Aplicações farmacológicas e terapêuticas do sistema imunitário

Prévia do material em texto

Aplicações farmacológicas e terapêuticas do sistema imunitário
FARMACOTERAPIA COM ANTICORPOS
· historia da imunoterapia com antissoros
· Von Behring (nobel 1901) + Kitasato: soroterapia para difteria
· soro de coelhos imunizados com toxóide diftérico
· Erlich (Nobel 1908) valência do soro para terapia
· otimizou e padronizou a produção de soro
ANTICORPOS POLICLONAIS
(antissoros)
· envenenamentos
· cobras
· escorpiões
· infecções
· tétano
· difteria
· raiva
· são utilizados com frequências baixas em situações muito específica
· resposta diferente de acordo com o animal
· soro com anticorpos de cavalo → sistema imunitário do ser humano pode montar resposta contra os anticorpos do cavalo → doença do soro
ANTICORPOS MONOCLONAIS - HISTÓRIA
· 1975 - Milstein e Kohler descrevem hibidromas murinas (nobel 1984)
· 1985 - Muromonab - CD3 aprovado para terapia de rejeição de transplantes (até hoje existe; pouco utilizado; reações adversas severas)
· 1994 - Abciximab, primeiro anticorpo quimérico, é aprovado para terapia anti-plaquetária (mais seguros)
· 2002 - Adalimumab é o primeiro anticorpo completamente humano aprovado para terapia de doenças autoimunitarias (mais utilizado no mundo)
· 2007 - Infliximab é o primeiro anti-TNF a atingir um milhão de pessoas tratadas
· mercado vem crescendo muito
ANTICORPOS MONOCLONAIS HOJE
· 99 anticorpos monoclonais aprovados nos EUA ou Europa (atual)
· 79 em estagio final de desenvolvimento clinico (nov/2019)
· mercado de cerca de 115 bilhoes de dolares em vendas (2018), previsão de 300 bi em 2025
MAIS VENDIDOS (MAIS USADOS)
· doenças autoimunes e cancer
· Adalimumab - anti TNF alfa, artrite reumatoide, psoriase, espondilite anquilosante, doença inflaamatória intestinal
· Pembrolizumab - anti PD1, tratamento de câncer
· Nivolumab - anti-PD1, ttm de câncer
· Bevacizumab - ANTI VEGF-A, inibidor da angiogênese (vários cânceres)
· Rituximab - anti-DC20, linfomas, leucemias, rejeição de transplantes, doenças autoimunes
· Ustekinumab - anti IL-12/23 p40, psoríase, Crohn, colite ulcerativa
· Trastuzumab - anti-HER2, inibidor de fatores de crescimento (vários cânceres)
→ PREÇOS MUITO ALTOS!
TERAPIA DO CÂNCER COM ANTICORPOS MONOCLONAIS
· exemplo: rituximabe
· se liga a uma proteina CD20 (antigeno de superficie de linfocitos B)
· linfocitos B recobertos por anticorpos → anticorpos ativam o complemento → lise da celula
· esses anticorpos são reconhecidos pelos receptores FC gama da superficie das celulas NK → destruição da celula pelo mecanismo de ADCC
· reconhecimento desses anticorpos por macrofagos, monocitos → fagocita e mata
· leva a menor produção de anticorpos em pessoas normais
· em pessoas com câncer, em que as celulas B sofreram transformação maligna e viraram células tumorais
· essas células tumorais são destruídas pelo anticorpo monoclonal → por toxicidade
· funciona para o ttm de linfoma não-hodgkin!
· pembrolizumab - alteração da resposta imune do hospedeiro
· normalmente a célula T reconhece o MHC e destrói - porém as células tumorais tem mecanismos de escape - podem expressão PD-1 e PDL-1 que sao ligantes dos receptores de segundo sinal co-inibitório
· esses ligantes vão se ligar nos receptores diretamente na célula T ou indiretamente pela célula dendrítica
· Esses inibidores desligam a resposta de células T - mecanismo de evasão!
· o pembrolizumab desliga o PD-1! inibe a inibição
· estratégia revolucionária - ganhou prêmio nobel
RITUXIMAB PARA ARTRITE REUMATOIDE
· rituximab + metotrexato melhora muito a condição de vida (29 de 100 comparado com 9 de 100 que usaram só metrotrexato)
INIBIDORES DE TNF ALFA PARA ARTRITE REUMATOIDE
· etanercept (sequestra o tnf alfa)
· infliximab
· adalimumab golimumab
· certolizumab
· diferentes estratégias mas todas com o mesmo objetivo: se ligar ao Tnf alfa e impedir a sinalização pro inflamatória
· pesquisa: DMARD 41 de 100 com melhora de 50%/DMARD+etanercept 79/100 melhora de 50%)
· metrotexato: 9/100 com melhora de 50%
· metrotexato + adulimabe: 43/100 com melhora de 50%
· diminui a chance de feitos adversos quando inibe algo especifico
ANTICORPOS MONOCLONAIS EM DOENÇAS INFECCIOSAS
· virus sincicial respiratório (RSV)
· em crianças < 5 anos em todo o mundo
· 33 milhoes de casos de infecção de vias aereas inferiores
· 6,3 milhoes graves
· 3,2 milhoes de internações
· 118 mil mortes
· mediada de idade de morte: em países pobres 5 meses; em países ricos 7 anos
· tratado/prevenido com palivizumab
· redução de crianças internadas em 55%
· patente caiu em 2015, biossimilares em desenvolvimento
· 1,4 bilhoes de dolares em 2016
· anticorpos monoclonais em fase clinica
· novembro de 16: 38 anticorpos para 14 doenças: antraz, botulismo, C dificile, ebola, hepatite B, hepatite C, virus hendra, virus, herpes himplex, iv, influenza, raiva, RSV, s aureus, s epidermidis
· anticorpos monoclonais para covid 19
· aprovados para uso emergencial nos EUA: casirivimab/imdevimab (REGN-cov2); regeneron; coquetol (2mAbs)
· bamlanivimab (ly-cov555); igg1 neutralizante
· dezenas em desenvolvimento clinico
· alvos diretos no virus ou receptores
· virais, co-receptores, fatores inflamatórios
VANTAGENS E DESVANTAGENS DOS mAbs
· vantagens: 
· alta especificidade
· ativação do sistema imunitário além de se ligar ao alvo
· meia vida longa (interação com FcRn)
· desvantagens
· preço!!
· dificuldades e variabilidade na manufatura
· refrigeração
· administração intravenosa
TIPOS DE ANTICORPOS MONOCLONAIS
· murinos
· vem 100% de camundongos
· final “mab” ; exceto o muromonab “nab”
· anticorpos mais antigos
· tecnologia de hibridoma
· para ttm só existe o muromonab CD3
· alguns utilizados em diagnóstico, minoria
· quiméricos
· faz anticorpo hibridoma, sequencia o gene que codifica a cadeia pesada e a cadeia leve desse anticorpo
· pega o fragmento do gene que codifica os dominios variavel pesado e variavel leve e fusiona esse fragmento do gene que veio do hibridoma com as sequencias do gene que codificam os domínios constantes da cadeia leve e pesada de seres humanos
· 70% humano e 30% camundongo
· anticorpos humanizados
· inves de pegar a sequencia do dominio variavel inteira, pega so os CDR
· regioes que formam o paratopo do anticorpo de camundongo
· 90% humano 10% camundongo
· anticorpos totalmente humanos
· menos imunogênicos
· todos os aminoácidos derivados de uma sequência humana
· resposta imune
· adaptativa produz anticorpos contra a droga
· reconhece como antigeno
· se liga ao farmaco → destruição → perda da função
· formadção de imunocomplexos → doença do soro
· HAMA → anticorpo humano contra anticorpos do camundongo
· quanto mais p/ direita mais raros as reações
· anticorpos humanizados ou completamente humanos sao os mais utilizados
TECNOLOGIA DO HIBRIDOMA
· injeta proteina no camundongo p/ ele produzir anticorpo
· linfócitos B produzem poucos anticorpos por dia (picogramas)
· células de mieloma podem ser utilizadas (porque são células tumorais → são imortais porém não produzem anticorpos
· linfócitos B produzem anticorpos porem nao sao imortais
· fusionam as duas
· gera hibridoma!
· tem características das duas células; produz anticorpo e é imortal
· poços tem várias células que são clones
· produtividade de kg de anticorpos com mesmos aminoácidos das sequências originais
· produção em larga escala (industrial) de UM único anticorpo
· valeu prêmio nobel
· 1975
PHAGE DISPLAY
· mais recente (1985)
· virus bacteriogo → em uma das pontas tem a proteina 3 (de 3 a 5 copias dessa proteina)
· genoma (dna circular) → esse genoma tem os genes que codificam as proteinas do virus
· modifica geneticamente o gene do virus → adiciona no gene da proteína 3 um gene de interesse
· gene que codifica o dominio Fab do anticorpo (um pedaço da leve e um pedaço da pesada)
· transcreve uma proteína 3 ligado ao anticorpo
· expressa na ponta dele o anticorpo
· conexão física entre o fenótipo (anticorpo) e o genótipo (gene que codifica o anticorpo)
· exemplo: conjunto de pessoas que pegaram covid → extrai o material genético de linfocitosB → clona nas moléculas de dna circular → pega uma placa e gruda a proteina S → joga os vírus na placa → as proteinas que tem os anticorpos contra vão se grudar → lava a placa → vai sobrar apenas os que tem na ponta o anticorpo → sequencia a molécula de DNA que tava dentro do virus → com a sequência genética vc pode fazer uma nova molecula de DNA → insere numa célula de mamifero 
· da pra fazer anticorpos contra antigenos proprios, ex tnf alfa
· contra substancias toxicas também ou substancia pouco imunogenicas
· essas coisas sao dificeis de serem feitas por hibridomas; já que o camundongo morre com substancias toxicas por ex
NOVIDADES EM TECNOLOGIAS DE ANTICORPOS
· antibody-drug conjugates (ADC) - ANTICORPOS CONJUGADOS A DROGAS 
· pega um anticorpo monoclonal e conjuga uma molecula super toxica a celulas (quimioterapico) → faz com que o quimioterapico fique inativo → destrui o tumor diretamente ja que carrega diretamente para as celulas tumorais → menos efeitos adversos e mais eficazes contra as celulas tumorais
· ex: transtuzumab-DM1 (emtansine)
· mulheres com cancer Her2+; mediana de sobrevida é de 30,9 meses comparado ao 25,1 meses de mulheres tratadas com quimioterapia normal
· zevalin (ibritumomab tiuxetan) anti-CD20
· substância radioativa
· anticorpo conjugado
· mediana de sobrevida de 38 meses comparada com grupo de controle com mediana de 18 meses
· utilizado também em cintilografia (diagnóstico)
· anticorpo bi-especifico
· 2 cadeias leves diferentes e 2 cadeias pesadas diferentes
· uma ponta que reconhece o antígeno e outra que é reconhecida por receptores FC gama por células imunes
· se liga a célula tumoral, ao linfócito T e as células imunes na porção Fc receptor (celulas nk, macrofagos, celulas dendriticas)
· drogas muito caras
· BiTes (bi-specific T-cell engager)
· anticorpos modificados geneticamente (pega só o domínio variável leve-pesado e fusiona o gene que codifica esses 2 domínios com o gene que codifica o domínio variável leve-pesado de outro anticorpo)
· 2 pontas do anticorpos ligadas por um pedaço de proteína
· 1 ponta reconhece o antígeno tumoral
· 1 ponta reconhece a célula T
· traz os linfócitos T p/ perto das células tumorais → influencia na resposta imune p/ célula T matar as células tumorais
· anticorpos policlonais recombinantes
· mistura de anticorpos monoclonais diferentes
· diminui a chance de evasão
· ebola, covid
·