Micologia Veterinária - Detalhado

Prévia do material em texto

Micologia 
Fungos
· São organismos eucariotos de organização solitária ou em colônias;
· Sua nutrição ocorre por absorção, através da liberação de enzimas que secretam no meio externo;
· Seres quimio-organotróficos;
· Sua parede é formada por quitina, glucana, quitosan e/ou manana;
· Sua membrana plasmática possui como principal constituinte esteroide o ergosterol;
· Podem possuir outras estruturas externas como capa de fibrila ao exemplo da Candida spp. 
· Fungos podem se apresentar nas formas filamentosas (multicelulares) ou de leveduras (unicelulares).
· A hifa é a unidade estrutural característica dos fungos. O emaranhado de hifas constituem o Micélio.
· Toleram altas pressões osmóticas e variações altas de pH. Além disso, são resistentes a antibacterianos;
Reprodução
Tanto na reprodução sexuada quanto na assexuada ocorre a formação de esporos. Os esporos são formados a partir de hifas aéreas de diferentes maneiras o que distingue as espécies de fungos. 
Artroconídeo: Fragmentação de uma hifa septada em células únicas, levemente espessas. Ex: Coccidioides immitis;
Blastoconideo: Broto originado de uma célula parental. Ex: Candida albicans (levedura), Cryptococcus;
Clamidoconídeo: Esporo com paredes espessas formado pelo arredondamento e alargamento no interior de uma segmento de hifa; tem função de resistência. Ex: C. albicans e Trichophyton verrucosum.
Macroconídeo: Conídeos grandes multisseptados produzidos por dermatofitos;
Microconídeos: Conídeos pequenos partindo das hifas produzidos por dermatofitos.
Fialoconídeos: Conídeos produzidos por fialides. Ex: Aspergillus;
Esporângiosporo: Esporos característicos de zigomicetos que são liberados pelo esporângio. Ex: Rhizopus;
Dermatófitos
Caracterísitcas Gerais:
Epidemiologia:
Dermatofitos geofílicos: residem primariamente no solo; Infecta animais por contato direto com o solo, não sendo transmitidos entre animais; Ex: M. gypseum;
Dermatofitos zoofílicos: parasitas das peles de animais, podendo sobreviver no ambiente. As infecções ocorrem mais entre animais jovens e por contato intimo, fatores que predispõe são a temperatura, umidade, traumas, deficiências nutricionais;
Patogenicidade: As infecções por dermatófitos começam no estrato córneo a partir de uma área lesionada. Eles procuram partes queratinizadas, nos animais principalmente os pelos e se mantem na porção mais superior evitando as áreas de crescimento da estrutura e se alimentam deles causando alopecia.
Seus principais fatores de virulência são as enzimas secretoras como: queratinases, proteases, elastases;
A inflamação ajuda a inibir o crescimento fúngico, porém esse processo acaba por agravar a lesão podendo causar infecções secundárias.
Dermatofitose
Sinais clínicos; Alopecia, eritema, escamas, crostas, lesões arredondadas, pápulas, vesículas;
Microsporum canis: 
· Tem o gato como reservatório;
· Persas podem desenvolver doença granulomatosa (micetoma dermatofídico ou quérion): nódulos superficiais ulcerados e descarga granular amarelada; 
· Otite externa com descarga ceruminosa;
· Em cães causa lesões circulares;
Trichophyton sp.
· Em bovinos ambos os Trichophyton causam lesões circulares escamosas com alopecia podendo tornar-se largas, circunscritas e crostosas.
· Em caprinos e ovinos, tem como principal o T. verrucosum. 
· Em equinos tem como principal o T equinum e o M gypseum.
Diagnóstico:
Lampada de wood
Direto :
· Amostras clínicas: Raspado de pele (pesquisa de hifas e artroconídeos), biópsia ou punção (micetoma);
· Microscopia: preparação de KOH 40%;
Cultura fúngica: 
· Meios seletivos: Sabouraud, S+cloranfenicol, S+C+cicloeximida; análise da macro e microscopia; Meio DTM (meio de esporulação rápido) – os dermatófitos produzem muita proteína alcalizando rapidamente o meio o que é percebido por um indicador de pH;
· Microcultivo
· Testes bioquímicos;
· Microsporum canis
Macroconídeo: São produzidos em maior quantidade tendo formato fusiforme, parede espessa, multisseptado, suas extremidades são mais afuniladas;
Microconídeos: São pequenos, globosos e estão isolados partindo da lateral das hifas;
Microscopia do raspado de pele: Ectotrix - Microscoporico, em mosaico ao redor do pelo.
Microsporum gypseum
Macroconídeos: Formato de canoa, parede fina, multisseptado.
Microconídeos: São pequenos, globosos e estão isolados partindo da lateral das hifas;
Em raspado de pele: Microscoporico, em mosaico ao redor do pelo.
· Tricophyton mentagrophytes
Macroconídios: Produzem em menos quantidade em forma cilíndrica com paredes finas e lisas; 
Microconídios: São produzidos em maior quantidade, possuem formato mais globoso, em arranjos de cachos. 
Hifas espiraladas ou gavinhas (característica da espécie); Cruz de sanlorrant.
Em raspado de pele: Microide, mais difuso ao redor do pelo;
· Tricophyton verrucosum
Clamidoconídeos: estrutura globosa, espessos, formados e liberados do meio da hifa;
Em raspado de pele: Megasporado, formando cadeias a redor do pelo.
Leveduras
Candida spp.
Características gerais
· São fungos patogênicos oportunistas, causam doenças a partir do desequilíbrio do hospedeiro; 
· Fatores predisponentes: pacientes imunossuprimidos, idosos, antibiótico terapia;
· São fungos ubíquos, estão em diversos ambientes;
· Colonizam: trato gastrointestinal, urina, uretra, pele, unha, microbiota da boca.
· Causam candidíase ou candidose;
· Principal espécie Candida albicans;
Patogenia
Fatores de virulência: Capacidade de aderência, hidrofobicidade, proteinases, formação de biofilme;
Os principais problemas patológicos incluem: Mastite e aborto em bovinos, otite, problemas gastrointestinais em bovinos e aves de confinamento. 
Diagnóstico
Direto :
· Histopatologia 
· Amostras clínicas: Swabs na mucosa (suspeita); líquor, sangue e biópsia pleural em casos de infecção;
· Microscopia: KOH (ajuda a verificar os blastoconideos da amostra); 
Cultura fúngica: 
· Meios seletivos: Sabouraud, S+cloranfenicol, S+C+cicloeximida (inibe leveduras saprofitas); CHROMágar cândida - meio diferenciação a partir da cor, onde se veem colônias mistas coradas de forma diferente, permitindo o isolamento das espécies. É um meio presuntivo e seletivo, já possui cloranfenicol; 
· Testes bioquímicos: assimilação de carboidratos, assimilação de nitrogênio;
· Prova de microcultivo: Utilização de uma lamínula para diminuir o O2 e causar uma tensão de oxigênio, o stress causa um rearranjo de algumas espécies de cândida. 
· Prova do tubo germinativo: Identificar o tubo germinativo, ele é uma estrutura asseptada, sem constrição entre o blastoconídeo e a pseudohifa. Parece um espermatozoide;
· O teste do tubo germinativo é o teste confirmatório para Candida albicans . A formação do tubo germinativo foi relatada pela primeira vez por Reynolds e Braude e, portanto, o teste do tubo germinativo também é conhecido como Fenômeno Reynolds-Braude. Este é um método rápido para identificar e diferenciar C. albicans  de outras Candida spp. Botões e pseudo-hifas podem ser distinguidos dos tubos germinativos pelo apego contraído no ponto de origem. Os tubos germinativos não apresentam constrição no ponto de origem.
· Diagnóstico molecular: PCR duplex para diferenciar C. albicans e C. dubliniensis;
· Candida albicans
coloração de gram, visualização de blastoconídeos e hifas verdadeiras, 
C. albicans tem a capacidade de se apresentar em diferentes morfologias, na forma leveduriforme, pseudo-hifa ou de hifa verdadeira. As leveduras unicelulares reproduzem-se assexuadamente por gemulação. Entre a fase de leveduras e a formação de hifas existe um estado de transição, os tubos germinativos. As pseudo-hifas podem ocorrer aquando da gemulação em que há um alongamento e ocorre uma falha na separação a partir da célula mãe, o que produz filamentos alongados, que mantém as constrições nas junções do septo, sendo que o seu comprimento é bastante variável.
colaração de prata metanamida onde as leveduras ficam coradas em marrom 
· Criptococcus spp.
Caracterísitcas gerais
· São leveduras saprófitasencapsuladas;
· Habitam o solo, matéria orgânca;
· Morfologicamente se caracterizam como células ovais ou arredondadas encapsulados;
· Fatores de virulência: produção de melanina (proteção contra raios UV), cápsula polissacarídica (proteção contra amebas e S. imune);
· Espécies associadas a criptococose: 
· Complexo C. neoformans está associado a matéria orgânica no solo e fezes de aves, como pombos.
· Complexo C. gatii está associado a matéria orgânica, principalmente ocos de arvore e plantas de eucalipto;
· Possui diversos genótipos e sorotipos diferentes; mundialmente o mais encontrado é o genótipo VN1, mas no Brasil, em relação a animais, o genótipo mais associado a infecções é o VG2;
Epidemiologia:
Duas formas de infecção: via cutânea e via inalatória, sendo esta última mais comum.
Patogenia:
O fungo tem seu contato com o trato respiratório superior, causando criptococose no plano nasal; o fungo também pode se disseminar para o pulmão onde irá se depositar nos alvéolos pulmonar causando criptococose pulmonar.
O criptococcus podem também ser endocitados e sobreviver dentro dos macrófagos, devido a uma predileção do fungo pelo SNC ele circula com o macrófago até o SNC e atravessar a barreira hematoencicefalica (mecanismo de cavalo de troia), causando meningo encefalite criptococcica.
Criptococcose cutânea: Ocorrência de lesão ulcerada no plano nasal, lesão nodular característica chamada de nariz de palhaço;
Diagnóstico:
Direto
· Amostras clínicas: Secreção nasal (punção), lavado broncoalveolar, liquor;
· Citologia e histopatologia 
· Colorações:
· Tinta nanquin: O entorno dos fungos fica corado mas a cápsula não é corada; 
· H.E: coram a parede basofilica mas não coram a capsula;
· Gomori grocott: impregnam em carboidratos da parede celular e da cápsula, deixando o entorno verde e o criptococos em roxo;
· Fontana masson: impregnam em carboidratos da parede celular deixando entorno amarelado e o criptococos em lilás;
Cultura fúngica
· Meios: Sabouraud, 2 mas não crescem em S+C+ cicloeximida;
· Teste bioquímicos: uréase e cultivo no meio CGB;
· Teste de melanização; ágar niger;
Criptococcus neoformans
PAS
· Malassazeia spp.
Caracteristicas Gerais
· Leveduras lipofílicas comensais, possuem afinidade por regiões com alto aporte de ácidos graxos;
· Possuem formato semelhante a um cantil /pegada
· Colonizam canal auditivo externo, espaço interdigital e regiões de dobradura de pele
· Sua reprodução por brotamento unipolar produz células-filhas que geralmente não se desprendem da mãe, ficando ligadas por uma cicatriz de brotamento chamada de colarete ou ponto de constrição;
· Sua principal espécie é a Malassezia packydermatis, a única levedura não lipo-dependente, ou seja, que não necessita de ácidos graxos para poder se desenvolver;
· Causam malasseziose de forma primária ou a partir de forma oportunistas;
Patogenia:
 Diagnóstico
Direto
· Amostras clínicas: swab auricular (exsudato auditivo), raspado de pele (escamas e pelos);
· Microscopia: KOH 10-40% (amostras de escamas e pelo) visualização de leveduras em brotamento em formato de cantil e debris celulares;
· Coloração: Panótico, gram;
Cultura fúngica
· Meios: Sabouraud1-2(inibe algumas bactérias)-3(fungos ambientais); Sabouraud + ácidos graxos;
· Testes bioquímicos: Urease,
Malassezia 
 Estruturas arredondadas ou ovais em gemulação (blastoconídios), associadas ou não à presença de hifas e pseudo-hifa
Dimorficos
Características Gerais
· Fungos saprófitos que existem em duas formas: levedura e filamentosa; Quando estão no ambiente (25°) estão na forma filamentosa, no tecido do organismo (37) estão na forma leveduriforme;
· Habitam o solo e vegetações em decomposição, alguns crescendo em madeiras úmidas;
· Causam infecções oportunistas;
Patogenia:
· Causadores de micose profunda: Histoplasma capsulatum, coccidioides posadasii, paracoccidioides brasiliensis, Blastomyces dermatitidis; 
· Causadores de micose subcutânea: Sporothrix schenckii;
· Blastomices dermatitidis
visualização dos macro e microconídeos, os últimos que são a forma infectante;
· Histoplasma capsulatum
· Morfologicamente à 25° se apresentam como hifas hialinas, septadas contendo a presença de macroconídeos com espículas e microconídeos infectantes;
· Morfologicamente à 37° se apresentam como leveduras ovais de parede espessa, geralmente dentro de outras células;
· Habitam solos, excreta de aves e morcegos, porões e galinheiros;
· Epidemiologicamente afeta equinos, cães, gatos, bovinos, roedores, marsupiais e quirópteros; nas aves a temperatura dificulta o crescimento fúngico;
· Causam histoplasmose, também chamada de doença de Darling, das cavernas ou espeleólogos;
· A patologia ocorre por inalação ou ingestão do conídeo, principalmente microconídeos;
· A histoplasmose se manifesta na pele, linfonodos e tecido subcutâneo;
· Exemplos: H. capsulatum var. 
· Capsulatum: homem e animais
· Duboisii: homem e animais
· Farciminosum: animais (equídeos)
· Diagnóstico
· Amostra clínica: punção aspirativa ou biópsia dos linfonodos, fígado, baço, nódulos na derme;
· Citologia: coloração de diff-quik, giemsa, Wright modificados;
· Histopatologia: coloração de PAS e prata metanamina;
· Exame direto: KOH 10 %, gram, panótico;
· Cultura fúngica: crescem lentamente nos meios sabouraud, 1,poucos crescem no 2 e 3;
***Quando há dúvidas a respeito do gênero da cultura fúngica deve ser feita a conversão do fungo para sua forma de levedura, através de cultivo a 37° para confirmação***
· Tratamento e prevenção
· Uso de antibióticos como itraconazol, fluconazol, anfotericina B;
· A prevenção consiste na limpeza regular de galinheiros, porões, usos de máscara nestes locais, limpeza com solução de formalina 3% no ambiente;
 Macroconídios com espículas (estalaminosporos), pequenos microconídeos que são a forma infectante;
 Leveduras ovais, pequenas, em brotamento. Em macrófagos e em cultura a 37º. Possuem uma parede espessa que causa birrefringencia; Apresentando-se dentro de macrófagos.
· Coccidiodes posadasii
visualização do artroconídeo com a produção de esporos de forma intercalada na hifa, característica de coccidioides;
Esférulas contendo endoconídeos dentro do tecido;
· Paracoccidioides brasiliensis;
Infecta seres humanos, na forma filamentosa se assemelha ao blasstomyces dermatitidis já sua forma de levedura possui um múltiplo brotamento e uma espessa camada, se assemelhando a uma roda de leme, uma célula central e alguns conídeos saindo dela.
· Sporotrix schenckii
· Causam micose subcutânea subaguda ou crônica de caráter zooótico;
· Epidemiologicamente é uma doença cosmopolita transmitida por gatos através de arranhadura, mordedura e secreções de lesões;
· O fungo habita nos solos ricos em matéria orgânica, como folhas, espinhos de rosas, madeiras;
· A patogenia se desenvolve como nódulos ou feridas não responsivas a antibioticoterapia, evoluindo para lesões ulceradas, crostosas, com exsudato purulento ou sanguinolento; Em casos graves pode haver a disseminação do fungo;
· Diagnóstico
· Amostras clínicas: Punção, imprint, biópsia;
· Exame direto: KOH, gram, panotico, lactofenol-azul algodão;
· Cultura fúngica: Meios de sabouraud 1, 2,3;
· Reversão: Ágar BHI, sabouraud+cloranfenicol (forma levedura não cresce em 3); 
· Tratamento e Prevenção
· Itraconazol, anfotericina B, iodeto de potássio
· Na prevenção utiliza-se luvas na manipulação de plantas e solo, na manipulação de animais doentes, desinfecção das instalações e castração de gatos machos; 
***Corpo asteroide-fenômeno de splendore-hoepli: reação a presença do sporotrix, antígenos do fungo reagem com anticorpos do hospedeiro criando essa zona que reage a hematoxilina***
forma filamentosa coniosporos na extremidade da hifa com conideos agrupados em formato de roseta;
Sporotrix formato de charuto, pode ser confundido com histoplasma , a diferença pode ser na anamnese já que o sporotrix é de fonte zoonotica e o histoplasma é saprofito estando no solo; 
Micoses subcutânea: Infecções localizadas que podem adquirir caráter sistêmicoa medida que os fungos oportunistas invadam a corrente sanguínea. Ocasionada por fungos que geralmente não causam doenças mas acidentalmente podem causar, causada por um diversificado grupo de fungos saprófitos e por não fungos, microorganismos semelhantes a eles;
Os fungos ou símiles adentram a partir de uma lesão no tecido, assim eles aderem ao tecido gerando inflamação, podendo em seguida se espalhar pelo organismo causando uma infecção sistêmica. 
Ex: esporotricose, micetoma eumicótico, zigomicose, rinosporidiose, dentre outros.
Zigomicetos
Caracteristicas gerais
· Possuem hifas largas, tortuosas, relativamente cenocíticas já que por vezes possuem alguns septos porem não visíveis entre si.
· São fungos saprófitos;
· Distribuidos de forma ampla no ambiente;
· Crescem rapidamente no meio sabouraud; porém não crescem em meio S+ cicloeximida;
· Causam infecções oportunistas esporádicas em animais chamada zigomicose. 
· Produtores de exotoxinas;
Ordem Mucorales
Gêneros: Mucor, rhizomucor, rhizopus, mortierella;
Caracteristicas gerais:
· São classificados fenotipicamente pela produção de esporângios (aparelho de frutificação assexuado) dentro do esporangiosporo, a diferenciação dentre seus gêneros é feita a partir da avaliação do tamanho dos esporangiosporos, sua ramificação, presença de raiz ou rizoide, presença de apêndices.
· Saprófitos presentes no solo e na vegetação; 
· Fazem parte da microbiota transitória da pele e mucosas de mamíferos;
· Causam Mucormicose que se apresenta nas formas clínicas: cutânea, subcutânea, pulmonar, gastro-entérica, visceral/sistêmica, rinocerebral;
· Raramente causam infecções em animais com exceção da Mortierella wolfii que causam aborto e pneumonia aguda;
Ordem Entomofitorales
Espécies: Coniobolus coronatus e basidiobolus ranarum;
Caracteristicas gerais:
· Não possuem esporangiosporos.
· Seu habitat são solos, frutas, material em decomposição, fezes de animais;
· Causam entomofteromicose, a forma clínica ocorre pela inoculação traumática ou inalação de esporos. Ocorrem nas formas clínicas: cutânea ou/e subcutânea crônica localizada e centrofacial crônica;
Diagnóstico
Direto :
· Amostras clínicas: Biópsia, punção; 
· Microscopia: KOH 10 a 40%
· Complementar
· Histológico: coloração de PAS, GMS e H.E;
· Citológico
Cultura fúngica: 
· Meios seletivos: Sabouraud, S+cloranfenicol, S+C+cicloeximida (inibe leveduras saprofitas); CHROMágar cândida - meio diferenciação a partir da cor, onde se veem colônias mistas coradas de forma diferente, permitindo o isolamento das espécies. É um meio presuntivo e seletivo, já possui cloranfenicol; 
· Testes bioquímicos:
· Conidiobolus coronatus
Conídeo único, rodeado de projeções claras remanescentes das hifas;
· Rhizopus
Hifas largas, tortuosas, relativamente cenocíticas, com presença de esporângios dentro do esporangiosporo na extremidade; 
 
Semelhantes a fungos
Pythium insidiosum
· Microorganismo semelhante a fungo, sendo um patógeno oportunista de ocorrência acidental em animais;
· Habita lugares aquáticos, necessitando de plantas para completar seu ciclo biológico;
· A forma de infecção ocorre pela ingestão de águas contaminadas e entrada pela pele lesionada;
· A estrutura infectante é um zoospóro móvel.
· Morfologicamente se apresenta como hifas largas, tortuosas e cenocíticas;
Patogenia: 
· zoósporos flagelados – pele lesionada/mucosa intestinal – adesão( através de material viscoso) – tubo germinativo – hifas asseptadas a temperatura corporal – invadem tecidos e corrente sang.
· Afeta principalmente equinos e cães;
· Pitiose cutânea: nódulos granulomatosas que ulceram; Outras: pitiose ganglionar e intestinal;
Diagnóstico:
Direto
· Amostra clínica: biópsia;
· Histopatológico: coloração de H.E, PAS, GMS (prata)
Cultura fúngica:
· Meios: Ágar sabouraud, ágar sabouraud com cloranfenicol; 
· Pythium insidiosum
pseudo-fungo, hifas estéreis sem a presença de estruturas de frutificação;
***Diferenciação entre Zigomicetos e Pythium insidiosum é devido a presença nos zigomicetos de estruturas de frutificação, como esporangiosporos e conideos únicos, ambos não são encontrados em pythium, os quais apenas apresentam hifas estéreis;***
· Rhinosporidium
 Protozoário. Estruturas arredondadas ou esférulas com parede grossa e trofozoitas no interior (endósporos)
Aspergillus fumigatus
 
Características gerais:
· Fungos filamentosos saprofíticos
· Causam infecções oportunistas;
· A espécie mais envolvida em invasões teciduais é o Aspergillus fumigatus;
· São aeróbios, possuem crescimento rápido;
· São termotolerantes, cresce em temperaturas de 25 a 50°.
· São os principais fungos causadores de aborto micótico, ocorrendo nos últimos meses de gestação;
Morfologia
· Hifas septadas, hialinas;
· Seus conidióforos são característicos do gênero, apresentando-se como uma estrutura reta partindo de uma hifa especializada, na ponta do conidióforo há um alargamento que forma uma vesícula da onde partem fileiras de conídeos redondos.