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QUESTIONÁRIO UNIDADE 3_BASES ANALÍTICAS DO LABORATÓRIO CLÍNICO_UNIP

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• Pergunta 1 
0,4 em 0,4 pontos 
 
A cromatografia é uma técnica que se baseia na diferença de afinidade entre uma fase 
estacionária e uma fase móvel dos solutos que compõem uma solução complexa. A 
respeito dessa técnica, assinale a alternativa correta. 
 
Resposta 
Selecionada: 
e. 
A HPLC ou cromatografia líquida de alta performance, permite a 
avaliação do tempo de retenção do analito na coluna ou a sua eluição em 
um segundo solvente, aplicado posteriormente. Após a saída do analito 
do sistema de HPLC, este passa por um sistema de detecção acoplado ao 
aparato, o que permite sua identificação. 
Respostas: a. 
Na cromatografia por coluna, quanto menor a afinidade do analito pela 
fase estacionária, mais lentamente ele migra pela coluna. 
 
b. 
Na cromatografia planar, a fase estacionária pode ser constituída de uma 
resina depositada sobre uma placa e a fase móvel, um solvente ou 
mistura de solventes no estado líquido. Quanto maior a afinidade do 
analito pela fase móvel, menor a distância percorrida pelo analito na 
placa. 
 
c. 
O fenômeno de adsorção diz respeito ao estabelecimento de interações 
intermoleculares entre as partículas do analito e a fase móvel. 
 d. 
O gás de arraste constitui a fase estacionária na cromatografia gasosa. 
 
e. 
A HPLC ou cromatografia líquida de alta performance, permite a 
avaliação do tempo de retenção do analito na coluna ou a sua eluição em 
um segundo solvente, aplicado posteriormente. Após a saída do analito 
do sistema de HPLC, este passa por um sistema de detecção acoplado ao 
aparato, o que permite sua identificação. 
Feedback 
da 
resposta: 
Resposta: E 
Comentário: Na cromatografia líquida de alta performance (HPLC), a 
amostra é aplicada em um sistema e atinge a fase estacionária, contida em 
uma coluna. Se o analito apresentar afinidade suficiente pela fase 
estacionária, ficará retido na coluna e será retirado desta quando da 
aplicação de um solvente (fase móvel) com maior afinidade pelo analito. A 
grande vantagem da HPLC é que, quando o analito sai do aparato, ele pode 
ser identificado pelo sistema de detecção (espectrômetro de massa). 
 
 
• Pergunta 2 
0,4 em 0,4 pontos 
 
Você realizou a cromatografia em papel do extrato aquoso de uma planta amazônica. Para 
isso, aplicou-se o extrato na base do papel de cromatografia e, após a secagem, o papel foi 
acondicionado em cuba contendo uma mistura de metanol e acetona. Após a corrida, 
foram identificadas 4 bandas, cujos fatores de retenção foram, 0,2, 0,4, 0,7 e 0,85. A 
respeito desse experimento, avalie as afirmativas a seguir e assinale a alternativa correta. 
 
I. No experimento acima, o papel de cromatografia constitui a fase estacionária e a solução 
de metanol e acetona, a fase móvel. 
II. A banda com fator de retenção de 0,2 migrou mais pelo papel de cromatografia do que 
a banda com fator de retenção de 0,7. 
III. A banda com fator de retenção 0,85 apresenta maior afinidade pela fase móvel do que 
a banda com fator de retenção 0,4. 
Estão corretas somente as afirmativas: 
Resposta Selecionada: c. 
I e III 
Respostas: a. 
I e II 
 b. 
II e III 
 c. 
I e III 
 d. 
I, II e III 
 e. 
Nenhuma das afirmativas está correta. 
Feedback 
da 
resposta: 
Resposta: C 
Comentário: Afirmativa I: A fase estacionária é aquela que não migra pelo 
aparato de cromatografia. No exemplo, é o papel de cromatografia. A fase 
móvel, por sua vez, migra pela fase estacionária. No caso, a solução de 
metanol e acetona. Afirmativa III: O fator de retenção é o quociente entre a 
distância percorrida pela amostra e a distância total percorrida pelo 
solvente. Quanto maior o fator de retenção, mais a banda migrou pela fase 
estacionária. Portanto, a banda com fator de retenção 0,85 migrou mais 
pelo papel de cromatografia do que a banda com fator de retenção 0,4, pelo 
fato de apresentar maior afinidade pela fase móvel. 
 
 
• Pergunta 3 
0,4 em 0,4 pontos 
 
A eletroforese é um processo que permite a separação de partículas em diâmetro coloidal 
com base na aplicação de uma carga elétrica sobre a amostra. A respeito dessa técnica, 
assinale a alternativa incorreta. 
 
Resposta 
Selecionada: 
d. 
Ao final da corrida, quanto mais distante do ponto de aplicação, maior a 
migração da macromolécula e, portanto, maior seu tamanho. 
Respostas: a. 
É muito utilizada para isolar moléculas biológicas (proteínas, DNA e 
RNA). 
 
b. 
Ao se ligar a cuba de eletroforese em uma fonte de eletricidade, a 
corrente elétrica flui pelo tampão, do polo negativo (ânodo) para o polo 
positivo (cátodo). As amostras aplicadas na extremidade do gel que está 
 
próxima ao ânodo sofrem ação da corrente elétrica e atravessam o gel 
em direção ao polo positivo. 
 c. 
Na eletroforese, a separação de macromoléculas é feita por tamanho. 
 
d. 
Ao final da corrida, quanto mais distante do ponto de aplicação, maior a 
migração da macromolécula e, portanto, maior seu tamanho. 
 
e. 
Quanto maior a concentração de agarose no gel de eletroforese, mais 
lenta é a migração das macromoléculas. 
Feedback da 
resposta: 
Resposta: D 
Comentário: A alternativa D está incorreta pois, quanto mais distante do 
ponto de aplicação, maior a migração da macromolécula e, portanto, 
menor seu tamanho. 
 
• Pergunta 4 
0,4 em 0,4 pontos 
 
A escolha do gel adequado é essencial para o êxito da corrida de eletroforese. A respeito 
das características do gel de eletroforese, assinale a alternativa correta. 
Resposta 
Selecionada: 
a. 
Os géis precisam ter sua concentração ajustada de acordo com o 
tamanho médio das macromoléculas que se deseja separar. 
Respostas: a. 
Os géis precisam ter sua concentração ajustada de acordo com o 
tamanho médio das macromoléculas que se deseja separar. 
 
b. 
O gel de agarose é mais utilizado na separação de proteínas e o de 
acrilamida, na separação de moléculas de DNA. 
 
c. 
As partículas que constituem o soluto da solução tampão também 
migram pelo gel de eletroforese e são retidas por ele. 
 
d. 
Os géis de acrilamida permitem que a corrida seja feita a seco, ou seja, 
sem a necessidade de uma solução tampão. 
 
e. 
Os géis de agarose, mas não os de acrilamida, permitem a separação 
de moléculas de diâmetro coloidal. 
Feedback da 
resposta: 
Resposta: A 
Comentário: Quanto maior a concentração do gel, mais estreita a malha do 
gel e mais difícil é a migração das moléculas maiores. Portanto, quanto 
maior o tamanho da molécula que se deseja separar, menor deve ser a 
concentração do gel e vice-versa. 
 
 
• Pergunta 5 
0,4 em 0,4 pontos 
 
A espectrofotometria é uma técnica muito utilizada no laboratório clínico e nas análises 
físico-químicas. A respeito dessa técnica, avalie as afirmativas a seguir e assinale a 
alternativa correta. 
I. Na espectrofotometria na região do visível deve-se operar com filtros cuja cor seja igual 
à da solução colorida a ser analisada. Portanto, se a solução apresentar a cor vermelha, 
deve-se usar um filtro que seleciona somente as ondas luminosas vermelhas. 
II. Absorbância é a capacidade que as moléculas têm de absorver a luz de determinado 
comprimento de onda. A absorbância depende da concentração da substância absorvente 
e da espessura da cubeta através da qual passa a luz. 
III. A espectrofotometria pode ser usada para quantificar metabólitos e outras moléculas 
de importância clínica em amostras biológicas. 
Estão corretas somente as afirmativas: 
 
Resposta Selecionada: b. 
II e III 
Respostas: a. 
I e II 
 b. 
II e III 
 c. 
I e III 
 d. 
I, II e III 
 e. 
Nenhuma das afirmativas está correta. 
Feedback 
da 
resposta: 
Resposta: B 
Comentário: Afirmativa II: Quanto maior a concentração das moléculas de 
soluto e quanto maior o caminho que a luz percorre, maior será a 
absorbância, ou seja, mais luz será absorvida. Afirmativa III: A 
espectrofotometria é muito utilizada para quantificar analitos em amostras 
biológicas. É um dos principais

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