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1. Explique o que são seres eucariontes e procariontes, exemplificando um ser de cada espécie e esquematizando sua célula e/ou sua estrutura. Seres eucariontes tem como definição de núcleo verdadeiro,é uma célula mais com- plexa com núcleo definido e maior estrutura,reproduzem-se por mitose e meiose.Já os seres procariontes não possuem organelas membranosas,seu material genético está no citoplasma. Exemplos de seres eucariontes: fungos,plantas e animais. Seres procariontes: bactérias e arqueias. 2. Cite as principais diferenças entre os agentes agressores. Nos procariontes o cromossomo bacteriano possui genes que codificam as proteínas para que ocorra o funcionamento da célula. Nas eucariontes tem presença de um núcleo delimitado por envoltório nuclear,que protegeas moléculas de dna existentes nessa região. 3. Explique as composições das membranas das bactérias Gram + e Gram –. Nas bactérias gram positivas tem maior quantidade de peotioglicano e ácidos teicoi- cos. Gram negativas a parede celular apresenta maior complexidade, com o peptioglicano em menor quantidade também possui uma outra membrana externa formada por lipo- polissacarídeo. 4. Explique o processo de coloração de GRAM passo a passo, e ao fim, explique por que cada tipo de bactéria cora de uma cor específica. I. Para o preparo da coloração de gram é preciso a preparação da lâmina com a fixa- ção do esfregaço da amostra. II. Após fixação em lâmina, aplicar a violeta de genciana(corante púrpura),esperar 1 minuto o corante agir e logo após lavar com água destilada. III. As células absorvem a solução e ficam coradas de púrpura. IV. aplica-se a solução de iodo mordente e deixa agir por 1 minuto. V. As células ficam azul escuras depois da aplicação do corante na lâmina. VI. É utilizado agente descorante para que aconteça a descoloração e espera agir por 15 segundos. VII. células gram positivas ficam azul escurs e gram negativas sem cor. VIII. feito as etapas acima é aplicado agente contrastante safranina por 30 segun- dos na lâmina preparada IX. então as celúlas gram positivas ficam azuis escuras e gram negativas ficam róseas ou vermelhas na lâmina X. Após concluida todas as etapas a lâmina é levada para observação no microscópio eletrônico. A cor vai variar de bactéria para bactéria de acordo com sua morfologia e característi- cas da parede celular,a fim de,facilitar para o diagnóstico eficaz do exame e o médico prosseguir para o tratamento com êxito. 5. A respeito das Micobactérias, explique: a) Qual a coloração específica para elas? Coloração Ziehl-Neelsen b) Por que não podem ser coradas com GRAM? O álcool tem resistência que impede a coloração das bactérias para serem avalia- das pela técnica de gram. 6. A respeito do crescimento microbiano: a) Quais são os principais fatores que afetam o crescimento? Diversas coisas podem afetar o crescimento microbiano em diferentes situações, a temperatura, além de outros fatores como pH, quantidade de oxigênio e pressão osmótica são exemplos de fatores que afetam diretamente no metabolismo desses microorganismos. b) Explique o que são microrganismos Termófilos, Mesófilos, Psicrófilos e Hipertermófilos; Para diferentes microorganismos, existem diferentes temperaturas ótimas para seu metabolismo, eles são caracterizados em: Termófilos: microorganismos que sobrevivem em altas temperaturas, entre 50ºC a 60ºC. Hipertermófilos: são uma espécie mais extrema que os termófilos, crescendo em temperaturas acima de 80ºC. Mesófilos: microorganismos que crescem em temperatura moderada, normalmente entre 25ºC a 40ºC. Psicrófilos: microorganismos de temperatura ótima baixa, entre 15ºC a 20ºC. c) Explique o que são microrganismos Acidófilos, Neutrófilos e Alcalifílicos. Quando se diz respeito a concentração do pH, o microorganismo deve ser capaz de manter o seu pH intracelular neutro, independente do valor externo. Acidófilos: organismos de pH ótimo na faixa de 0,1 a 5,4. Neutrófilos: microorganismos que crescem em pH ótimo de 5,4 a 8,5. Alcalófilos: assim como o nome sugerem, organismos que tem pH ótimo alcalino, entre 8,5 e 11,5. 7. Sobre os Cocos Gram +: a) Quais são as duas famílias de importância clínica? Dentre os cocos gram +, destacam-se as famílias Micrococcaceae e Streptococca- ceae. b) Como elas se subdividem? A família Micrococcaceae tem como principal representante clínico os Staphylococ- cus spp., já a família Streptococcaceae se divide em streptococcus, enterococcus e aerococcus. c) Cite 3 doenças causadas pelos Cocos gram + e 3 doenças causadas pelos Bacilos gram +. Dentre as doenças causadas por cocos gram positivos, existe a síndrome da pele escaldada, causada pela Staphylococcus aureus; Endocardite infecciosa, causada pela bactéria Streptococcus viridans; Meningite neonatal, causada pela Enterococ- cus faecium. Já as doenças relacionadas a bacilos gram positivos, podemos mencionar o tétano, causado pela bactéria Clostridium tetani; Botulismo, causado pela Clostridium botu- linium; Gangrena gasosa, que é causada pela Clostridium perfringens. 8. Como é feita a separação dos Staphylococcus para os Streptococcus? Expli- que detalhadamente o passo a passo. Existe uma enzima chamada catalase, responsável por converter o peróxido de hi- drogênio em oxigênio + água, com essa liberação de oxigênio resulta em bolhas de ar que são facilmente identificáveis em um teste laboratorial. É feito um esfregaço nas lâminas com cada amostra e depois, água oxigenada é colocada na lâmina, re- sultando na visível diferenciação de cada amostra. No caso, o Staphylococcus tem a enzima catalase ativa, já a Streptococcus não. 9. Grupo Neisseria: a) Quais são os tipos que compõem o grupo? Neisseria lactamica, Neisseria cinérea, Neisseria polysaccharea, Neisseria subfla- va, Neisseria sicca, Neisseria mucosa, Neisseria flavescens, Neisseria elongata, Neisseria meningitidis e Neisseria gonorrhoeae. b) Quais são as doenças causadas? Meningite, meningococcemia, gonorreia, conjuntivite neonatal e a doença inflamat- ória pélvica. c) Explique as provas bioquímicas que classificam cada tipo de Neisseria. A Prova de degradação dos carboidratos (açúcares) Prepara-se uma suspensão densa da bactéria em solução salina 0,85%, utilizando o crescimento de uma sub- cultura pura, obtida a partir do meio de isolamento não seletivo (ágar chocolate enri- quecido) com crescimento de 18 horas. Pingue de duas a três gotas em cada um dos tubos de CTA, contendo1 de cada um dos açúcares (glicose, maltose e sacarose, res- pectivamente). Misture a solução no terço superior do meio com alça bacteriológica. Incube entre 35,5 e 36,5ºC por 24, 48 e 72 horas, sem atmosfera de CO2, essa prova será positiva para Neisseria gonorrhoeae, apenas quando a glicose for o único carboidrato metabolizado e na neisseria meningitidis quando ouver acidificação da glicose e da maltose. A reação de oxidase colocando o reativo diretamente sobre a colônia, na placa de cultivo, ou preparando previamente uma fita de oxidase. Se você utilizar o re- ativo em solução sobre a colônia, este deverá ser preparado no momento do uso, não podendo ser estocado. Se você preferir utilizar as fitas reativas de oxidase, veja como prepará-Ias em Preparo dos meios. Para realizar a reação da oxidase, pegue uma colônia suspeita e esfregue-a sobre a fita. A cor rosa aparecerá rapidamente, entre 10 a 20 segundos, nas reações positivas, como a neisseria gonorrhoeae. Na catalase, Com o auxílio de uma alça bacteriológica, pegue uma colônia sus- peita do meio de TMm e homogeneíze sobre uma lâmina limpa, seca e desengordura- da, adicione uma gota de peróxido de hidrogênio a 10 volumes, que correspon- de a uma solução a 3%. A reação de catalase detecta uma enzima hemoprotéica, que cataliza a quebra do peróxido de hidrogênio em oxigênio e água. Na reação positiva, ocorrerá desprendimento de pequenas bolhas e, na reação negativa, o líquido permanecerá inalterado. A Neisseria gonorrhoeaecaracteriza-se por apresentar reação de catalase positiva, indicando a produção dessa enzima. 10. Família Enterobacteriaceae: a) Quais são os Bacilos Gram Negativos de importância médica? Citrobacter freundii, Citrobacter koseri, Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloa- cae,Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Morganella morga- nii, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Salmonella enterica, Serratia marcescens, Shiguella sonnei, Shiguella flexineri, Yersinia pestis, Yersinia enterocolitica e Yersi- nia pseudotuberculosis. b) Quais são os Bacilos Gram Negativos capazes de fermentar Lactose? Escherichia, Klebisiella, Enterobacter, Citrobacter e Serratia spp. c) Quais são os Bacilos Gram Negativos resistentes a Sais Biliares? Proteus, Salmonella, Shigella e Yersinia.
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