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Apresentação Nesta aula, compreenderemos os conceitos fundamentais que compõem a disciplina. Perceberemos os principais aspectos que estão relacionados com a caracterização do desenvolvimento embrionário e fetal, observando a importância da manutenção do nosso cariótipo. Descreveremos a interação da matriz extracelular e dos componentes celulares, relacionando sua contribuição para a formação dos tecidos, órgãos e sistemas dos organismos. Identificaremos os principais métodos para o preparo desse tecido e sua observação nos microscópios, percebendo os principais aspectos de cada etapa e as particularidades da microscopia. Por fim, conheceremos as normas de segurança para a entrada em laboratórios, entendendo a necessidade de seu cumprimento. Objetivos · Apontar os principais aspectos relacionados ao desenvolvimento embrionário e fetal; · Descrever a interação entre os componentes que compõem os tecidos do organismo; · Identificar os principais métodos histológicos para preparo e observação dos tecidos. Embriologia O que é Embriologia? No sentido literal significa o estudo do embrião, mas comumente o termo se refere ao desenvolvimento pré-natal, ou seja, o estudo do embrião e do feto. O desenvolvimento humano desperta grande interesse, em particular o conhecimento de nossas origens e a fantástica transformação de uma única célula até a formação de um bebê. (Fonte: Shutterstock). Visão histórica sobre a Embriologia Essa curiosidade sobre a origem e o desenvolvimento do ser humano vem desde a Antiguidade, quando os investigadores desenvolveram muitas respostas para esses questionamentos. (Fonte: Shutterstock). As teorias desenvolvidas em cada época foram de grande importância para o conhecimento adquirido. Podemos observar alguns marcos dessas contribuições: · a.C. Acredita-se que um breve tratado sobre Embriologia hindu tenha sido escrito. Além disso, precisamos destacar a ajuda dos gregos nesse processo, dentre eles, Hipócrates, considerado o pai da Medicina e Aristóteles, considerado o fundador da Embriologia, que escreveu um tratado sobre o assunto. · Claudius Galeno (130-201 a.C.) Escreveu livro intitulado Sobre a formação do feto, abordando desenvolvimento e a nutrição dos fetos. · Leonardo da Vinci (1452-1519) Realizou desenhos precisos de dissecções do útero gravídico contendo um feto. · Karl Ernst von Baer (1792-1876) Passou a ser considerado o pai da Embriologia moderna por causa de sua contribuição para o conhecimento da origem de tecidos e órgãos. · Robert Edwards e Patrick Steptoe (Século XX) Foram pioneiros na técnica revolucionária do desenvolvimento humano, a fertilização in vitro. O nascimento do primeiro bebê de proveta do mundo foi um grande sucesso. O nascimento de Louise Brown ocorreu em 25 de julho de 1978, na Inglaterra. Início do desenvolvimento humano O desenvolvimento humano tem início após o encontro entre os gametas masculino e feminino, que se unem originando uma nova célula. Os humanos são seres diploides, isto é, apresentam 23 pares de cromossomos, totalizando 46 cromossomos em suas células. Entretanto, seus gametas são haploides, apresentando apenas 23 cromossomos. Os gametas apresentam a metade do número de cromossomos, porque após a fecundação será restaurado o número de cromossomos da espécie, que será mantido de geração em geração, garantindo que o cariótipo permaneça constante. Essa é uma informação importante, pois existem vários distúrbios genéticos que ocorrem por causa de alterações cromossômicas. A presença de cromossomo extra pode gerar síndromes, como Síndrome de Down (trissomia do cromossomo 21). A ausência de cromossomo, causa a Síndrome de Turner (monossomia do cromossomo X). O desenvolvimento humano é dividido em pré-natal e pós-natal O período pré-natal é dividido em: 1 EMBRIONÁRIO Ocorrem os eventos mais impressionantes de transformação. 2 FETAL Comentário Há um ramo da Embriologia, denominado Teratologia, que estuda o desenvolvimento anormal, observando a presença de malformações congênitas, que podem ser estruturais, funcionais, metabólicas, comportamentais ou hereditárias. Os estágios do desenvolvimento embrionário que são mais vulneráveis a alterações compreendem a divisão e diferenciação celular e morfogênese em seu ápice. Importância da Embriologia Muitos avanços foram alcançados por causa do melhor entendimento do desenvolvimento humano. Os profissionais da Saúde precisam ter o conhecimento das bases da Embriologia para entender as ações relacionadas à gametogênese, transportes dos gametas, fertilização, implantação, relações materno-fetal, e períodos críticos, identificando os possíveis desvios que podem ocorrer durante esse processo que culminam em malformações congênitas. (Fonte: Shutterstock). Histologia O que é Histologia? É o estudo dos tecidos. Mas, é necessário ressaltar que existem níveis de organização do corpo humano. Analisaremos a interação entre as células e o material extracelular, abordando apenas as células eucarióticas. Você se recorda dos componentes básicos dessas células? Observe a tabela a seguir com as principais estruturas e suas funções básicas. Estrutura Função básica Membrana Plasmática Controle de entrada e saída de substâncias Citoplasma Contém organelas e diversas substâncias Núcleo Contém o material genético Retículo endoplasmático rugoso Síntese proteica Retículo endoplasmático liso Síntese de lipídios Peroxissomo Degradação da água oxigenada Lisossomo Digestão intracelular Ribossomo Síntese proteica Centríolo Divisão celular Aparelho de Golgi Secreção Mitocôndria Respiração celular Localize as estruturas na imagem. A Matriz Extracelular (MEC), como o próprio nome sugere, é encontrada no lado externo da célula, produzida pela própria célula. Ela desempenha diversas funções: PREENCHER os espaços entre as células. SUPORTE, resistência, tensão, proliferação. COMUNICAÇÃO celular, entre outros. A composição e quantidade da MEC são variáveis, dependendo do tecido em questão, e podem assumir diferentes aspectos. Em geral, existem duas categorias básicas, que são as fibras e a substância fundamental. O esquema demonstra a composição geral da MEC, com dois tipos de tecidos: tecido epitelial com pouca quantidade de MEC e, logo abaixo, o tecido conjuntivo (ou conectivo) com MEC abundante. Métodos Histológicos Existem inúmeros métodos para observação e estudo dos tecidos, com a preparação de lâminas para microscopia óptica. O mais frequentemente usado é o método da parafina, que permite que o tecido se encontre o mais preservado possível mantendo sua composição e estrutura que possuía quando vivo. Leitura Técnica da parafina. Existem outros métodos de preparo para o material histológico, mas, nesta aula, só abordamos um deles. Microscopia Precisamos de equipamento que auxiliem na ampliação da imagem com boa resolução. Como são estruturas celulares, não é possível visualizá-las a olho nu. Existem diversos tipos e modelos de microscópio, com preços, funções e técnicas de preparo diferentes. Abordaremos com mais detalhes apenas o microscópio óptico. Ele possui duas grandes partes: MECÂNICA ÓPTICA • Tubo • Platina • Revólver • Braço • Parafuso macrométrico e micrométrico • Base • Condensador • Objetiva • Ocular Principais componentes do microscópio óptico: O esquema ilustra os principais componentes do microscópio óptico. Os elementos com a letra (A) se relacionam à parte óptica do microscópio e os com a letra (B) com a parte mecânica. Dica É possível calcular o poder de ampliação total do microscópio da seguinte maneira: Multiplica-se a ampliação da ocular pela ampliação da objetiva. Por exemplo: Um microscópio apresenta a ampliação da ocular de 10x e foi selecionada a ampliação da objetiva de 40x. A ampliação total será de 400x. Basta multiplicar os dois valores informados. Existem outros tipos além do microscópio óptico. Observe alguns exemplos de imagens geradas por microscópios diferentes. Microscópio óptico Imagem de um ovário corado com HE no microscópioóptico; ampliação 200x. Microscopia eletrônica de transmissão Imagem de mitocôndria realizada pelo microscópio eletrônico de transmissão. Microscopia eletrônica de varredura Imagem de Escherichia coli vista em microscópio eletrônico de varredura. Microscopia de fluorescência Imagem das células endoteliais na microscopia de fluorescência. Biossegurança É o conjunto de ações, procedimentos, técnicas, metodologia ou dispositivos capazes de minimizar os riscos relacionados com suas atividades, baseado na seguinte interação: Essa prática mantém o ambiente, os profissionais e os pacientes seguros. Existem leis e normas que regulamentam a biossegurança, tais como: • Lei Brasileira de Biossegurança 8974/95. • Norma Regulamentadora 32 (NR-32). • Norma Regulamentadora 6 (NR-6). O uso do equipamento individual (EPI) compreende os dispositivos de uso pessoal e intransferível destinados à proteção do profissional: luva, máscaras, protetores oculares, avental, jaleco, touca, propés, entre outros. Exemplo do uso de alguns EPIs para o profissional da Saúde, como touca, luva e avental. O descarte de materiais perfurocortantes também devem ser realizado de maneira apropriada em coletores específicos. Modelo de coletor de papelão para descarte de materiais perfurocortantes. Os equipamentos de proteção coletiva (EPC) abrangem autoclave, extintores, lava-olhos, cabines de segurança biológica, entre outros. Os equipamentos de proteção coletiva (EPC) abrangem autoclave, extintores, lava-olhos, cabines de segurança biológica, entre outros. Alguns exemplos de EPCs. As letras A e B se referem respectivamente ao chuveiro e lava-olhos, letra C à autoclave e a letra D a cabines de segurança biológica. Classificação dos riscos de acordo com sua natureza e padronização das cores Grupo I: Verde Riscos Físicos Grupo II: Vermelho Riscos Químicos Grupo III: Marrom Riscos Biológicos Grupo IV: Amarelo Riscos Ergonômico Grupo V: Azul Riscos de Acidentes Ruídos Poeiras Vírus Esforço físico intenso Arranjo físico inadequado Vibrações Fumos Bactérias Levantamento e transporte manual de peso Máquinas e equipamentos sem proteção Radiações ionizantes Neblinas Protozoários Exigência de postura inadequada Ferramentas adequadas ou defeituosas Radiações não ionizantes Neblinas Fungos Controle rígido de produtividade Iluminação inadequada Frio Gases Parasitas Imposição de ritmos excessivos Eletricidade Calor Vapores Bacilos Trabalhos em turnos diurno e noturno Probabilidade de incêndio ou explosão Pressões anormais Substâncias, compostos ou produtos químicos em geral - Jornada de trabalho prolongada Armazenamento inadequado Umidade - - Monotonia e repetitividade Animais peçonhentos - - - Outras situações causadoras de estresse físico e/ou psíquico Outras situações de risco que poderão contribuir para a ocorrência de acidentes Atividade 1) A Histologia é uma ciência muito antiga, muitas ferramentas e procedimentos foram desenvolvidos com a finalidade de visualizar a célula e os tecidos. A preparação de amostras biológicas retiradas de um organismo para exame microscópio compreende o momento desde a coleta do material até a coloração desse material. Sobre a técnica da parafina, é correto afirmar que: a) Na etapa de diafanização, o álcool em concentrações crescentes é utilizado para preservar o tecido. b) A coloração é realizada após o procedimento de microtomia e, geralmente, os corantes hematoxilina e eosina são utilizados, corando o núcleo de rosa e o citoplasma de roxo, respectivamente. c) A parafina fundida é utilizada para desidratar o tecido por meio do calor, pois geralmente se encontra na estufa a 60ºC. d) O xilol comumente é utilizado para tornar o tecido translúcido, sendo este miscível com o meio de inclusão. e) Na inclusão, os cortes corados são colocados na água para serem depositados nas lâminas histológicas. Gabarito comentado Parabéns! Você acertou! A resposta correta é a alternativa (d). O processo de diafanização ou clareamento, geralmente, utiliza o xilol por ser miscível com a parafina líquida que, posteriormente, o substitui, sendo este capaz de tornar o tecido translúcido. 2) As células da nossa espécie apresentam um número constante de cromossosmos, importante de ser mantido. Esses cromossomos podem ser visualizados em microscópios durante o processo de divisão celular; considerando a nossa espécie, serão encontrados, respectivamente, nos espermatozoides, nas células hepáticas e células nervosas: a) 46, 46 e 46 cromossomos. b) 23, 23 e 23 cromossomos. c) 23, 46 e 46 cromossomos. d) 46, 46 e 23 cromossomos. e) 23, 23 e 46 cromossomos. Gabarito comentado Parabéns! Você acertou! A resposta correta é a alternativa (c). Os gametas apresentam a metade do número de cromossomos da nossa espécie, 23 cromossomos. Por sermos seres diploides, as nossas células somáticas apresentam 46 cromossomos. 3) Na microscopia de luz, um dado que não pode ser excluído das imagens é sua ampliação final. Desse modo, essa ampliação final da imagem ao microscópio de luz pode ser obtida pela: a) Razão entre a distância da platina e da lâmina. b) Multiplicação da ampliação da objetiva utilizada pela ampliação das lentes oculares. c) Multiplicação da ampliação do condensador pela ampliação das lentes oculares. d) Soma dos valores obtidos pela conversão do cone de luz da lâmina que incide nas lentes oculares. e) Soma dos valores obtidos pela conversão do cone de luz da lâmina que incide no condensador. Gabarito comentado Parabéns! Você acertou! A alternativa B está correta, pois a objetiva projeta uma imagem aumentada da amostra, que, ao passar pela ocular, será ampliada novamente.
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