genes --> Pode ter também um gene regulatório --> Gene repressor é codificado e gera uma proteína repressora --> a proteína repressora se liga na região operadora --> a DNA polimerase não consegue se acoplar -->Quando a bactéria está em um local com grande disponibilidade de lactose --> a bactéria capta a lactose para dentro do seu citosol --> a lactose se combina com o repressor, bloqueando a proteína --> ausência de proteína repressora na região operadora --> ativa a RNA polimerase para transcrever o Operon da lactose ---> o estímulo da molécula lactose ativa o operon OPERON DO TRIPTOFANO --> o triptofano diferente da lactose é uma molécula exógena, ou seja a própria bactéria o produz --> quando sua produção atinge uma quantidade adequado --> as moléculas de triptofano se ligam a proteína repressora --> Ativando-a e essa se acopla na região controladora do operon --> inibe a transcrição MECANISMO DE TRANSFERÊNCIA DE INFROMAÇÃO GENÉTICA Vertical --> de célula mãe para célula filha- Transformação ○ Transdução○ Conjugação ○ Horizontal --> para célula vizinha - --> Transferência de informação: Bactérias competentes em captar DNA externo e incorporar ao seu - Elas selecionam os genes de interesse para seres inseridos no genoma - Para isso elas precisam de canais competentes na sua membrana --> canais e enzimas - --> Transformação Página 2 de Genética Bacteriana --> Transdução Ocorre través de vírus bacteriófagos - Durante o processo de infecção de uma bactéria --> os vírus usam o arcabouço bacteriano para produzir as proteína virais e se replicar - Devido a um erro alguma réplica virais pode armazenar em sua estrutura o material genético bacteriano e não o viral --> na próxima célula infectada por esse vírus ele irá inserir o DNA da bactéria A em outra bactéria diferente. - --> Conjugação Ocorrem em bactéria com plasmídeo F ou de fertilidade --> esse plasmídeo codifica todos os componentes necessários para que haja comunicação entre duas bactérias - Tipos de plasmídeos --> Tipo F e Tipo R ○ Uma das duas bactérias precisam ter o plasmídeo F para que haja conjugação --> Mas outros tipo de plasmídeos podem ser transferidos no processo - A conjugação se utiliza do pili sexual para que haja a comunicação - Bactérias podem conjugar com Fungos também - Se o plasmídeo durante a conjugação estiver inserido no genoma ele pode transferir parte do genoma ou até todo o material genético --> Ex.: Bactéria Hfr (bactérias de alta frequência de recombinação) - RESISTÊNCIA A ANTIMICROBIANOS --> Nos processos de transferência de material genético os genes transferidos podem ser codificadores de proteínasde resistência a determinada droga --> Ex.: gene que codifica a penicilinase --> Gradualmente as bactérias vão aumentando seu nível de resistência MUTAÇÕES E MECANISMOS DE REPARO Efeitos sobre as bactérias:- Resistência a antimicrobianos○ Alteração antigênica --> mudança do antígeno que passam a ser reconhecidos por novos anticorpos --> nova cepa ○ Recuperação de matriz de leitura --> conseguir novamente um gene que anteriormente foi perdido (normalizando a ordem das trincas) ○ Favoráveis:- Alteração do metabolismo ○ Alteração estrutural ○ Desfavoráveis:- --> Mutações MECANISMOS DE REPARO --> Reparo por excisão --> Retirando bases errada --> Reparo por recombinação --> fragmentos externos inseridos no genoma Alquilação (bases alquiladas) --> formaldeído danifica o material genético ○ Alterações epigenéticas --> mudam a estrutura mas não mudam sequência de bases - Dímeros de pirimidina --> exposição à luz ultravioleta funde pirimidinas adjacentes o que vai gerar um erro na leitura --> enzimas podem reverter esse dímero repondo as bases - --> Reparo de modificação do DNA Página 3 de Genética Bacteriana
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