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Introdução à microbiologia: Bactérias Níveis de organização Átomo -> moléculas -> macromoléculas -> organelas -> células -> tecidos -> órgão organismo ou sistema Tipos de células Procariontes • (Pro)=primeiro e (cario)=núcleo • Não tem núcleo • Possui genoma disperso pelo citoplasma • Menores que eucariontes • Cromossomo circular, único • Possui ribossomo 70S • Membrana plasmática sem esterol • Peptideoglicano • Reino monera (bactérias) Eucariontes • (Eu)=verdadeiro e (cari)o=núcleo • Apresenta o núcleo bem individualizado e delimitado pelo envoltório nuclear – carioteca • Possuem genoma separado do citoplasma por envoltório nuclear • Maior número de cromossomos, lineares • Presença de mitocôndrias, citoesqueleto, lisossomo, complexo de golgi, cloroplastos em plantas, reticulo endoplasmático • Ribossomo 80S • Membrana plasmática com esterol • Reino protista (protozoários), fungi, vegetal e animal Importância das bactérias Ecologia e ecossistema Decomposição da matéria orgânica e fixação de plantas aos nutrientes como nitrogênio. Econômica e alimentícia Bactérias fermentadoras que produzem alguns alimentos, como leite fermentado. Agricultura e tecnocientifica Fixação de vários compostos, controle biológico e alimentos transgênicos. Médica • Fabricação de antibiótico. Alexander Fleming trabalhava com fungos e viu que uma das culturas dele contaminou uma colônia bacteriana, ao redor da colônia não cresceu bactéria. O fungo produzia uma toxina que inibia o crescimento bacteriano, vindo disso o antibiótico – penicilina. • Produção de vacinas como BCG (Bacilo Calmette e Guerin, uma cepa atenuada do bacilo da tuberculose) e DPT tríplice bacteriana (composta por toxinas atenuadas do tétano e da difteria e bacilo morto encapsulado da coqueluche). • Desenvolvimento de doenças e microbiota natural. • Estética, como clostridium botulinum – produtor da toxina botulínica (botox) Célula bacteriana Estruturas essenciais • MP • Mesossomo • Citoplasma • Ribossomo • Enzimas relacionadas com a respiração, ligadas à face interna da membrana plasmática • DNA associado ao mesossomo Estruturas acessórias • Flagelo • Plasmídeos • Fimbrias • Capsula • Parede celular Membrana plasmática • Serve como barreira • 60% proteínas 40% fosfolipídio - bicamada • Transporte dos solutos (impede passagem livre de moléculas e íons, realiza excreção de substancias inúteis a célula) • Auxilio de proteínas de transporte de membrana – uniport e cotransportadora (simporte ou antiporte), a favor do gradiente ou contra gradiente com gasto energético (transporte ativo e translocação de grupo) • Produção de energia por transporte de elétrons e fosforilação oxidativa, fornece energia para metabolismo bacteriano • Biossíntese: lipídios e outras macromoléculas componentes de outras estruturas externas à membrana são permeadas para o lado externo pelos canais chamados junções de bayer • Duplicação DNA: forma complexos de duplicação que faz a separação do DNA • Secreção: enzimas hidrolíticas, que rompem macromoléculas do meio externo que servirão de nutrientes para bactéria • Mesossomo: invaginação da membrana plasmática a) septal: guia divisão bacteriana b) lateral: concentra enzimas relacionadas ao transporte elétrico, aumentando potencial respiratório. DNA associado ao mesossomo. Parede celular • Mantem a pressão osmótica no interior da bactéria para não se romper • Auxilia na divisão como primer, iniciador, associado à formação do septo na invaginação do mesossomo • Manutenção da forma da bactéria (bacilo, coco, etc) • Na morfologia, quando as bactérias se agrupam, ocorre um “arranjo” • 1884- Hans Crhistian Gram divide bactérias em dois grupos segundo aspectos tintoriais e parede que possuem: gram positiva e negativa Gram positiva 70 a 75% de peptideoglicano e até 50% ácido teicoico. Esse ácido regula o que entra a sai na bactéria, regula atividade de rompimento na divisão celular, constitui sítios receptores de bacteriófagos, servem de sítios de ligação com o epitélio do hospedeiro em algumas bactérias patogênicas e são antígenos celulares. Gram positiva possui espaço periplasmático entre membrana plasmática e peptídeoglicano com enzimas que ajudam na degradação da bactéria (proteases, nucleases, lipases), enzimas que inativam drogas tornando resistente a elas e proteínas que transportam solutos do transporte de substancias para o interior das células. As bactérias gram negativas possuem pouca camada de peptideoglicano e pouco ou nenhum ácido teicoico, tem espaço periplasmatico e membrana celular assim como as gram positivas. Na membrana externa tem o lipídeo lipopolissacarideo (LPS) que é constituído de um lipídeo complexo (lipídeo A) ao qual está ligado um polissacarídeo chamado antígeno O ou antígeno somático – libera endotoxina (induz febre). Possui porinas que permite a passagem de vários solutos Coloração é feita por meio de culturas e provas de identificação, bacterioscopia. Coloca o cristal violeta deixando um minuto, fica violeta. Depois adiciona o Lugol (acastanhado) por 1 minuto, auxilia a formação de um cristal entre a parede bacteriana, fazendo o violeta ficar por mais tempo. Na parede da gram negativa ele não fica, pois parede é mais fina. Terceiro passo é adicionar o descorante (álcool-acetona) e a bactéria gram positiva não perde corante violeta por causa do peptídeoglicano e do complexo com lugol, já as negativas não tem muito peptideoglicano e lugol, por isso, descoloram. A quarta fase é o contra corante com a fucsina por 1 minuto, não entra no positivo mas retem no negativo. Portanto, a positiva se cora de violeta e a negativa de rosa pela fucsina. Então, técnica gram é a capacidade que a bactéria tem de reter o corante cristal violeta em seu citoplasma, mesmo após o processo de descoloração de vido à composição de sua parede celular. Exceção à coloração: micobacterias (mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae). O ácido micólico tem comportamento diferente das gram positivas e negativas. Na pesquisa delas usa a coloração ZIEHL-NEELSEN (bacilo álcool ácido resistente) ou BAAR. Uso de fucsina para entrar na bactéria e quando ocorre a descoloração o ácido micólico retem corante, depois há adição de um segundo corante (contracorante) azul de metileno, que irá corar aquelas que não reteram a fucsina. Capsula Revestimento externo que vai ter várias funções como sustentação, reservatório de água e nutrientes, resistência, aderência (receptores), formação de biofilmes (aglomerado de bactérias). Flagelo Locomoção e serve como antígeno (antígeno F). Para sua formação há o uso da proteína flagelina que fará o papel de antígeno. Pode ser único ou estar por toda a superfície. Constituído de estrutura basal, gancho e filamento longo. Fimbrias Menores e numerosas. São apêndices filamentosos proteicos que não são flagelos. Não desempenham papel relativo à mobilidade, é condutor de material genético durante a conjugação bacteriana. Funcionam como sítios receptores de bacteriófagos e como estruturas de aderência às células de mamíferos e a outras superfícies (fixação aos tecidos). Plasmídeos Molécula de DNA circular (fragmento de DNA) cujos genes não determinam características essenciais, porém, muitas vezes, conferem vantagens seletivas às bactérias que possuem. Alta capacidade de duplicação, numerosos, resistência à antibióticos. Pode ser passado de uma bactéria para outra. Ribossomos Associados à síntese proteica. Inclusão Substancia de reservas e subunidades de macromoléculas para compor outras estruturas celulares. Esporos Estrutura que algumas bactérias gram positivas possuem (principalmente o gênero Closridium e Bacillus) que, quando o meio se torna carente de água ou de nutrientesessenciais, realiza esporogênese. Mantem somente estruturas essenciais. Quando meio volta a favorecer bactéria pode voltar a partir do esporo. Reprodução assexuada bipartição Célula parental sofre elongação celular, depois invaginação da parede celular e distribuição do material nuclear. Posteriormente, há a formação de uma parede celular transversa (septo) e distribuição do material celular. Por último a separação em duas células filhas idênticas. Reprodução sexuada Transformação Transferência de material genético ocorre quando uma célula receptora capta DNA solúvel liberado no meio por células doadoras. Conjugação É um processo de transferência de material genético, promovido por plasmídeos conjugados – usa pilus ou pill (como uma ponte móvel que une bactérias, por meio dela ocorre transferência de plasmídeo). Crescimento bacteriano • Fase 1 ou Lag: período de adaptação ao meio • Fase 2 ou Log (exponencial): ocorre multiplicação • Fase 3 ou estacionária: falta de nutrientes, acumulo de subprodutos tóxicos e equilíbrio multiplicação x morte • Fase 4 ou fase de morte: ativação de enzimas que lisam a parede celular Controle do crescimento microbiano patogênico é de fundamental importância na área da saúde, agricultura, meio ambiente e indústria alimentícia. Utiliza métodos químicos e físicos que podem eliminar ou reduzir os microrganismos ou reduzir seu crescimento. Terminologia relacionada ao controle microbiano • Esterilização: destruição das formas de vida, incluindo esporos. (autoclave, óxido de etileno) • Desinfecção: reduz ou inibe crescimento microbiano em um local (tratamento, desinfetantes). Não elimina todas as bact. e esporos. • Anti-sepsia: reduz ou inibe o crescimento microbiano em tecido vivo (anti-septico, alcool) • Assepsia: métodos que permitem manter um ser vivo ou um objeto isento de microrganismos (estéril) • Degerminação: remoção mecânica, em vez da morte, da maioria dos microrganismos de uma área limitada (lavagem das mãos). • Sufixo CIDA: morte dos microrganismos, ação irreversível. Exemplo: bactericida • Sufixo STÁTICO: inibição da multiplicação microbiana, reversível. Exemplo: bacteriostático. Como ocorre a ação dos antimicrobianos • Alteram permeabilidade da membrana (componentes lipídicos e proteicos) contribuindo para o extravasamento do conteúdo bacteriano. • Alteram parede celular, diminuindo capacidade de resistência • Danos a proteínas funcionais (desnaturação) e interferência na replicação do DNA e RNA na síntese proteica • Inibição enzimática Métodos físicos para o controle do crescimento bacteriano • Calor úmido como fervura, autoclavação e pasteurização • Calor seco como flambagem e incineração (oxidação de todo o material até tornar cinzas) e fomos. • Filtração • Radiação ionizantes ou não • Baixas temperaturas • Métodos químicos para o controle do crescimento microbiano • Álcool • Iodo • Compostos clorados ou quaternários Taxonomia bacterina Nome do gênero seguido do nome da espécie. Apenas primeira letra do nome do gênero tem letra maiúscula e o nome completo deve ficar em itálico ou sublinhado. Exemplo Escherichia coli ou Escherichia coli.
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