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Processamento do RNA em eucariotos • Os RNA são sintetizados no núcleo e transportados ao citoplasma • DNA polimerase II • Na transcrição de genes que codificam proteínas pela DNA-polimerase II, os pre-RNA vão ser processados e vão sofrer splicing para gerar o RNA maduro Processamento dos precursores de mRNA • Adição de CAP na extremidade 5´ do RNA: → Reações de metilação • Adição da cauda poliA na extremidade 3´do RNA → Associada a terminação da transcrição: Adicionada após a transcrição do gene pela RNA polimerase II Funções: proteção do mRNA maduro, reconhecimento pela maquinaria de exportação para o citoplasma e pelo complexo de tradução Splicing Splicing: remoção dos introns e ligação dos exons Spliceossomo: complexo de RNAs +proteínas que remove os íntrons • SnRNA: U1,U2,U4,U6 2 etapas 1) O grupo hidroxila da sequência de ramificação (intron) faz um ataque nucleofílico ao sitio 5´de splicing da junção exon-intron, fazendo uma clivagem e formando uma alça 2) O sitio de splicing 3´é atacado pela hidroxila do exon 5´, fazendo a junção dos dois exons formando o mRNA maduro e liberando o intron OBS: O pareamento de bases é fundamental pro splicing Splicing alternativo: geração de diferentes mRNA • Retenção de intron: no mRNA existe a presença de intros Sítio doador interno alternativo: torna o íntron maior porque existe outro sítio de splicing Sitio aceptor de interno alternativo: o éxon é maior Sítio de inicio de transcrição alternativo: possibilita a dição de novos éxons Exons mutualmente exclusivos: um exón que está presente em um mRNA e ausente no outro Exon facultativo • A velocidade de síntese pode regular o splicing do pre-mRNA Processamentos dos precursores dos rRNA • Transcritos no nucléolo Pre rRNPs: contém o pré-rRNA 45S, que é fragmentado por uma série de clivagens e ação exonuleolítica, gerando os RNA ribossômicos maduros Processamento dos Pre-tRNA • Terminal CAA: ligação do aminoácido para a síntese de proteínas Atividade de exonuclease: Existem mecanismos de controle para garantir a formação correta dos tRNA → Maturação: clivagens, modificação das bases, remoção de introns, etc microRNA • Não codificantes • São gerados por sequencias codificadoras • Modificações CAP 5’ e poliA • Dupla fita: apenas uma serve como molde Atuam sobre os RNA mensageiros atuando como sinalizadores → Silenciamento → Degradação Envolvidos: diferenciação celular, doenças cardiovasculares, câncer, metabolismo Alongamento rápido: favorece a ligação dos éxons e remoção dos introns Alongamento lento: pode incluir o íntron
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