Aula 01 Lab clínico (1)

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Aula 01: Acomodações e condições ambientais do laboratório 
Profa. Luciana Fialho
Biomédica
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Situação-problema: A maioria dos pesquisadores e analistas clínicos iniciam a carreira em um laboratório e o primeiro contato é excitante, pois o profissional em formação se vê pronto para fazer coisas incríveis e também realizar novas descobertas, contudo, a segurança deve vir sempre em primeiro lugar. É necessário proteger a si mesmo, seus colegas e o ambiente de organismos e agentes infecciosos com que se trabalha em laboratório. Os níveis de biossegurança são uma maneira de classificar as precauções que devem ser tomadas para a prática de uma ciência mais segura. 
"Em qual nível de biossegurança um laboratório que manipula
amostra com SARS-CoV-2 deve estar classificado?"
O que devemos encontrar em um ambiente de laboratório?
O laboratório de saúde pública tem como função básica promover atividades voltadas para o controle epidemiológico e sanitário de uma população. 
Suas principais ações estão fundamentadas em critérios epidemiológicos, tanto no campo da análise clínica quanto na resolução de problemas prioritários de saúde pública.
No cumprimento de suas funções, o laboratório de saúde pública atende à demanda analítica de produtos afetos à vigilância sanitária. 
Além disso realiza diagnósticos clínicos e epidemiológicos a partir de amostras oriundas de pacientes suspeitos de doenças de interesse sanitário.
O que devemos encontrar em um ambiente de laboratório?
As atividades desenvolvidas no laboratório de saúde pública expõem os trabalhadores
a uma variedade de riscos associados aos materiais empregados e aos métodos utilizados. 
 Visando minimizar ou eliminar os riscos, é essencial o estabelecimento de um programa de biossegurança para o laboratório. 
Uma estrutura física, administrativa e técnica compatível com as atividades a serem desenvolvidas.
O que devemos encontrar em um ambiente de laboratório?
Qual a primeira coisa que se precisa saber para montar um laboratório?
As atividades que serão realizadas ali.
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Os principais aspectos do planejamento de um laboratório são: 
O laboratório de saúde pública deve ser projetado para atender às condições de biossegurança, de acordo com a classe de risco dos organismos e agentes manipulados
nas suas atividades.
O que devemos encontrar em um ambiente de laboratório?
segurança do pessoal
proteção da amostra
 precisão dos resultados
 eficiência no fluxo de trabalho
- a proteção do meio ambiente e dos riscos provenientes das atividades realizadas no seu interior.
Cada laboratório pode ter uma combinação de riscos própria e uma avaliação
deve ser procedida para que as medidas de biossegurança necessárias sejam claramente identificadas. 
Critérios de avaliação de risco do
 Centers for Disease Control and 
Prevention (CDC):
-patogenicidade, 
-as vias de transmissão,
a estabilidade,
 a concentração,
 e a disponibilidade de profilaxia 
e tratamento. 
Cada laboratório deve ter sua análise de risco própria
A partir da classe de risco dos agentes a serem manipulados e dos procedimentos a serem desenvolvidos, são recomendados níveis de biossegurança de um a quatro (NB1-4), com critérios específicos.
Nível de biossegurança (NB–1)
Adequado ao trabalho que envolva agentes bem caracterizados e conhecidos por não provocarem doenças em seres humanos e que impliquem em mínimo risco ao ser humano e ao meio ambiente.
Nível de biossegurança (NB–2)
Adequado ao trabalho que envolva agentes que possam causar doença em seres humanos mas que não consistem em grande risco para quem aplica as recomendações de biossegurança. As exposições laboratoriais podem causar infecção mas a existência de medidas eficazes de tratamento limitam o risco.
Níveis de Biossegurança de um Laboratório
Nível de biossegurança (NB–3)
Adequado ao trabalho que envolva agentes que possam causar doenças graves em seres humanos e que possam representar grande risco para quem os manipula. Podem
representar risco se disseminados na comunidade mas geralmente existem medidas de
tratamento e prevenção.
Nível de biossegurança (NB–4)
Adequado ao trabalho que envolva agentes que representem ameaça para o ser humano, representando risco a quem os manipula, tendo grande poder de transmissibilidade. Normalmente não existem medidas preventivas e de tratamento para esses agentes.
Níveis de Biossegurança de um Laboratório
Momento de ação:
Acessar a apostila "Diretrizes para projetos físicos de laboratórios de saúde pública" – capítulo 1 e 4, disponível em: http://bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/diretrizes_lab_saude.pdf e identificar:
1- as principais acomodações e condições ambientais da estrutura do laboratório, associando com o uso das boas práticas de conduta laboratorial e as boas práticas de técnicas laboratoriais.
Conceito: métodos de segurança utilizados na manipulação de agentes de risco no laboratório. 
Objetivo: redução ou eliminação da exposição da equipe do laboratório, de outras pessoas e do meio ambiente aos agentes de risco. 
Elementos básicos: boas práticas laboratoriais, os equipamentos de segurança e as edificações e instalações adequadas.
Tipos de contenção:
- Contenção primária são utilizadas as boas práticas laboratoriais e equipamentos de
segurança como equipamentos de proteção individual e cabines de segurança biológica.
- Contenção secundária são utilizadas edificações e instalações laboratoriais adequadas.
A avaliação de risco dos trabalhos a serem desenvolvidos no laboratório determinará a
combinação adequada desses elementos.
Contenção em Laboratório
- Para se elaborar a programação física do laboratório é necessário descrever as suas atribuições e as suas atividades. 
- A partir dessas atividades, poderão ser encontrados em tabelas, os respectivos ambientes com suas características físicas.
Planejamento da estrutura física de um Laboratório
- Para que a programação física fique completa, a equipe de planejamento do laboratório deverá proceder com avaliações de risco, determinando o nível de biossegurança de cada atividade. 
Todos os critérios são descritos a partir da definição do nível de biossegurança de cada atividade. 
Estrutura física para um Laboratório de Virologia
Quais tipos de água podemos encontrar em um laboratório?
Com o avanço tecnológico, especialização crescente de laboratórios e a necessidade de realizar medições e experimentos químicos e biológicos cada vez mais exigentes, surgiu a necessidade de utilização de uma água extremamente pura.
 Norma ISO 3696 3 graus 
  Água Grau 1 (mais alta pureza):
 livre de coloides iônicos e de contaminantes orgânicos, apropriada para as técnicas analíticas mais sensíveis, como cromatografia líquida, espectrometria, biologia molecular.
- Usar mais de um passo de membranas de osmose reversa ou de deionização por troca iônica seguida de uma filtração em membranas de 0,2 µm para remover particulados ou sílica do equipamento de destilação.
Graus de pureza da água
  Como preparar:
Coloide é um sistema ou mistura de substâncias
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- Água Grau 2:
Níveis reduzidos de contaminantes orgânicos, inorgânicos e coloides, tornando-se indicada para métodos analíticos como a espectrofotometria de absorção atômica.
Como preparar:
A deionização ou a osmose reversa e a destilação podem produzir esse tipo de água de laboratório. 
Água Grau 3:
Tem uso em grande parte das aplicações laboratoriais na química e no preparo de reagentes e soluções. 
Como preparar:
Sua produção pode ser por destilação simples, osmose reversa ou deionização por troca iônica.
Graus de pureza da água
Vários são os processos de purificação que estão disponíveis para utilização no laboratório. Esta purificação consiste na eliminação de todas as substâncias dissolvidas e suspensas na água. 
Destilação - Processo de vaporização e condensação de um líquido para purificar ou concentrar uma substância ou para separar uma substância volátil de outras substânciasmenos voláteis. É o método mais antigo de purificação da água. 
Deionização – Neste processo a água passa por um sistema contendo resinas insolúveis, aniônicas e catiônicas, onde os íons presentes na água são trocados pelos íons presentes nessas resinas. 
Processos de purificação da água
Osmose Reversa - Processo pelo qual a água é forçada a passar por uma membrana semipermeável que age como um filtro molecular. A membrana remove de 90 a 99% das impurezas da água. 
Processos de purificação da água
Como a osmose reversa é capaz de separar até íons da água, seu produto é considerado mais puro que a água destilada.
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Água Milli-Q:
Esse nome nada mais é que o produto de uma das empresas que trabalham com água ultrapura, a Merck Millipore (importante competidora da área). O que acontece neste caso é um estilo de metonímia, quando se utiliza uma marca para denominação de um produto.
Tipos de água
Água da Osmose Reversa:
Definição de osmose:  deslocamento de solvente entre dois meios de solução com concentrações de solutos diferentes, separados por uma membrana semipermeável.
 Na osmose, o solvente se desloca do meio hipotônico (menos concentrado em soluto) no sentido do meio hipertônico (mais concentrado em soluto) e chega ao final do processo quando os dois meios encontram-se em equilíbrio de concentração. 
A osmose reversa acontece em sentido contrário ao da osmose. Nela, o solvente se desloca no sentido da solução mais concentrada para a menos concentrada, isolando-se assim, o soluto.
Água da Osmose Reversa:
Como a osmose reversa é capaz de separar até íons da água, seu produto é considerado mais puro que a água destilada.
Água Destilada:
É a água obtida por meio da destilação (condensação do vapor de água obtido pela ebulição ou pela evaporação) de água não pura (que contém outras substâncias dissolvidas). 
- É a água menos pura dos tipos apresentados aqui. Ainda assim, com um bastante aceitável grau de pureza para muitas atividades laboratoriais.
Conjunto de medidas preventivas e corretivas tomadas para minimizar, ou eliminar, os erros praticados nos laboratórios, tornando os resultados das análises, exames e pesquisas completamente reproduzíveis e confiáveis. 
Boas Práticas de Laboratório - BPL
Estas medidas são constituídas por atividades organizacionais do ambiente de trabalho e por procedimentos básicos como a utilização de Equipamentos de Proteção Individual (EPIs) e Equipamentos de Proteção Coletivos (EPCs), limpeza e higienização do ambiente laboratorial entre outras.
Boas Práticas de Laboratório - BPL
Por sua vez, um Programa de Qualidade Total (PQT) abrange decisões de ordem estratégica que visam a organização do laboratório:
- contínuo aprimoramento do pessoal através de processos de treinamentos específicos, adoção de processos administrativos eficientes, utilização de materiais e equipamentos de qualidade e atualizados, entre outros. 
Os programas de garantia da qualidade têm a finalidade de assegurar que os procedimentos laboratoriais sejam realizados de acordo com as BPL.
Programas de Qualidade
-Higienização e limpeza adequada do ambiente;
-O laboratório deve dispor de um manual de Biossegurança;
-Os produtos químicos tóxicos devem estar devidamente identificados e armazenados
-Para sua segurança, procure conhecer os perigos oferecidos pelos produtos químicos utilizados no seu laboratório;
- Evitar transportar materiais químicos ou biológicos de um lugar para outro no laboratório;
-O ambiente laboratorial deve ser bem iluminado;
-A sinalização de emergência deve estar presente nos laboratórios;
-O laboratório deve possuir caixa de primeiros socorros e pessoal treinado para utilizá-los;
-Os extintores devem estar dentro do prazo de validade e com pressão dentro dos limites de normalidade;
-Identificar as tomadas quanto à voltagem;
- O laboratório deve fornecer quantidades suficientes de EPI e EPC;
Recomendações BPL
Lavagem das mãos
Este procedimento é necessário antes e depois da manipulação de materiais dentro do laboratório. Deve-se utilizar água corrente e sabão, de acordo com a indicação baixo.
O uso de luvas de proteção para manipulação de materiais biológicos e químicos não substitui a lavagem correta das mãos.
Atividade verificadora de aprendizagem: 
Indicar que os alunos assistam o vídeo "NOÇÕES DE NÍVEIS DE BIOSSEGURANÇA", disponível em: https://www.youtube.com/watch?v=bPIcAd3z-pU e realizem uma resenha crítica do vídeo, associando com o foi estudado durante a aula.
QUESTÃO 1.
O ambiente laboratorial apresenta diversos riscos tanto para os trabalhadores quanto para o ambiente. Dessa forma, a ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária) estabeleceu normas exigindo a divisão dos riscos em níveis de biossegurança, visando minimizar ou diminuir os acidentes ocasionados por esses riscos. Visando os diferentes níveis de biossegurança marque a alternativa correta:
e) O nível de Biossegurança 3 é destinado ao trabalho com microrganismos da classe de risco 8 ou para manipulação de grandes volumes e altas concentrações de microrganismos da classe de risco 9. Para este nível de contenção, são requeridos, além das barreiras físicas primárias, desenho e construção laboratoriais especiais. Deve ser mantido controle rígido quanto a operação, inspeção e manutenção das instalações e equipamentos e o pessoal técnico deve receber treinamento específico sobre procedimentos de segurança para a manipulação destes microrganismos.
a) O nível de Biossegurança 4, ou laboratório de contenção máxima, destina-se à manipulação de microrganismos da classe de risco 4, onde há o mais alto nível de contenção, além de representar uma unidade geográfica e funcionalmente independente de outras áreas. Esses laboratórios requerem, além dos requisitos físicos e operacionais dos níveis de contenção 1, 2 e 3, barreiras de contenção (instalações, desenho equipamentos de proteção), procedimentos especiais de segurança.
b) O nível de Biossegurança 5, é o nível de contenção laboratorial que se aplica aos laboratórios de ensino básico, onde são manipulados os microrganismos pertencentes a classe de risco 5. Não é requerida nenhuma característica de desenho, além de um bom planejamento espacial e funcional e a adoção de boas práticas laboratoriais.
c) O nível de Biossegurança 2, é o nível de contenção laboratorial que se aplica aos laboratórios de ensino básico, onde são manipulados os microrganismos pertencentes a classe de risco 2. Não é requerida nenhuma característica de desenho, além de um bom planejamento espacial e funcional e a adoção de boas práticas laboratoriais.
d) O nível de Biossegurança 3 diz respeito ao laboratório em contenção, onde são manipulados microrganismos da classe de risco 6. Este nível se aplica aos laboratórios clínicos ou hospitalares de níveis primários de diagnóstico, sendo necessário, além da adoção das boas práticas, o uso de barreiras físicas primárias (cabine de segurança biológica e equipamentos de proteção individual) e secundárias (desenho e organização
do laboratório).
QUESTÃO 2.
Os métodos de contenção primária e secundária, são utilizados para garantir a segurança durante a manipulação ou exposição a agentes infecciosos. Dessa forma, a equipe que realiza esse manuseio fica mais protegida. Existem 2 tipos básicos de contenção: a primária e a secundária.
Assinale a alternativa que associa corretamente o tipo de contenção de laboratório com seus mecanismos:
a) Primária: protetores faciais, calçados de segurança, chuveiro e lava-olhos. Secundária: pisos e tetos impermeáveis, sistema central de ventilação e antecâmara.
b) Primária: pisos e tetos impermeáveis, protetores auditivos, torneira com acionamento sem uso das mãos. Secundária: luvas, jalecos, cabine de segurança biológica e capela de exaustão química.
c) Primária: protetores respiratórios, protetores auditivos, extintores de incêndio e vedação de janelas. Secundária: protetores respiratórios, sistema central de ventilação, lavatórios para as mãos e extintoresde incêndios.
d) Primária: sistema central de ventilação, vedação de janelas, torneira com acionamento sem uso das mãos. Secundária: luvas, jalecos, calçados de segurança, capela de exaustão e extintores de incêndios.
e) Primária: pisos e tetos impermeáveis, protetores auditivos, torneira com acionamento sem uso das mãos. Secundária: protetores respiratórios, protetores auditivos, extintores de incêndio e vedação de janelas.