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ANHANGUERA EDUCACIONAL LTDA Faculdade Anhanguera de Valparaiso - GO Curso de Enfermagem AMANDA NATHALY MIRANDA CEZARIO Relatório de Genética VALPARAÍSO-GO 2019 INTRODUÇÃO O DNA, ou material genético, no núcleo celular da célula de cada ser vivo, menos alguns virus que possuem como material genético o RNA. O DNA é encontrado em estruturas celulares denominadas cromossomos. Tanto o DNA quanto os cromossomos são muito pequenos, por isso é necessário o uso de microscópios para conseguir enxergá-los. A molécula do DNA é um polinucleotídeo, ou seja é formada por vários nucleotídeos, que por sua vez são formados por: um grupo fosfato, um açúcar pentose e uma base nitrogenada. Além disso, o DNA possui forma de dupla hélice, pois possui duas fitas de polinucleotídeos que se pareiam através de pontes de hidrogênio. Por conter material genético, o DNA é utilizado para várias pesquisas, por exemplo: Teste de paternidade, identificação de microorganismos, doenças genéticas e outros. Para iso é realizada a extração do DNA, que pode ocorrer de varias formas. Neste relatório contém o processo de extração de DNA de uma banana por isolamento, onde será relatado a metodologia utilizada, os procedimentos realizados e o resultado disso tudo. (BRITÂNICA ESCOLA, 2019) METODOLOGIA No dia 15 de outubro de 2019, foi realizada aula prática, com o objetivo de extração simples do ácido nucleico (DNA) de uma banana, para observação no microscópio. A extração de ácidos nucléicos (DNA e/ou RNA) geralmente é a primeira de várias etapas para o estudo da biologia molecular de qualquer organismo. Na aula, foram utilizados produtos de uso doméstico (detergente para lavar louça, sal de cozinha e álcool) para a extração de DNA da banana (Musa sp.). Procedimentos para extração de ácidos nucléicos são simples e podem ser executados mesmo em laboratórios sem infraestrutura específica para este fim. 1. MATERIAIS: • Uma banana • Saco plástico • Sal de cozinha (NaCl) • Detergente para lavar louça (líquido ou gel) • Água quente (65°C a 80°C) • Peneira • Álcool 96°GL gelado • Becker de vidro (~200ml) • Bastão de vidro • Recipiente (plástico ou isopor) para o banho de gelo • Gelo • Capilares de vidro • Lâminas • Microscópio 2. PROCEDIMENTOS: 1. A banana foi amassada dentro do saco plastico plástico e reservada. 2. Foi preparada uma solução contendo 80 ml de água quente, 20 ml de detergente e uma colher de sopa de sal (NaCl). Misturou-se com cuidado para não fazer espuma. Logo após foi adicionada a solução a banana amassada, e aguardou-se aproximadamente 15 min. 3. O frasco com a mistura foi colocado em banho de gelo. À medida que a suspensão onde está a banana amassada esfriou, foi possível observar que o líquido parecia estar “talhando” (formando grumos). 4. Quando a suspensão esfriou, foi filtrada e o líquido coletado foi armazenado em um frasco limpo. 5. Em um tubo de ensaio, colocou-se um volume de apenas cerca de 3 dedos no fundo do tubo. 6. Inclinando o tubo de vidro com o líquido filtrado (ângulo de 30° a 40°) e derramando vagarosamente, pela parede lateral, o álcool gelado. Observou-se que o álcool não se misturava prontamente com a solução filtrada, havendo a formação de duas fases (na superior ficou o álcool). Entre as duas fases foi possível observar a formação de um precipitado com aspecto de “fiapos” esbranquiçados, que são os ácidos nucléicos. 7. Com a ajuda do bastão ou da pipeta de vidro, foi possível enrolar o ácido nucleico, um tipo de pescagem . 8. Uma vez enrolados no bastão, os ácidos nucléicos secaram por alguns minutos ao ar para a evaporação do etanol; depois o material foi transferido da extremidade do bastão para uma lâmina de microscópio com umas gotas de água destilada, para ser observada. RESULTADO O processo de extração do DNA da banana, resultou na quebra da membrana plasmática, fazendo assim com que as moléculas de DNA pudessem sair das células e se agruparem. Pode-se observar por meio do microscópio as moléculas de DNA condensadas em seu grau máximo, e aglomeradas. A aparência da molécula de DNA no microscópio era semelhante a grão de arroz. DISCUSSÕES Ao término da extração, pode-se observar por meio do microscópio, além das moléculas de Dna, anéis que possuiam as bordas pretas, esses anéis eram bolhas. Levando em consideração o tamanho da amostra que foi retirada para observação no microscópio, pode-se concluir que quanto maior a amostra, menos visível será a molécula de DNA, pois em outros grupos que haviam extraído uma amostra menor da molécula pode-se ver mais claramente. Além disso, nessas amostras maiores a única estrutura que foi visualizada com clareza foram as bolhas. REFERÊNCIAS 1. Loreto, E. L. S. & Sepel, L. M. N. Atividades experimentais e didáticas de Biologia Molecular e Celular. São Paulo, Editora da Sociedade Brasileira de Genética. 2. DNA. In Britannica Escola. Web, 2019. Disponível em: <https://escola.britannica.com.br/artigo/DNA/481159>. Acesso em: 3 de novembro de 2019. https://escola.britannica.com.br/artigo/DNA/481159
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