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AUTNEU-01760; Nº das páginas 7
Neurociência Autonômica: Básica e Clínica xxx (2015) xxx - xxx
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Neurociência autônoma: básica e clínica
Página inicial do jornal: www.el sevi er .com / l ocate / autneu
Eletroacupuntura crônica do ponto ST36 melhora barore fl ex função e parâmetros 
hemodinâmicos em ratos com insuficiência cardíaca
JW Lima uma , VS Hentschke uma , DD Rossato uma , b , E. Quagliotto uma , L. Pinheiro uma , E. Almeida Jr. uma ,
P. Dal Lago uma , c , JL Lukrafka c , •
uma Laboratório de Fisiologia, Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre (UFCSPA), Brasil
b Centro Universitário Franciscano, Brasil
c Departamento de Fisioterapia, Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre (UFCSPA), Brasil
• Autor para correspondência: Departamento de Fisioterapia, Universidad
Alegre - UFCSPA, Sarmento Leite, 245, 90050-170 Porto Alegre, RS, Brasil.
Endereço de e-mail: janicet@ufcspa.edu.br (JL Lukrafka).
http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
1566-0702 / © 2015 Publicado por Elsevier BV
Como citar este artigo: Lima, JW, et al., Eletroacupuntura crôni
abstrato
informações do artigo
 
Historia do artigo:
Recebido em 8 de setembro de 2014
Recebido na forma revisada em 28 de abril de 2015 Aceito em 5 
de maio de 2015
Disponível online xxxx
Palavras-chave:
Enfarte do miocárdio
Eletroacupuntura
Sistema nervoso autónomo
A eletroacupuntura (EA) tem sido usada para tratar muitas doenças, incluindo a insuficiência cardíaca (IC). Este estudo teve como objetivo 
avaliar os efeitos da estimulação crônica no ponto de acupuntura ST36 sobre os parâmetros hemodinâmicos e barore fl função ex em ratos com 
IC. Os parâmetros cardiovasculares avaliados foram frequência cardíaca (FC), pressão arterial (PA) e a re fl ex resposta cardiovascular da FC 
desencadeada pela estimulação de barorreceptores em animais com IC após infarto agudo do miocárdio (IAM). Ratos Wistar machos foram 
divididos em três grupos: Controle Sham - animais sem IC e sem EA; Grupo de controle HF - animais com IC e sem EA; e grupo HF EA - animais
com IC que receberam o protocolo de EA. Seis semanas após a indução cirúrgica do IAM, foi realizado o protocolo de IA (8 semanas, 5 vezes 
por semana). O protocolo foi aplicado com EA no ponto ST36, frequência de 2 Hz, pulso de 0,3 ms e intensidade de 1 - 3 mA por 30 min. 
Parâmetros hemodinâmicos e função dos barorreceptores foram avaliados. Não houve diferença entre os grupos nas variáveis FC, pressão 
arterial sistólica (PAS) e pressão arterial diastólica (PAD), que foram avaliadas com animais acordados (p N 0,05). Houve aumento da pressão 
arterial média (PAM) no grupo IC EA em relação ao grupo controle com IC (p b 0,05). O ganho máximo do barore fl A resposta da frequência 
cardíaca ex (Ganho) foi maior no grupo HF EA do que nos grupos HF Control e Sham Control. EA crônica no ponto ST36 aumentou a PAM e 
barore fl sensibilidade ex em ratos com IC.
© 2015 Publicado por Elsevier BV
vido
 
ea 
) 
 
1. Introdução
A insuficiência cardíaca (IC) é uma síndrome progressiva em que uma condição cardíaca 
estrutural ou funcional prejudica a capacidade do coração de fornecer sangue de forma adequada fl de
aos vários órgãos e tecidos ( Axente et al., 2011 ) O infarto agudo do miocárdio (IAM) é o fator 
etiológico mais comum para o desenvolvimento de IC ( von Haehling et al., 2009 ) Inicialmente, ocorre
um aumento da atividade simpática cardíaca para manter o débito cardíaco (DC). Os sintomas mais 
importantes que aparecem na fase inicial da IC são dispneia e intolerância ao exercício ( Antunes-Corr
et al., 2010 )
No entanto, a manutenção dessa ativação simpática leva a efeitos deletérios em todo o sistema 
cardiovascular ( Jaenisch et al., 2011 ) Nesse sentido, a HF é caracterizada por um desequilíbrio no 
simpático - atividade fisiológica vagal com ativação adrenérgica crônica, juntamente com 
comprometimento do baroro fl ex sensibilidade ( La Rovere et al., 2008 )
e Federal de Ciências da Saúde de Porto 
 Tel .: +55 51 3303 8833.
ca do ponto ST36 melhora o baroro fl funç
 
O barore fl ex é um dos mais importantes re fl exes capazes de regular a frequência cardíaca (FC
e a pressão arterial (PA), uma vez que há um efeito direto fl influência sobre o sistema nervoso 
autônomo ( Quagliotto et al., 2008 ) Os barorreceptores são sensíveis às deformações mecânicas das
paredes vasculares e promovem o controle da pressão sanguínea em curto prazo. Mudanças nas 
características do barore fl ex função, como uma redução da sensibilidade devido à hiperativação do 
sistema simpático, pode alterar o controle autonômico do sistema cardiovascular ( La Rovere et al., 
1998; Zhang e Anderson, 2014 ) Assim, a avaliação da sensibilidade do baroro fl ex tornou-se um 
importante marcador prognóstico para doenças cardiovasculares ( La Rovere et al., 2013 ) e morte 
cardíaca após infarto agudo do miocárdio ( La Rovere et al., 1998 )
Estudos experimentais foram realizados para elucidar os efeitos da acupuntura no sistema 
cardiovascular ( Middlekauff, 2004; Wang et al., 2008; Li et al., 2012 ) e na função do sistema 
autônomo ( Middlekauff et al., 2002; Sugimachi et al., 2007; Huang et al., 2011 ), incluindo mudanças 
na atividade simpática e parassimpática e também no baroro fl função ex ( Middlekauff et al., 2002; 
Tsou et al., 2004; Sugimachi et al., 2007; Xiong et al., 2011 ) Estudos realizados em animais podem 
elucidar os mecanismos pelos quais a eletroacupuntura ou acupuntura manual é capaz de gerar 
bradicardia e diminuição da pressão arterial ( Uchida et al., 2007, 2008; Li e Longhurst, 2010; Zhou
ão ex e parâmetros hemodinâmicos em ratos com insuficiência cardíaca, Auton. Neurosci. (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
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2 JW Lima et al. / Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical xxx (2015) xxx - xxx
, 
n 
 
ta 
 
 
) 
tabela 1
Parâmetros de protocolo e esquema de tratamento de eletroacupuntura.
Parâmetros de eletroacupuntura
Dispositivo modelo
Frequência
Pulso
Intensidade no fi 5 primeiros ′
Intensidade de 5 a 10 ′
Intensidade durante 20 ′
Intensidade
Tempo total
Duração do tratamento ponto ST36
NKL EL 608, fabricante 2 Hz
0,3 ms
1 mA
2 mA
3 mA
1 - 3 mA
30 minutos
5 × semana / 8 semanas
e Longhurst, 2012 ) Além disso, esses estudos têm auxiliado na compreensão dos mecanismos de 
acupuntura, demonstrando a especificidade fi cidade de cada ponto de acupuntura ( Choi et al., 2012 )
como o ponto 36 do estômago (ST36), que tem um efeito no sistema cardiovascular e autonômico ( Tje
et al., 2004; Uchida et al., 2007 )
No entanto, esta evidência é baseada principalmente em animais saudáveis e pouco se sabe 
sobre os efeitos da acupuntura na IC ( Middlekauff, 2004 ) Recentemente, um estudo bem elaborado 
demonstrou que a EA atenua a superatividade simpática, melhora a função cardíaca e a 
remodelação e reduz o tamanho do infarto em ratos com IC e postulou a EA como uma terapia nova 
e potencialmente útil para o tratamento da IC ( Ma et al., 2014 ) Além disso, a maioria dos estudos 
mostra apenas aplicações de acupuntura de curto período, o que o torna diferente fi culto para provar 
os efeitos duradouros da acupuntura em situações crônicas. Nossa hipótese é que um protocolo de 
eletroacupuntura crônica é capaz de melhorar o baroro fl sensibilidade ex em ratos com insuficiência 
cardíaca. Portanto, o objetivo principal deste estudo foi avaliar o efeito da eletroacupuntura crônica 
no ponto ST36 em barore. fl ex sensibilidade, e um objetivo secundário foi avaliar os parâmetros 
hemodinâmicos de ratos com insuficiência cardíaca.
2. Métodos
2.1. Animais
Foram utilizadosratos Wistar machos (n = 32), pesando entre 200 e 300 g (aproximadamente 60 
dias de idade), provenientes do Centro de Criação de Animais da Universidade Federal de Ciências 
da Saúde de Porto Alegre (UFCSPA). Os animais foram mantidos em gaiola com ração e água ad 
libitum em sala com ciclo claro / escuro de 12:12 h. O estudo obedeceu à Lei 11.794 de 10/08/2008 e 
ao Decreto nº 6.899 de 25/07/2009, que atualmente regulamenta as atividades de pesquisa 
realizadas com animais, bem como as diretrizes contidas nos Princípios Orientadores Internacionais 
para Pesquisa Biomédica Envolvendo Animais de. o Conselho para Organizações Internacionais de 
Ciência Médica (CIOMS). Todos os procedimentos realizados neste estudo foram previamente 
aprovados pelo Comitê de Ética e Pesquisa da UFCSPA (Protocolo 088-12).
2.2. Cirurgia para induzir infarto do miocárdio
Os ratos foram anestesiados por inalação de iso 2% fl urano (isoforina, 100 mL - Cristália) e 98% 
de oxigênio ( Munkvik et al., 2011 ) e intubado, e a anestesia foi mantida na mesma concentração de 
iso fl urana pelo tubo traqueal com oxigênio 100% e uso de vaporizador com 1 L / min - 1 fl uxo de gás 
(rotômetro para anestesia veterinária, BR-200 Vetcare, Incotec Cientí fi ca LTDA, Brasil). Os animais 
foram mantidos no nível anestésico III de Guedel ( Hecker et al., 1983; Colman et al., 2002 ) O infarto 
do miocárdio foi induzido conforme descrito anteriormente ( Pfeffer et al., 1979; Hentschke et al., 2013 
A toracotomia foi realizada ao nível do quarto espaço intercostal esquerdo, o pericárdio foi cortado e 
a artéria coronária descendente anterior esquerda ligada com fio mononáilon 6.0. A incisão torácica 
foi fechada com fios de mononáilon 3.0 e o pneumotórax drenado por sistema de sucção contínua. 
Em seguida, os animais foram retirados do arti-
fi ventilação cial e estimulada a respirar ( Francis et al., 2004 ) Como profilaxia contra infecções, foram 
administradas doses únicas de penicilina (20.000 unidades). Para o grupo Sham Controle, os 
mesmos procedimentos foram realizados, exceto pela realização da ligadura coronária.
2.3. Grupos experimentais
Após a indução do miocárdio, os animais permaneceram nas gaiolas por 6 semanas (tempo 
necessário para desenvolver o quadro de IC). Após esse período, os animais foram divididos em um 
de três grupos: ShamControl (ShamControl, n = 9), HF Control (HF Control, n = 13) e 
eletroacupuntura HF (HF EA, n = 10).
Como citar este artigo: Lima, JW, et al., Eletroacupuntura crônica do ponto ST36 melhora o baroro fl funç
2.4. Protocolo de eletroacupuntura
Os animais foram adaptados e gentilmente manuseados por 30 min, por 2 - 3 dias antes do início 
do protocolo, sempre pelo mesmo pesquisador ( Lao et al., 2004 ) Para o protocolo de EA, agulhas de
acupuntura de aço inoxidável, tamanho 0,5 mm (Complementar Agulhas, Brasil), foram inseridas 
bilateralmente no ponto estomacal 36, ST36 (ZuSanLi), que está localizado na porção anterolateral 
do membro posterior, próximo ao anterior tuberosidade tibial, no músculo tibial anterior e é inervada 
pelo profundo fi nervo bular ( Tjen et al., 2004; Li et al., 2009 ) O agulhamento foi realizado em uma 
profundidade de 5m e controle fi marcada por uma leve contração muscular ( Wu et al., 2010 ) ou por 
movimento leve e repetido da pata ( Zhou et al., 2005 ) Foi utilizado o eletroestimulador NKL (Modelo 
EL608) com oito canais. Os parâmetros usados são descritos em tabela 1 . Os animais foram 
colocados em um dispositivo desenvolvido em nosso laboratório para estimulação animal (dados não 
publicados), mas o grupo controle não recebeu EA: sem inserção de agulha ou estimulação elétrica e 
permaneceu pelo mesmo período de 30 minutos ( Figura 1 UMA).
2,5. Teste de capacidade funcional (VO 2 max)
Após a conclusão do protocolo de IA, os animais foram submetidos a um teste de capacidade 
funcional. Para determinar o consumo máximo de oxigênio
(VO 2 max), cada animal atingiu a capacidade máxima de teste do exercício adaptado de Batista ( Batis
et al., 2007 ) Os parametros
foram medidos por meio de um sistema analisador de gases para animais (AVS Projetos, São 
Carlos, SP, Brasil). O volume de ar fornecido foi de 2,5 L / min. O analisador foi calibrado com uma 
mistura de uma quantidade conhecida de gás antes de cada teste. Após um período de 15 min de 
aclimatação, o protocolo de teste foi iniciado na velocidade de 10m / min. O protocolo consistia em 
um aumento gradual da velocidade da esteira com incremento de 5m / min a cada 3min. Foi 
considerado exaustivo quando o animal permaneceu na plataforma de choque por mais de 15 s.
2.6. Preparação cirúrgica para medidas cardiovasculares em animais
Após teste de capacidade funcional, os animais foram anestesiados com cetamina (90 mg / kg 
ip) e xilazina (12 mg / kg ip). Dois cateteres fi Cheios de solução salina (NaCl 0,9%, pH 7,40, 0,6 mL) e
heparina (0,01 mL) foram inseridos na artéria e veia femoral esquerda para medir diretamente a 
pressão arterial e para a administração de medicamentos, respectivamente. A concentração de 
heparina era 200 µ heparina g / mL.
2.7. Barore fl ex sensibilidade
No dia seguinte após o implante do cateter vascular, a cânula foi conectada a uma extensão de 
40 cm (PE-50) para permitir a movimentação do animal. A cânula arterial foi conectada a um 
transdutor de pressão (Strain-Gauge, Narco BiosystemMiniature Pulse Transducer RP-155, Houston, 
Texas, EUA) conectado a um amplificador de sinal fi er (Amplificador de pressão fi er HP 8805C). Os 
sinais de pressão arterial foram registrados por 15 min e foram usados como dados de linha de 
base para cada animal (CODAS - Sistema de aquisição de dados, PC 486). o “ batida a batida ” dados
registrados foram
ão ex e parâmetros hemodinâmicos em ratos com insuficiência cardíaca, Auton. Neurosci. (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
JW Lima et al. / Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical xxx (2015) xxx - xxx 3
Figura 1. Dispositivo utilizado para estimulação de animais e animais controle (A). Registros originais de pressão arterial, pressão ventricular esquerda mostrando pressão diastólica final do ventrículo esquerdo (PDFVE, mm Hg) e pressão sistólica ventricular 
esquerda (PSVE, mm Hg) e pressão ventricular esquerda mostrando alteração máxima do ventrículo esquerdo na pressão ao longo do tempo (dP / dtmax , mm Hg / s) e alteração mínima do ventrículo esquerdo na pressão ao longo do tempo (dP / dtmin, mm 
Hg / s), respectivamente, do grupo Sham (B), grupo Controle de IC (C) e grupo IA de IC (D).
 
analisados para quantificar os parâmetros de interesse. A frequência de amostragem foi de 2.000 Hz 
por canal.
O barore fl a sensibilidade ex foi testada por infusão intravenosa de fenilefrina (Sigma Chemical 
Company, EUA) na dose de 8 µ g / 0,1 mL e nitroprussiato de sódio (Sigma Chemical Company) na 
dose de 100 µ g / 0,1 mL. A fenilefrina foi usada para induzir um aumento da PA,
mesa 2
Caracterização da amostra e as características do tecido infartado em ratos Sham e ratos com insuficiência cardíaca.
Grupos Peso corporal inicial Peso corporal final Área infartada H / BW
(g) (g) (%) (mg / g)
249,1 ± 21,53 334,2 ± 46 2,54 ± 0
253,2 ± 16,61 327,5 ± 25,22 4,6 ± 
266,3 ± 20,54 347,5 ± 49,48 3,4 ± 
Sham Control
Controle HF
HF EA
* p b 0,05 em comparação com o grupo Sham Control.
† p b 0,05 em comparação com o controle de HF.
30,67 ± 4,4
33,43 ± 5,9
Como citar este artigo: Lima, JW, et al., Eletroacupuntura crônica do ponto ST36 melhora o baroro fl funç
seguido por um re fl ex bradicardia controlada por barorreceptores. O nitroprussiato de sódio foi usado
como vasodilatador potente para reduzir a PA, seguido por um re fl resposta de taquicardia ex, que 
também é controlada por barorreceptores. Os medicamentos foram injetados somente após os 
parâmetros cardiovasculares estarem nos níveis basais do animal em repouso,e foram realizados 
aleatoriamente dentro de cada grupo experimental. Posteriormente, os valores de HR
,27
1,7 *
0,5
LV / BW
(mg / g)
1,8 ± 0,2
2,96 ± 0,6 *
2,47 ± 0,3 * †
RV / BW
(mg / g)
0,72 ± 0,33
1,35 ± 0,9
0,95 ± 0,5
Congestão pulmonar
(%)
72,52 ± 1,2
76,75 ± 3,67 *
76,15 ± 3,22
Hepático
congestionamento
72,09 ± 0,7
73,33 ± 1,72
73,24 ± 0,93
ão ex e parâmetros hemodinâmicos em ratos com insuficiência cardíaca, Auton. Neurosci. (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
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4 JW Lima et al. / Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical xxx (2015) xxx - xxx
Tabela 3
Valores relacionados ao teste de capacidade funcional.
Grupos Distância (m)
Sham Control 366,7 ± 88,20
Controle HF 219,9 ± 97,04 *
HF EA 210,3 ± 97,04 *
* p b 0,05 em comparação com o grupo Sham Control.
Tempo (s)
1036 ± 151
749,4 ± 78,75 *
695,6 ± 224,4 *
VO máximo 2
49,48 ± 19,11
42,10 ± 9,6
41,22 ± 4,92
VO basal 2
15,13 ± 9,17
18,69 ± 9,57
19,12 ± 4,3
Reserva VO 2
34,34 ± 11,69
23,42 ± 5,57
22,10 ± 6,26
nt 
 
]. 
correspondentes aos valores de MAP do período da linha de base, bem como aumentos ou reduções 
da PA, foram usados para a análise do barorreceptor fl respostas ex-mediadas. Estas respostas de 
HR foram avaliadas por um especi fi c programa de computador para o ajuste da curva sigmoidal 
conforme descrito anteriormente (Sigma Plot, EUA) ( Head e McCarty, 1987; Quagliotto et al., 2008 )
As mudanças de MAP estiveram na faixa de 10 - 30mmHg e incluiu vários pontos de dados para 
compor curvas sigmoidais. Todas as mudanças no MAP e HR foram medidas e barore fl ex 
sensibilidade foi determinada por fi ajustar as mudanças de MAP e HR para uma equação logística 
sigmoidal, como segue:
RH ¼ P 1 º P 2 = ½ 1 º exp P 3: ð MAPA - P 4 º
onde P 1 topo 4 parâmetros médios: P 1 = platô de FC inferior (em bpm), P 2 =
Faixa de FC entre os platôs da curva superior e inferior (em bpm), P 3 = um coeficiente de curvatura fi cie
que é independente do intervalo, e P 4 = MAP na metade de
a faixa de HR (MAP 50, inmmHg), que também é o ponto de cálculo do ganho máximo. O platô 
superior foi calculado pela soma
de P 1 e P 2 ( Quagliotto et al., 2008; Neckel et al., 2012 )
2.8. Preparação cirúrgica para avaliação hemodinâmica
No dia seguinte, após barore fl Ex avaliação de sensibilidade, os animais foram anestesiados com
cetamina (90 mg / kg ip) e xilazina (12 mg / kg ip), e uma pequena incisão foi feita no pescoço para 
inserir um cateter na artéria carótida direita. A pressão arterial foi registrada pelo mesmo sistema de 
aquisição já mencionado. Após registrar a pressão arterial por 5 min, o mesmo cateter foi 
posicionado no ventrículo esquerdo para registrar a pressão ventricular por 5 min. Esses registros 
foram usados para determinar a pressão sistólica do ventrículo esquerdo (PSVE), obtida a partir da 
contração (+ dP / dt) e do relaxamento ( - dP / dt) do VE, respectivamente, e a pressão diastólica final 
do ventrículo esquerdo (PDFVE) ( Rossato et al., 2015 )
2.9. Hipertrofia cardíaca e congestão pulmonar e hepática
Após a avaliação hemodinâmica, os animais foram sacrificados fi cedido usando uma overdose 
de anestésico (100 mg / kg de pentobarbital ip) para coleta de tecido. O coração, fígado e pulmões 
foram coletados. O ventrículo esquerdo (VE) e o ventrículo direito (VD) foram dissecados, separados 
e pesados. As relações de peso do ventrículo esquerdo foram determinadas de acordo com o peso 
corporal (VE / PC) e o peso do ventrículo direito em comparação com o peso corporal (VD / PC) para 
avaliar a hipertrofia cardíaca. O fígado e os pulmões de cada animal foram desidratados (80 ° C) por 
48 he pesados novamente para determinar a porcentagem de água disponível no tecido para 
determinar a congestão hepática e pulmonar.
Tabela 4
Variáveis hemodinâmicas em ratos sham e em ratos com indução de IM.
Grupos LVEDP (mm Hg)
Sham Control 3,6 ± 1,9
Controle HF 18,05 ± 8,6 *
HF EA 15,5 ± 7,7 *
* p b 0,05 em comparação com o grupo Sham Control.
LVSP (mm Hg)
119,1 ± 18,8
89,07 ± 15,2 *
85,3 ± 16,7 *
Como citar este artigo: Lima, JW, et al., Eletroacupuntura crônica do ponto ST36 melhora o baroro fl funç
2,10. Área de infarto
O anel intermediário (~ 3 mm) do ventrículo esquerdo foi seccionado em amicrótomo em seções 
de 5 µ mwith 100 µ intervalos m entre as seções ( Frantz et al., 2003 ) As seções foram coradas com 
hematoxilina e eosina (HE) nas lâminas histológicas. O programa de computador Image Pro-plus 6.1 
(Media Cybernetics, Silver Spring, EUA) foi usado para determinar o tamanho da área de infarto a 
partir de fotografias digitalizadas das lâminas contendo seções de tecido. A área de infarto, expressa 
como uma porcentagem da área total do ventrículo esquerdo, foi calculada dividindo a soma da área 
de infarto pela soma de todas as seções da área do ventrículo esquerdo (incluindo aqueles sem 
infarto) e multiplicada por
100, conforme descrito anteriormente ( Pfeffer et al., 1979 )
2,11. Análise estatística
O Kolmogorov - O teste de Smirnov foi usado para avaliar a distribuição normal de todas as 
variáveis. Os valores foram expressos em valores médios e desvio padrão (DP). O teste ANOVA 
one-way foi realizado para analisar todas as variáveis entre os grupos, seguido do teste post hoc de 
Bonferroni. O valor de p b 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. O software SigmaPlot 
11.0 (Systat Software Inc., San Jose, EUA) para windows foi utilizado como ferramenta 
computacional para análise estatística de dados. O software GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, 
San Diego, CA, EUA) forWindows foi utilizado como ferramenta computacional para posterior análise 
e elaboração de gráficos.
3. Resultados
Tabelas 2 e 3 apresentam o modelo de IC apresentando o tecido principal e as alterações 
fisiológicas causadas pela IC.
mesa 2 resume os dados sobre peso corporal, tamanho do infarto, hipertrofia cardíaca total, 
hipertrofia ventricular esquerda, hipertrofia ventricular direita e congestão pulmonar e hepática em 
ratos do Controle Sham (n = 9), Controle HF (n = 13) e EA HF ( n = 10) grupos. Apenas os animais do 
grupo Controle HF apresentaram signi fi valores significativamente mais elevados para hipertrofia 
cardíaca total em comparação com o grupo ShamControl [4,6 ± 1,7 vs. 2,5 ± 0,2 p b 0,05; F (2,31) = 
8,643; p ANOVA =
0,0011]. Em relação à hipertrofia ventricular esquerda, os animais do grupo HF EA apresentaram 
valores maiores em comparação ao grupo ShamControl, mas valores menores quando comparados 
ao grupo HF Control [2,4 ± 0,3 vs. 1,8 ± 0,2 vs. 2,9 ± 0,6 p b 0,05; F (2,31) = 20,28; p ANOVA b 0,0001
Apenas os animais HF Control apresentaram congestão pulmonar quando comparados ao 
ShamControl [76,7 ± 3,6 vs. 72,5 ± 1,2 p b 0,05; F (2, 31) =
4,895, p ANOVA = 0,0145].
Em relação ao teste de capacidade de exercício, não houve diferença no VO 2
VO máximo, basal 2 e reserva VO 2 entre grupos. Animais HF mostraram
+ dP / dtMax (mm Hg / s)
5698 ± 2235
3191 ± 1210 *
4307 ± 1230
- dP / dtMax (mm Hg / s)
- 4391 ± 1497
- 2494 ± 764 *
- 3064 ± 826,1
ão ex e parâmetros hemodinâmicos em ratos com insuficiência cardíaca, Auton. Neurosci. (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
JW Lima et al. / Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical xxx (2015) xxx - xxx 5
 
 
Tabela 6
Barore fl resposta ex.
Grupos MAPA 50
(mm Hg)
95,15 ± 8,26
86,62 ± 8,45
93,07 ± 5,64
Faixa de RH
(bpm)
121,3 ± 45,9
100,8 ± 17,81
101,1 ± 41,73
Planalto superior
(bpm)
457,4 ± 46,26
430,3 ± 23,05
465,7 ± 25,77
Planalto inferior
(bpm)
329,1 ± 30,48
329,5 ± 24,08
371,2 ± 39,65
Sham Control
Controle HF
HF EA
 7,4 
 
 
signi fi valores significativamente mais baixos em relação à distância percorrida [219,9 ± 97,0 e 210,3 
± 97,0 vs. 366,7 ± 88,2 p b 0,05; F (2,14) = 6,288; p ANOVA = 0,0136]e a duração do teste [749,4 ± 
78,75 e
695,6 ± 224,4 vs. 1036 ± 151 p b 0,05; F (2,14) = 6,337; p ANOVA =
0,0132] em comparação com os animais do grupo de controle simulado ( Tabela 3 )
3.1. Variáveis hemodinâmicas
Tabela 4 apresenta os dados referentes às variáveis hemodinâmicas dos grupos Sham Control 
(n = 8), HF Control (n = 9) e HF EA (n = 9). Ratos com IC apresentaram maior pressão diastólica final 
do que os animais Sham Control [18,0 ± 8,6 vs. 15,5 ± 7,7 vs. 3,6 ± 1,9 p b 0,05; F (2,25) = 10,37; p 
ANOVA = 0,0006] e uma pressão sistólica ventricular esquerda menor em comparação com animais 
Sham Controle [89,0 ± 15,2 e 85,3 ± 16,7 vs. 119,1 ± 18,8 p b 0,05; F (2,27) = 11,94; p ANOVA = 
0,0002]. Por outro lado, as variáveis de contração e relaxamento dos ventrículos do grupo Controle 
HF apresentaram valores menores em comparação com o grupo Controle Sham [3191 ± 1210 vs. 
5698 ± 2235 p b 0,05; F (2,26) = 5,057; p ANOVA = 0,0147] e [ - 2494 ± 764 vs.
- 4391 ± 1497 p b 0,05; F (2,23) = 6,401; p ANOVA = 0,0068], respectivamente. Os registros originais 
são mostrados em Figura 1 B - D.
3.2. Dados hemodinâmicos dos animais enquanto eles estão acordados
Os dados hemodinâmicos na condição de vigília dos animais ShamControl (n = 9), HF Control (n 
= 9) e HF EA (n = 8) são representados em
Tabela 5 . Não houve diferença na FC [364,3 ± 45,9 vs. 355,3 ± 35,9 vs. 385,8 ± 46,3; F (2,27) = 
1,107; p ANOVA = 0,3461] e pressão arterial diastólica (DAP) [86,2 ± 8,5 vs. 79,2 ± 8,8 vs. 87,1 ± 7,7 
p b 0,05; F (2,23) = 2,739; p = 0,0877] entre os grupos. Os animais do grupo Controle de IC 
apresentaram pressão arterial sistólica (PAS) menor que a dos animais Sham [106,3 ± 12,9 vs. 124,6 
± 6,1 p b 0,05; F (2,25) = 8,998; p ANOVA = 0,0013] e embora não houvesse signi fi diferença 
significativa, os valores da SAP do grupo HF EA foram semelhantes aos do grupo Sham Control. 
Animais HF EA tiveram signi fi valores de PAM significativamente mais altos em comparação com o 
controle de HF e valores semelhantes em comparação com os animais Sham [102,9 ± 6,9 vs. 91,7 ± 
9,5 e
103,8 ± 5 p b 0,05; F (2,25) = 7,438; p ANOVA = 0,0032].
3.3. Barore fl ex resposta
Em relação ao re fl mediada pelos barorreceptores dos grupos ShamControl (n = 6), HF Control 
(n = 5) e HF EA (n = 5), não houve diferença nos valores da pressão arterial média na metade do
alteração da frequência cardíaca (MAP 50) no barore fl curva ex, que representa o nível da PA 
apresentado pelo barore máximo fl ex ganho após o
infusão de fenilefrina e nitroprussiato de sódio para estimular a fl resposta ex [95,1 ± 8,2 vs. 86,6 ± 8,4
vs. 93,0 ± 5,6; F (2,15) =
0,8540; p ANOVA = 0,4483] entre os grupos. Além disso, nenhuma diferença foi encontrada nos 
valores em relação à amplitude equivalente à faixa de operação do barorreceptor re fl ex [121,3 ± 45,9
vs. 100,8 ± 17,8 vs.
101,1 ± 41,7; F (2,16) = 0,5336; p ANOVA = 0,5980], o platô superior que é a resposta máxima da 
FC induzida pela diminuição da PA [457,4 ± 46,2 vs. 430,3 ± 23,0 vs. 465,7 ± 25,7; F (2,15) = 1,224; 
p ANOVA = 0,3258], assim como os valores do platô inferior que representam a diminuição máxima 
da FC induzida pelo aumento da PA
Tabela 5
Dados hemodinâmicos dos animais acordados após o protocolo de IA.
Grupos HR (bpm) DAP (mm Hg) SAP (mm Hg)
Sham Control 364,3 ± 45,91 86,22 ± 8,52 124,6 ± 6,13
Controle HF 355,3 ± 35,97 79,23 ± 8,83 106,3 ± 12,9 *
HF EA 385,8 ± 46,35 87,15 ± 7,74 116,7 ± 8,26
* p b 0,05 em comparação com o grupo Sham Control.
MAP (mm Hg)
103,8 ± 5
91,72 ± 9,5 *
102,9 ± 6,9 †
Como citar este artigo: Lima, JW, et al., Eletroacupuntura crônica do ponto ST36 melhora o baroro fl funç
[329,1 ± 30,4 vs. 329,5 ± 2,4 vs. 371,2 ± 39,6; F (2,15) = 1,830; pANOVA = 0,1994], após o 
barorreceptor re fl estimulação ex, respectivamente ( Tabela 6 )
Ganho do Barore fl ex é maior no grupo HF EA do que no grupo Sham Control [ - 15,01 ± 3,1 vs. -
± 3,6 p b 0,05; F (2,15) = 4,128; p ANOVA = 0,04] ( Figs. 2 e 3 )
4. Discussão
Até onde sabemos, este é o fi primeiro estudo experimental que foi conduzido a fim de avaliar os 
efeitos crônicos da EA diretamente no barorreceptor fl função ex em animais com IC. Neste estudo, a 
eletroacupuntura crônica do ponto ST36 aumentou o barore fl sensibilidade ex em animais com HF. 
Além disso, a IA reduziu a hipertrofia do VE e aumentou a PAM em comparação com os animais do 
grupo Controle HF.
A insuficiência cardíaca é uma doença de alta morbimortalidade que gera altos custos de 
internação e medicamentos, tanto no Brasil como no mundo ( Azambuja et al., 2008; Roger et al., 
2012 ) A hiperativação do sistema nervoso simpático comumente observada na IC é acompanhada 
pela atenuação do baroro fl ex sistema ( Zhang e Anderson, 2014 ) Este é um importante determinante
da regulação neural do sistema cardiovascular, que atualmente apresenta relevância clínica na 
predição de morte súbita cardíaca ( La Rovere et al., 2008 ) e também o valor prognóstico em 
pacientes com insuficiência cardíaca ( La Rovere et al., 1998 ) Outros estudos mostraram que a EA 
pode modular o sistema nervoso autônomo ( Uchida et al., 2008; Zhang e Anderson, 2014 ) Essa 
modulação parece estar relacionada à diminuição da atividade do sistema simpático, que pode ser 
evidenciada pela manutenção do efeito bradicárdico mesmo após a secção do nervo vago ( Uchida et 
al., 2008 ) Alguns estudos demonstraram o efeito agudo da eletroacupuntura do ponto ST36 no 
barore fl ex ( Michikami et al., 2006; Sugimachi et al., 2007, 2008 ) Estes estudos foram realizados em
coelhos, e o principal fi os achados indicaram que a estimulação eletroacupuntura do ponto ST36 não 
afeta a resposta periférica, mas está relacionada à resposta neural, referindo-se ao centro vasomotor 
( Sugimachi
Figura 2. Resposta da variação do ganho médio ou baroro médio fl ex sensibilidade após o re fl ex Estimulação de 
Barorreceptores. Os valores são mostrados como média (± SD) da variação do barore fl sensibilidade ex (ganho bpm / 
mm Hg). Controle Sham (n = 6): animais sem insuficiência cardíaca (IC) e sem eletroacupuntura (AE). Controle HF (n 
= 5): animais com HF e sem EA. HF EA (n = 5): animais com HF e EA. Houve uma significância estatística fi diferença 
significativa ao comparar o grupo HF EA com o grupo Sham Control (p b 0,05).
ão ex e parâmetros hemodinâmicos em ratos com insuficiência cardíaca, Auton. Neurosci. (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
6 JW Lima et al. / Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical xxx (2015) xxx - xxx
dução 
Hg) 
Fig. 3. A curva da pressão arterial média nos modos fi cátion de acordo com a variação da freqüência cardíaca. Modi fi análise
da curva ed da pressão arterial média (PAM em mmHg) de acordo com a variação da freqüência cardíaca (FC em 
bpm) como um barorreceptor fl teste de resposta ex. Houve uma significância estatística fi diferença de escala nos 
valores do grupo HF EA em comparação com o ShamControl e o HF Control (p b 0,0001) grupos. O deslocamento da 
curva para a direita no grupo HF EA (n = 5) será observado, pois o mesmo valor de HR gera mais resposta de PAM.
 
5 
et al., 2007 ) Além disso, esses estudos demonstram que o barore fl ex é preservado durante a 
estimulação eletroacupuntura, o que sugere a aplicação desta técnica para tratar doenças 
cardiovasculares com hiperatividade do sistema nervoso simpático ( Michikami et al., 2006 ) 
Entretanto, nesses estudos, os efeitos da redução da PA são eliminados imediatamente ao final da 
estimulação da eletroacupuntura, indicando que não há efeito de longo prazo da eletroacupuntura. 
Após a avaliação do protocolo de eletroacupuntura crônica, demonstramos que é provável que haja 
efeitos duradouros da acupuntura em situações crônicas. Da mesma forma, nosso fi descobertas no 
barore fl As exsensibilidades estão provavelmente relacionadas com a ativação reduzida do sistemanervoso simpático EA. Podemos atribuir esse mecanismo à redução da hipertrofia do VE 
apresentada neste estudo. Embora não tenha havido diferença entre os grupos HF IA e HF Controle, 
os valores do grupo HF IA em relação à pressão arterial sistólica e os obtidos na contração e 
relaxamento apresentaram comportamento semelhante, apresentando valores mais próximos aos 
encontrados no grupo Sham e maiores que aqueles encontrados no grupo de controle de HF ( Tabelas
4 e 5 ) Nosso estudo mostra uma redução da hipertrofia do VE no grupo EA. Esses dados corroboram 
o fi resultados demonstrando que a EA melhorou a estrutura e função cardíaca em animais com este 
modelo de IC e, adicionalmente, reduziu a atividade simpática ( Ma et al., 2014 ) Contudo, Ma et al. 
(2014) não avaliou o barore-
fl sensibilidade ex e, neste contexto, nosso estudo demonstrou para o fi primeira vez que a EA 
melhora o barore fl função ex em ratos HF.
Observou-se redução da SAP e do MAP em animais com IC, que está diretamente relacionada 
ao tamanho do infarto. Essa redução foi observada neste modelo de indução de IAM e 
provavelmente ocorre devido à capacidade dos animais de sobreviver a infarto maciço do coração. 
As reduções SAP e MAP são propostas como um mecanismo compensatório para a perda da função 
ventricular esquerda e aumento da PDFVE ( Pfeffer et al., 1979 ) Porém, podemos acreditar que 
houve melhora da função ventricular, aumentando assim a PAM nos animais que receberam 
tratamento com IA em relação aos do grupo Controle com IC. Ambos os efeitos hipotensores e 
bradicárdicos do ponto ST36 demonstrados em animais saudáveis estão relacionados à 
estimulação do nervo fibular profundo, enquanto outros pontos não tiveram este mesmo efeito 
(especi fi cidade) ( Tjen et al., 2004; Choi et al., 2012 ), como o ponto da bexiga 21 (B21), localizado a 
mm do processo espinhoso da 12ª vértebra torácica ( Iwa et al., 2006 ), que não tem efeito sobre o 
sistema nervoso autônomo ( Imai et al., 2009 ) Da mesma forma, estudos têm mostrado que, quando 
comparados com pontos inativos para desfechos cardiovasculares, pontos localizados em nervos 
somáticos profundos fornecem mais estímulo aos neurônios pré-motores simpáticos na região 
ventromedial rostral.
Como citar este artigo: Lima, JW, et al., Eletroacupuntura crônica do ponto ST36 melhora o baroro fl funç
medula (RVM), que é uma área que desempenha um papel importante na regulação da PA ( Zhou e 
Longhurst, 2012 ) Ao mesmo tempo, a RVM também é inibida pela medula ventrolateral caudal pela 
estimulação dos barorreceptores ( Schreihofer e Guyenet, 2002 ) indicando que eletroacupuntura e 
barore arterial fl ex divide uma via de ativação central comum ( Michikami et al., 2006 )
Sobre a capacidade funcional, semelhante aos nossos resultados, outros estudos não mostraram signi fi re
de escala no grupo de controle de IC em comparação com
Sham Control em Max VO 2 ( Musch et al., 2002; Batista et al., 2007; Moreira et al., 2013; 
Gomes-Santos et al., 2014 ) Por exemplo, Musch
et al. (2002) categorizou ratos que foram submetidos a IM como tendo disfunção ventricular esquerda 
moderada (PDFVE b 20 mmHg) ou como tendo disfunção ventricular esquerda grave (PDFVE N 20mm
e mostrou que ratos com disfunção ventricular esquerda moderada não tinham signi fi não posso 
recuperar
redução em VO 2máx em comparação com os ratos Sham Control. Nossos ratos com insuficiência cardíaca (grupos 
HF controle e HF EA) tiveram um LVEDP ( b 20 mmHg) semelhante
àqueles encontrados nos ratos com disfunção ventricular esquerda moderada em
Musch et al. (2002) estudo e, da mesma forma, nenhuma redução no Max VO 2 No entanto, nosso 
estudo mostrou uma redução na distância percorrida (metros) e
tempo do teste (segundos) em ratos HF controle e HF EA e demonstraram que nosso modelo de 
infarto do miocárdio em ratos é eficaz para desenvolver comprometimento da capacidade funcional, 
um importante marcador da síndrome de IC. Curiosamente, o protocolo de eletroacupuntura utilizado 
em nosso estudo não é capaz de melhorar o consumo máximo de oxigênio e as variáveis de 
capacidade funcional. Acreditamos que um efeito global da EA não é suficiente fi suficiente para 
efetivamente gerar melhora na capacidade funcional de ratos com IC e, apesar da função 
hemodinâmica, provavelmente nenhuma melhora periférica (muscular) foi observada após o 
protocolo de eletroacupuntura.
Uma limitação do nosso estudo foi a indisponibilidade do grupo de controle da AE, o que nos 
permitiria atribuir a esses efeitos específicos fi calmente à estimulação do ponto ST36. Além disso, 
durante o estudo, alguns animais foram perdidos, principalmente durante a avaliação do barore. fl ex 
função, por se tratar de uma técnica complexa que envolve a infusão de medicamentos que provoca 
o aumento e diminuição da pressão em animais já fragilizados pela própria IC, o que explica a 
diferença amostral nesta variável.
Em conclusão, este estudo demonstra que a eletroacupuntura crônica do ponto ST36 em 
animais com IC melhorou o barore. fl ex função, provavelmente devido à diminuição da ativação do 
sistema nervoso simpático, e promoveu o aumento da PAM nesses animais, melhorando assim a 
função ventricular. Porém, mais estudos são necessários para esclarecer os mecanismos pelos quais 
essas alterações ocorrem, e avaliações diretas do sistema nervoso simpático são necessárias para o 
completo entendimento desse assunto.
 
Vigarista fl ict de interesse
Os autores afirmam que não existem con reais ou potenciais conhecidos
fl assuntos de interesse no presente relatório.
Agradecimentos
Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre (UFCSPA), Coordenação de 
Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) e Conselho Nacional de Desenvolvimento 
Cientí fi co e Tecnológico (CNPq).
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http://dx.doi.org/10.1016/j.autneu.2015.05.002
	Chronic electroacupuncture of the ST36 point improves baroreflex function and haemodynamic parameters in heart failure rats
	1. Introduction
	2. Methods
	2.1. Animals
	2.2. Surgery to induce myocardial infarction
	2.3. Experimental groups
	2.4. Electroacupuncture protocol
	2.5. Functional capacity test (VO2 max)
	2.6. Surgical preparation for cardiovascular measures on animals
	2.7. Baroreflex sensitivity
	2.8. Surgical preparation for haemodynamic evaluation
	2.9. Cardiac hypertrophy and pulmonary and hepatic congestion
	2.10. Infarction area
	2.11. Statistical analysis
	3. Results
	3.1. Haemodynamic variables
	3.2. Haemodynamic data of the animals while they are awake
	3.3. Baroreflex response
	4. Discussion
	Conflict of interest
	Acknowledgments
	References