APS - BIOMED TECNOLOGIA GENÉTICA DIAGNÓSTICO MOLECULAR E BIOINFORMÁTICA

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JULIA CRISTINA VICENTE – RA 6541237 
 
Texto Introdutório: A técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction – Reação em Cadeia da Polimerase) 
é atualmente amplamente utilizada para o sequenciamento de genes e diagnóstico de doenças 
hereditárias, identificação de impressões digitais do material genético e detecção e diagnóstico de 
doenças infecciosas. 
Por ser um método direto de alta sensibilidade, a reação em cadeia de polimerase está sendo 
considerada uma grande aliada na detecção de doenças infecciosas. Sua versatilidade, que permite a 
aplicação em diversos materiais biológicos, aliada à rapidez de análise é outro diferencial da técnica 
(http://www.cjflash.com.br/cace/informe,biologia-molecular-por- pcr,7.html). 
ATIVIDADE 1: 
1) Assista os vídeos disponíveis nos links: 
PCR: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- electrophoresis/v/the-
polymerase-chain-reaction-pcr 
Eletroforese: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- 
electrophoresis/v/gel-electrophoresis-dna 
ATIVIDADE 2: Leia os textos disponíveis nos links: 
Reação em cadeia da polimerase: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna- 
sequencing-pcr- electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr 
Eletroforese em gel: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- 
electrophoresis/a/gel-electrophoresis 
Sequenciamento de DNA: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing- pcr- 
electrophoresis/a/dna-sequencing 
ATIVIDADES A SEREM DESENVOLVIDAS 
 
1- Qual seria o fluxo em um laboratório de biologia molecular para se obter o resultado de um paciente que está realizando 
uma pesquisa de bactéria por PCR? 
a) Extração de DNA --> PCR --> Eletroforese 
b) Eletroforese --> PCR --> Extração de DNA 
c) PCR --> Eletroforese --> Extração de DNA 
d) Eletroforese --> Extração de DNA --> PCR 
e) PCR --> Extração de DNA --> Eletroforese 
 
Resposta: a) Extração de DNA --> PCR --> Eletroforese. 
 
2- A reação da PCR consiste em amplificar um fragmento (região específica) de DNA milhões de vezes, para que isso ocorra 
precisamos preparar a reação previamente. Que reagentes são necessários para a montagem de uma reação de PCR? 
a) água, buffer, MgCl, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA 
b) água, buffer, helicase, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA 
c) água, buffer, Mgcl, DNTPs, DNA polimerase, primers e DNA 
d) água, buffer, helicase, DNTPs, DNA polimerase, primers e DNA 
e) água, buffer, primase, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA 
 
Resposta: a) água, buffer, MgCl, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA 
3- Qual é o propósito para o qual a PCR é usado? 
a) Analisar a expressão gênica do DNA 
b) Extrair o DNA de células 
http://www.cjflash.com.br/cace/informe,biologia-molecular-por-
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-
c) Amplificar em fragmento específico de DNA 
d) Fazer todo o processo de replicação igual a célula 
e) Analisar o tRNA presentes nas células 
 
Resposta: c) Amplificar em fragmento específico de DNA 
 
4- O que acontece com o DNA quando o termociclador atinge a temperatura de 90-95 ° C por 30 segundos no primeiro 
passo da PCR? 
a) Os primers se ligam na fica única de DNA 
b) A taq polimerase sintetiza as novas fitas do DNA, utilizando os nucleotídeos provenientes da DNTP 
c) Ocorre a desnaturação de proteínas 
d) As fitas de DNA se separam 
e) Ocorre a renaturação da molécula de DNA 
 
Resposta: d) As fitas de DNA se separam 
 
5- As seguintes etapas constituem a reação em cadeia da polimerase (PCR), onde milhões de cópias do fragmento de DNA 
que se quer amplificar são gerados, 
I. Desnaturação do DNA genômico (94oC, 30s). 
II. Anelamento dos iniciadores no DNA genômico (55-65oC, 30s). 
III. Desnaturação do DNA genômico (94oC, 5min). IV. Síntese do DNA pela polimerase (72oC, 2-5 min). 
 
A sequência correta da reação apresentada está na opção: 
a) I - II - III - IV b) III - II - IV- I c) II - I - IV- III d) IV - I -III-II e) III - I - II – IV 
Resposta: A alternativa correta é nenhuma das anteriores, e sim: III – II – I